histo - tinciones Flashcards
¿Qué es tinción? ¿Cuáles son las convencionales?
La tinción es un proceso en el que se aplican colorantes a muestras biológicas para mejorar la visibilidad bajo el microscopio. Las tinciones convencionales incluyen la tinción de Gram, la tinción de Hematoxilina y Eosina (H&E), la tinción de Giemsa, entre otras.
cuales son los tipos de tinciones?
y sus ejemplos?
bicromica:
* hematoxilina-eosina
* azul de metileno-eosina
tricromica:
* Masson
* Gomori
* Mallory
policromica
* Giemsa
* Tinción de PAS
Hematoxilina-eosina
aspectos importantes
• bicromica
• tincion mas común
hematoxilina: nucleos = violeta
eosina: citoplasma = rosa
ejemplo
¿Que son las tinciones basicas? cuales son sus ejemplos?
def: aquellas que atraen moléculas con cargas (-)
son básicas:
• hematoxilina
• azul de metileno
• saframina
¿Que son las tinciones ácidas? cuales son sus ejemplos?
def: aquellas que atraen moleculas con cargas positivas
son ácidas:
• eosina
• fucsina ácida
que es la tinción de giemsa? qué la identifica y que tipo de tincion es?
es una tincion policromática y tecnica histoquímica
identifica parasitos, bactérias y células sanguineas
que compone la tinción de giemsa?A qué estructuras se conectan sus componentes y de qué color los dejan?
• azul de metileno: nucleo = azul
• eosina: citoplasma = rosa
• azul de gentiana: parasitos y bacterias = azul oscuro
ejemplo
que es la tecnica de Schiff? que componentes usa?
es lo mismo que Tinción de PAS;
utiliza Acido Perioxido de Schiff (PAS) y leucofucsina (reactivo de Schiff)
cual es el uso de la tinción de PAS?
identificacion de carbohidratos neutros:
• glucogeno
• mucopolisacaridos
como se da la tinción de PAS?
se da por una reaccion quimica entre el tejido y los dos reactivos (PAS+Leucofucsina)
PAS:
• oxida grupos -OH de los carboidratos generando grupos aldehídos (-CHO)
leucofucsina (reactivo de Schiff)
• se une a los aldehídos, colotante rojo magenta
principales caracteristicas del microscopio optico?
puede identificar …
de que depende el limite de la resolución y cual es …
- puede identificar: células y bacterias
- el limite de resolucion depende de la longitud de la onda de luz
- limite de resolucion: 0,3um
el microscopio optico es compuesto por dos sistemas, cuales son? de que se componen?
sistema mecânico: tubo, revolver, brazo, platina, tabillo macrometrico, tabillo micrométrico y base
sistema optico: ocular, objetivas, condensador, diagragma y fuente de luz
cuales son los tipos de microscopia optica?
- campo oscuro
- fluorescencia
- de luz ultravioleta
- polarización
- contraste de fase
- interferencia
- barrido confocal
cuales son los tipos de microscopia electronica?
• transmisión
• Barrido
• Barrido efecto tunel
principales caracteristicas de lo microscopio eletronico?
- limite de resolucion: ~ 0,3nm
- estudio de:
- virus
- ultraestructuras
- aglomeraciones proteicas
- filamentos citoplasmáticos o biopolimeros
- fuente de energía: electrones (de menor longitud de onda)
cuales son las etapas de la preparación de las muestras?
• fijación
• inclusión
• cortes
• desparafinación
• hidratación
• coloración
fijación de la muestra
• función
• fijadores
• métodos
•función: conservar la estructura, evitar autolisis, facilitar los cuertes y eliminar colonizaciones
•fijadores: forman una rede proteica
•metodos:
• imersión
• perfusión
inclusión de la muestra
• como ocurre
• componentes
resina o parafina liquida + disolventes o alcohol (deshidratación) = bloque de parafina o resina
realización de los cuertes
• maquina
• caracteristica
• microtomo
• cuertes muy finos
desparafinación, hidratación y coloración
• hemoxilina-eosina
• componentes
• tempos
etanol (15s) - eosina (30s) - H2Od (2-10min) - Agua de grifo (15min) - Hemoxilina (3 min)
coloración
• como se adhere los colorantes?
van a reaccionar con los componentes celulares y fisicos de la muestra generando fuerzas eletrostaticas
• cargas anionicas (-) o basofilos: se adheren a las organelas ricas en ADN y absorve hemoxilina
• **cargad cationicas (+) o acidofilos: se adhere a eosinofilos y absorve eosina
tricomica de masson
• utilización
• colorantes
• estruturas que coloren y color
utilización
diferenciar entre componentes del tejido conjuntivo las fibras musculares y las celulas sanguineas
colorantes
• azul de anilina: colageno = azul
• fucsina acida: fibras musculares = rojo
• hematoxilina: nucleo = violeta