Enterobacterii Flashcards
Enterobacterii - generalitati
- bacili G-, nesporulati, cei mai multi mobili, insa exista si imobili
- antigen comun
- aerobi, facultativ anaerobi
- cresc rapid, aerob si anaerob, pe o varientate de medii nonselective (geloza-sange) si selective (MacConkey)
- necesitati nutritionale simple, foarte putin pretentioase
- fermenteaza glucoza
- reduc nitratii la nitriti
- catalaza +
- oxidaza - (distinctie rapida intre EB si alti BGN -Vibrio, Pseudomonas)
- fermentarea lactozei (detectata pe MacConkey):
- lactozo negativi: Salmonella, Shigella, Yersinia (colonii incolore)
- lactozo pozitivi: Escherichia, Klebsiella, Enterobacter etc. (colonii roz-mov)
- rezistenta la saruri biliare pt. Shigella si Salmonella, in timp ce BCN comensale sunt inhibate
- majoritatea sunt mobile cu exc. Klebsiella, Shigella, Yersinia
- ubicuitari: sol, apa, vegetatie
- peste un sfert din bacteriemii
- 70% din infectiile de tract urinar
- mute infectii intestinale
EB- antigene
- lipopolizaharidul termostabil (LPS) e ag. major al peretelui celular format din trei componente:
1. polizaharidul O la ext.- incadrarea in tulpini in int. unei specii
2. polizaharid core comun pentru toate EB
3. lipidul A - endotoxina
Clasificarea serologica a EB se bazeaza pe 3 ag.
- polizaharid O somatic (serogrup)
- antigen K capsular
- antigen H flagelar (serotip)
EB - factori de patogenitate comuni
- Endotoxina (lipidul A din LPS)
- Capsula
- Variatia de faza antigenica pentru ag. O somatic, ag. K capsular si ag. H flagelar
- sisteme de secretie de tip III - seringa moleculara (aprox. 20 de proteine) care faciliteaza transferul factorilor de virulenta in interiorul celulelor tinta ale gazdei
- Sechestrarea unor factori de crestere: ex. siderofori sau compusi chelatori ai fierului
- rezistenta la serum killing (complement killing)
- rezistenta la antibiotice
Escherichia coli - boli
- specie foarte heterogena
- tulpini comensale care colonizeaza colonul la cateva ore de la nastere si domina flora aeroba intestinala la nivelul cecului si colonului
- tulpini patogene intestinale si extraintestinale
- gastroenterite, infectii extraintestinale - de tract urinar, meningite, sepsis
Diferenta intre E.coli comensal si patogen o face capacitatea de a sintetiza factori de virulenta.
E coli - factori de patogenitate
- comuni pt. EB + adezine si exotoxine
E coli care det. gastroenterita (patotipuri intestinale)
- ETEC - E coli enterotoxigenic
- EPEC - E coli enteropatogenic
- EAEC - E coli enteroagregativ
- STEC - E coli producator de toxina Shiga
- EIEC - E coli enteroinvaziv
1-3 - diaree de tip secretor, afecteaza intestinul subtire
4,5 - intestinul gros
***6. DAEC - E coli cu aderenta difuza
Pt. a dovedi ca e o tuplina patogena, diagnosticul se bazeaza pe identificarea factorilor de virulenta.
ETEC
E. coli Enterotoxigenic
- consum de alimente sau apa contaminate fecal
- diaree de tip secretor (diareea turistului)
- frecvent in tarile in curs de dezvoltare
- bacteria se atasaza la epiteliul intestinului subtire: factori de colonizare
- elaboreaza enterotoxine: termo-stabile si termo-labile
EPEC
E. coli enteropatogen
- transmitere fecal-orala
- atasarea bacteriei la celulele epiteliale ale intestinului subtire cu distrugerea microvililor
- afecteaza in principal copii sub 2 ani
- diaree apoasa, febra, varsaturi
- nu sintetizeaza toxine
EAEC
E. coli enteroagregativ
- o serie de tulpini heterogene
- caracteristic: auto-aglutinarea la nivelul epiteliului intestinului subtire si uneori colonului, aderarea la epiteliu, diaree apoasa de tip inflamator
- diaree la copii in tarile dezvoltate
- una dintre putinele bacterii asociate cu diaree cronica si retard de crestere la copii
STEC
Shiga toxin-producing E coli STEC/ verocytotoxin producing E. coli VTEC/ Enterohemoragic E coli EHEC
- VTEC nume invechit al EHEC, un subset de STEC
- prezenta toxinei Shiga 1 sau 2
- cel mai frecvent serotip asociat cu patologia umana este 0157:H7 (sub 50% din cazuri)
- diagnsticul se bazeaza pe detectia toxinei Shiga
- in special la copii sub 5 ani (carne, apa, lapte nepasteurizat, sucuri de fructe contaminate cu fecale, vegetale nepreparate termic)
- se poate transmite si de la persoana la persoana
- clinic: de la diaree usoara pana la colita hemoragica
- boala severa asociata cel mai frecvent cu serotipul 0157 :H7
- 5-10% din copiii mai mici de 10 ani infectati: se complica cu SHU (in special Stx2 distruge celulele endoteliale glomerulare»activare a trombocitelor, depunere de fibrina» scaderea filtrarii glomerulare»_space;>IRA)
EIEC
E. coli Enteroinvaziv
- tulpini rare strans inrudite fenotipic si patogenic cu Shigella
- invadeaza si distruge epiteliul colonic»_space; diaree apoasa
E coli - infectii extraintestinale + patotipuri extraintestinale (EXPEC)
Infectii de tract urinar
Meningite neonatale
Septicemia
Patotipuri: UPEC (uropatogen) si MNEC (meningitis/sepsis associated E coli)
EB - insamnatare si incubare
- toate prelevatele trebuie insamantate in maxim 2h de la recoltare
- insamnatare pe medii obisnuite
- incubare in gen. 24h
MacConkey
- mediu selectiv pt. Gram-
- inhiba flora Gram+, fungii si o serie de bacterii Gram-
EB- fermentarea glu
Toate EB fermenteaza glu, unele cu gaz, altele afra
Shigella fara gaz
Klebsiella - cantitati imense de gaz
Salmonella - cantitati moderate de gaz
Diferentierea EB de Vibrio si Pseudomonas
- EB sunt oxidaza-
EB - dg. de lab.
- Prelevare fara flora de asociatie
- bacterioscopie:BGN
- cultivare imediata (pastrare max. 2h) si izolare pe geloza sange si geloza MacConkey
- incubare aeroba 24h la 35-37 de grade - Prelevare cu flora redusa (urina si bila)
Semnificatia izolarii depinde de nr. de bacterii izolate»_space; cuantificare
Met. de referinta e metoda dilutiilor. Se insamanteaza si se det. nr. de colonii»_space; calcul .. exprimare la ml de urina.
Bila se foloseste la Salmonella typhi. - Prelevate cu flora bogata de asociatie (materii fecale)
- prelevare cu mediu de conservare
- uneori e necesara o etapa preliminara de imbogatire
- insamantare pe medii de izolare
Interpretare urocultura
Urina - sumar - orientativ»_space;> flora si leucocite
- urocultura cantitativa
sub 10 000 UFC/ml - nu e infectie urinara
10 000- 100 000 UFC/ml - prelevare incorecta si se repeta, pacient sub tratament si exista infectie urinara, copil sub 3 ani cu infectie urinara
> 100 000 UFC/ml - infectie urinara
- metoda ansei calibrate (metoda de screening) - ansa este calibrata astfel incat sa preia din lichid o cantitate de 10 microlitri de urina»_space; se insamanteaza pe MacConkey si Geloza sange.
Fenomenul Dienes la Proteus
- pe o placa 2 picaturi de Proteus invadeaza concomitent.
- daca sunt de acelasi tip se amesteca
- daca sunt de tipuri diferite- fen. de demarcatie
Medii pt. EB
Medii slab selective (MacConkey) - recomandat pt. toate EB cu exceptia Yersinia
Medii moderat selective (de ex. ADCL) - inhiba lactozo +, util pt. EB patogene lactozo - (coloniile lactozo+ sunt mai mici, semitransparente, necolorate)
Medii inalt selective
***medii selective pt EB: MacConkey, EMB, ADCL, Hektoen, SS (Shigella, Salmonella)
EB si lactoza
EB agresive patogene sunt lactozo -, iar cele nepatogene sunt lactozo+