H4.2: Histologische methoden Flashcards
Vijf stappen histologie
- Perfusie: bloed uit bloedvaten verwijderen
- Fixatie: weefsel in fixatiemiddel plaatsen (formol)
- Versnijden: microtoom of cryostaat
- Kleuring: bepaalde kleurstoffen binden selectief aan Nissl-lichaampjes
- Observatie: lichtmicroscoop, transmissie-elektronenmicroscoop, scanning-elektronenmicroscoop
Immunocytochemie
Antilichaampjes voor specifieke peptide/proteïne worden gekoppeld aan kleurstofmolecules en worden vervolgens zichtbaar gemaakt
Lichtmicroscoop
Relatief ongedetailleerd
Enkel dunne secties
Transmissie-elektronenmicroscoop
Tot op het niveau van vesikels en celorganellen
Enkel dunne secties
Scanning-elektronenmicroscoop
Minder vergroting
3D-beelden
Enkel dunne secties
Naar welke structuren sturen neuronen in een bepaalde regio axonale output?
Op welke neuronen oefenen de neuronen in een bepaalde regio invloed uit?
Volgen van de efferente axonen = anterograad labelen
Infusie met chemische substanties (PHA-L), opname door dendrieten/soma, zichtbaar gemaakt door immunocytochemie
Van welke structuren ontvangen neuronen in een bepaalde regio axonale input?
Welke neuronen oefenen invloed uit op de neuronen in een bepaalde regio?
Volgen van afferente axonen = retrograad labelen
Infusie met chemische substanties (fluorogold) die worden opgenomen door de eindknopen en getransporteerd naar soma door retrograde axoplasmatisch transport, zichtbaar gemaakt door immunocytochemie
Transneurale tracing
Verscheidene stappen in het netwerk in één keer in kaart
Retro-/antrograad transneuraal labelen
Virussen infecteren neuronen en vervolgens aanliggende schakels in de keten
Computerized tomography (CT)
Röntgen opnames worden door computer gecombineerd tot 3D weergave van hersenen
Voordelen CT (4)
3D
Goede spatiale resoltuei: goed voor botten, minder onderscheid tussen zacht weefsel
Toepassing op levend (menselijk) weefsel mogelijk
Sneller dan MRI
Nadelen CT (2)
Bestraling niet geheel onschadelijk
Metalen implantaten verstoren beeld
Neurologische conventie
Links = links
Rechts = rechts
Klinisch
Radiologische conventie
Links = rechts
Rechts = links
Wetenschappelijk
Magnetische resonantie-imaging (MRI)
Zeer sterk magnetisch veld
1. Kernen van waterstofatomen nemen dezelfde oriëntatie aan
2. Worden met een puls uit oriëntatie getikt
3. Detectie energie die vrijkomt wanneer ze terug in uniforme oriëntatie springen
Voordelen MRI (4)
3D
Goede spatiale resolutie, zeer goede contrast resolutie
Toepasbaar op levend menselijk weefsel
Geen (LT) schadelijke gevolgen veld