Estudio de las proteínas Flashcards
Estructura de las proteínas
Formadas por aminoácidos unidos por un enlace peptídico.
- <10aa: Oligopéptido
- > 10aa: Polipéptido
- > 50aa: Proteína
- Estructura 1º: Secuencia lineal de aa.
- Est. 2º: Disposición espacial de los aa (a-hélice, β-lámina)
- Est. 3º: Plegamiento espacial gracias a los enlaces de van der Waals y puentes disulfuro. Los aa hidrofobicos quedan en el centro de la proteína.
- Estructura 4º: Unión de varias cadenas peptídicas (e.g. hemoglobina).
Clasificación de las proteínas
- Por composición:
- Holoproteínas: Simples
- Heteroproteínas: Conjugadas (pt + grupo prostético).
- Nucleopt: ácidos nucléicos.
- Mucopt: >4% de HC.
- Glicopt: >4% de HC.
- Metalopt: Metales (Mg2+, Fe2+, …)
- Lipopt: lípidos
- Hemopt: Grupo hemo.
- Por forma:
- Globulares: Solubles en agua.
- Fibrosas: Insolubles en agua.
Fracciones electroforéticas de las proteínas séricas
- Prealbúmina
- Albúmina
- α1-globulinas
- α2-globulinas
- β-globulinas
- Fibrinógeno (solo si la muestra es plasma)
- Gamma-globulinas
Proteínas, Valores normales en suero
6-7.8 g/dL
Proteínas séricas por orden de elución en electroforesis y proteína más abundante de cada fracción
- Prealbúmina
- Proteína fijadora del retinol, 21KDa (RBP).
- Prealbúmina o transtirretina, 55KDa.
- Albúmina
- Albúmina, 66KDa.
- α1-globulinas
- α1-Antitripsina *
- α1-Glucoproteína ácida
- α2-globulinas
- α-Lipoproteínas (I y II) * (más abundante de la fracción α en general)
- α2-Macroglobulina
- Haptoglobina
- Ceruloplasmina
- β-globulinas
- Transferrina *
- Hemopexina
- Plasminógeno
- Factores C3 y C4 del complemento.
- β-lipoproteínas (LDL)
- Fibrinógeno (solo si la muestra es plasma)
- Gamma-globulinas
- IgG *
- IgA
- IgD
- IgE
- IgM
Proteínas séricas: Franja prealbúmina
Incluye la proteína fijadora del retinol, 21KDa (RBP) y prealbúmina o transtirretina, 55KDa.
Es una franja apenas visible antes de la franja de albúmina en electroforesis de suero.
Muy visible en electroforesis de LCR
Proteínas séricas: Albúmina
VN: 4-4.8 mg/dL (60% del total de Pts)
Es la proteína más abundante, soluble, homogénea y estable (vida media de 22 días). PM de 66kDa.
Hiperalbuminemia: Por desihidratación.
Hipoalbuminemia: Síndrome nefrótico, hepatopatías crónicas y otros tipo malabsorción.
La albúmina es un reactante de fase aguda negativo.
Proteínas sericas: α1-globulinas
VN: 0.2-0.35 mg/dL, 3-5% (total α-glob 0.7-1.2 o 10-16%)
Incluye α1-antitripsina (la más abundante de la fracción), α1-glicoproteína ácida, transcobalamina y protrombina.
Son en términos generales proteínas reactantes de fase aguda positivas.
AT-GPT-TranscoPro
Proteínas séricas: α2-globulinas
VN: 0.5-0.85 mg/dL, 7-12% (total α-glob 0.7-1.2 o 10-16%)
Incluye: α-lipoproteínas -HDL- (más abundante de la fracción α2 y de la fracción α en general), α2-macroglobulina, ceruloplasmina, haptoglobina.
Son en términos generales proteínas reactantes de fase aguda positivas.
HLD + MACHAquE
Proteínas séricas: β-globulinas
VN: 0.6-0.97 mg/dL (8-13%)
Incluye: Transferrina (más abundante), hemopexina, plasminógeno, factores del complemento C3 y C4, β-lipoproteínas (LDL).
CHÉ PLASTRAS
Proteínas séricas: Gamma-globulinas
VN 0.8-1.4 mg/dL (8-13%)
Encargadas de la inmunidad humoral. La más abundante es la IgG.
Entre esta fracción y la fracción Beta también aparece la proteína C reactiva, hace que esta fracción sea reactante de fase aguda positivo lento.
Proteínas séricas: α1-Antitripsina
Migración: Alfa-1-globulinas
Es una proteína inhibidora de serin proteasas (e.g. tripsina)
Es reactante de fase aguda rápido.
Proteínas séricas: α2-Macroglobulina
Migración: Alfa-2-globulinas
Proteína de alto peso molecular, inhibe proteasas.
Se encuentra elevada entre otras patologías en el síndrome nefrótico debido a que por su alto peso molecular no se pierde.
Proteínas séricas: Ceruloplasmina
Migración: Alfa-2-globulinas
Proteína transportadora de cobre.
Su deficiencia causa enfermedad de Wilson, que crea acúmulos de cobre principalmente en hígado y SNC.
Proteínas séricas: Haptoglobina
Migración: Alfa-2-globulinas
Proteína cuya función es unirse a la hemoglobina libre en los espacios intravasculares.
Es un reactante de fase aguda positivo, y también se eleva proporcionalmente hablando en el síndrome nefrótico, al no perderse tan rápido a nivel renal como otras proteínas.
Proteínas séricas: Proteína C reactiva
Migración: Entre la fraccion beta y gamma.
VN: <1 mg/dL o 10mg/L
Proteina reactante de fase aguda, rápido (12h, pico 48h). Ayuda de manera inespecifica contra procesos inflamatorios actuando a nivel complemento.
Se usa junto con la procalcitonina como marcador de reacción sistémica inducida por bacterias
Proteínas séricas: Hemopexina
Migración: Fracción beta.
Unión a los grupos hemo libres de la hemoglobina para su retirada por el SRE.
Métodos para la determinación de proteínas: Kjeldahl
Determinación de proteínas en suero basado en el contenido en nitrógeno de la muestra. Poco utilizado.
Métodos para la determinación de proteínas: Refractometría
Determinación de proteínas en suero, basado en la desviación de un haz de luz por el cambio de índice de refracción vacío-medio.
Puede dar lugar a errores en suero lipémicos o ictéricos.
*En orina se usa turbidimetría.
Métodos para la determinación de proteínas: Biuret
Método de elección. Determina proteínas séricas totales con gran precisión y exactitud.
Usa una reacción con sales de cobre y mide el compuesto coloreado violeta resultante a long. de onda 540nm.
También es usado en cierta medida en la determinación de Pt en LCR.
Métodos para la determinación de proteínas: Lowry
Usa el reactivo de Folin-Ciocalteau. Sensible pero poco específico.
No se usa en suero, pero si líquidos biológicos con menor contenido en proteínas (LCR).
Métodos para la determinación de proteínas: Unión a colorantes
Se basa en la unión de las proteínas a colorantes amónicos desplazando la absorbancia. Se usa para la determinación de albúmina en suero con verde o púrpura de bromocresol.
Métodos para la determinación de proteínas: Turbidimetría
Método para la determinación de proteínas en orina basado en la precipitación de las proteínas usando ácido trifluoroacético o sulfosalicílico y posterior medida de la turbidez.
Muy utilizado.
Métodos para la determinación de proteínas: Fijación de colorantes con indicador de pH
AKA Tiras reactivas. Usado en orina para screening.
azul de tetrabromofenol o 3’,3,5’,5-tetraclorofenol-3,4,5,5-tetrabromosulfonftaleína