H10 - Basistechnieken van gentechnologie Flashcards

1
Q

Recombinant DNA

A

Samengesteld uit fragmenten van verschillende oorsprong

Vreemd DNA-fragment in vector plaatsen, laten vermenigvuldigen door gastheercel

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Cloneren

A

Klein fragment isoleren uit de grote massa en laten aanmaken in grote aantallen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

1e fase cloneren

A

Aanmaak recombinant DNA

Gebruiken 2 soorten enzymen:

  • Restrictie-enzymen = endonucleasen
  • DNA-ligase
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

2e fase cloneren

A

Reproductie van recombinant DNA

Geschikte vector en gastheer nodig:

  • Bacteriën: plasmide- en bacteriofaagvectoren
  • Gisten: artificiële chromosomen
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Plasmide

A

Extrachromosomaal, circulair en dubbelstrengs DNA-molecule

Repliceren autonoom
Mogelijk om grote DNA-moleculen binnen te laten dringen in bacteriën

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Competente cellen

A

Bacteriën die worden behandeld om DNA-moleculen te laten binnendringen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Transformatie

A

Proces van inbrengen DNA in bacteriën

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Bacteriofaag

A

Virussen uit dubbelstrengig lineair DNA-/RNA

Fragmenten omgeven door een eiwitmantel

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Artificiële chromosomen

A

Structuur van normaal chromosoom

Laten toe grote DNA-fragmenten te kloneren

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Gelelektroforese

A

Scheiding van DNA-fragmenten naar grootte (door gel)

Gebruiken van positieve pool

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Southern blotting

A

Transfer van DNA-fragmenten van een gelmatrix op een membraan
(DNA is na blotting enkelstrengs gebonden op membraan)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Hybridisatie

A

Om bepaald fragment uit een poel van fragmenten te halen
> Gebruiken complementaire streng voor DNA
> Aangeboden fragment merken door inbouw radioactieve of fluorescente groepen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

PCR

A

Polymerase Chain Reaction

Aanmaken van miljoenen copijen zonder te moeten cloneren
DNA-polymerase maakt complementaire streng vanuit oligonucleotide

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Cycli van PCR

A

Denaturatie van DNA door verwarming
Aanhechting oligonucleotide op de strengen
Aanmaak van complementaire strengen door polymerase

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Oligonucleotide

A

Synthetische DNA-moleculen van ongeveer 30 baseparen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Dideoxysequencing Fred Sanger

A

Verlenging stopt als geen hydroxylgroep aanwezig is

Dideoxynucleotiden inbouwen > 4 reacties naast elkaar op gel, verschillende lengtes aflezen

17
Q

MicroArray analyse van DNA

A

Genen onderzoeken op mutaties

DNA-chips waarop veel oligonucleotiden zijn aangebracht

18
Q

Next Generation Sequencing

A

Genoom kunnen sequencen voor lagere prijs

454 technologie
Solexa
Applied Biosystems
Ion torrent technology

19
Q

DNA-capturing

A

Gebaseerd op hybridisatie: het aanreiken van DNA-fragmenten zodat niet het hele genoom gesequeneerd moet worden

20
Q

Exoomsequensing

A

Enkel de coderende regio’s (exonen) worden nagekeken