Fluorescens

Question 1

Hva er Fluorescens?

Answer 1

Fluorescens er prosessen når et molekyl absorberer en spesifikk bølgelengde og emitterer en lys med en lengre bølgelengde.

Question 2

Forklar hva diagrammet viser
https://static.cambridge.org/binary/ver
sion/id/urn:cambridge.org:id:binary:20161109102351355-0010:9781139045452:76461fig1_3.png?pub-status=live

Answer 2

Det første vi ser er at elektroner blir eksistert fra sin grunntilstand til en høyere orbital med mer energi. deretter vil det pga vibrasjon og rotasjons bli frigitt litt energi. når elektronet da hopper tilbake til sin grunntilstand vil det si at den har mindre energi og en lengre bølgelengde enn den bølgelengden som ble send inn, dette kalles Fluorescens

Question 3

Hva er stokes shift?

Answer 3

det er energiforskjellen mellom Eksitasjonslyset (det vi sender inn) og Fluorescens lyset ( det som kommer ut)

Question 4

Hvilke krav må finnes sted om et stoff skal kunne fluorisere?

Answer 4

• Elektroner som skal eksiteres bør ikke
befinne seg i et orbital som inngår i en
enkelbinding, men burde være i en dobbel eller trippelbinding
• Elektronene må kunne bli eksitert ved
relativt liten energitilførsel
• Stoffet må ha en høy absorptivitet slik at en kan måle en absorbanstopp på et absorbansspektrum

Question 5

hvilke stoffer vil kunne fluorisere?

Answer 5

– Molekyler med dobbeltbindinger (ikke alle)
– Aromater som er koplet sammen
– Ofte stabile plane ringstrukturer

Question 6

Noen stoffer blir mer fluorescerende når de kompleks bindes med et metall, hvorfor?

Answer 6

det er ikke metallionene i seg selv som er fluoriserende men det er at den er koblet med en ringstruktur som gjør den fluoriserende da det blir dannet en stabil ringstruktur

Question 7

forklar kort hva flow cytometry er og hvordan den er brukt

Answer 7

cytometry er målingen av fysiske og kjemiske egenskaper av celler og partikler.
cellene blir plassert sammen med fluoriserende materialer som så binder seg med dem, deretter blir de vasket slik at overflødig materiale blir skylt bort. Så blir mengden fluoriserende materiale som vil si mengde analytt målt ved hjelp av en laser

Question 8

hva brukes fluorometer for?

Answer 8

Brukes til å bestemme konsentrasjon av
fluorescerende stoff eller stoff som vil gi
fluorescens i en reaksjon.

Question 9

gi eksempler på noen begrensinger som fluorimeter har

Answer 9

Ved høye konsentrasjoner vil en ofte få en
absorbans høyere enn 0,05 og det er ikke
linearitet lengre mellom konsentrasjon og
fluorescens.

Indre filter effekt
– Mye lys blir absorbert slik at det er for lite lys til å danne fluorescens lengre inn i kyvetten
– Emittert lys blir absorbert i løsningen

Quenching
– Tilstedeværelse av stoffer som hindrer fluorescens

• Andre spesielle begrensinger på forskjellige
metoder.
– pH, temperatur, andre stoffer i matrix, andre stoffer som vil reagere med reagens og danne fluorescens.