EanimalP2 Flashcards
Las siguientes son características de los tumores malignos
Tasa de crecimiento alta
reducida dependencia al anclaje
pronunciada aneuploidia e inmortalización
Características del control alterado del crecimiento
Baja dependencia del suero o factores de crecimiento
Forman clonas con una alta dependencia de sembrado
adquieren control autónomo del crecimiento
secretan sus propios mitógenos y sus receptores
producen interleucinas 1,2 y3 (reg del ciclo celular)
Tres factores que incrementen la eficiencia de la clonación
Selección de medio enriquecido (cel nodrizas)
hormonas
moléculas de sustrato
medio condicionado
¿Cúal es el reactivo que se agrega en el ensayo de micronucleos para evitar la citocinesis?
cytochalasin B
cual es el fundamento de la técnica WST-1
Transformación de WST en formazan mediante un complejo sistema mitocondrial-succinato-tetrasodio-reductasa el cual solo esta activo en células vivas ya que en las células muertas la mitocondria no funcionan
Describa como determinaria la viabilidad celular después de un proceso de criopreservación
Evaluar la integridad de la membrana después de descongelar rápido a baño Maria 37ºC, ya sea por la incorporación de colorantes a los que es impermeable normalmente como azul de tripano
o la pérdida de colorantes que son captados por las células viables (rojo neutrón)
cual es el fundamento de la técnica WST-1
Transformación de WST en formazan mediante un complejo sistema mitocondrial-succinato-tetrasodio-reductasa el cual solo esta activo en células vivas ya que en las células muertas la mitocondria no realiza funciones . absorbancia a 450 nanometros si la celula esta muerta no hay formazan
Usted trabaja en el área de R&D de una compañía biofarmacéutica que produce proteínas de uso terapéutico en células CHO. Está trabajando en la optimización de uno de sus procesos y decide evaluar diferentes medios de cultivo, Mencione las pruebas que haría para elegir el medio de cultivo adecuado
Viabilidad MTT (sintesis de DNA) (reacción mediante formazan)
¿Cuál es el rango de porcentaje de uso de DMSO para la cripreservación?
5-15% ideal 10%
¿Cuáles son los tres principales cambios fenotípicos de las lineas celulares transformadas
inestabilidad genetica
altera la velocidad de crecimiento
tumorgenicidad y longevidad
Mencione dos criprotectores
etilenglicol y glicerol
Mencione 4 genes virales utilizados para inmortalizar linas celulares
E 1a, LT, E6, E7
mencione las diferencias entre los ensayos de viabilidad, sobrevivencia y citotoxicidad
viabilidad –> porcentaje de células viables después de un evento traumático/evalúa la integridad de la membrana
sobrevivencia–> efecto a largo plazo de influencias róxicas como radiación, drogas ya que solo sobreviven aquellas células que son resistentes y se evalúa la capacidad de formar colonias
citotoxicidad –> cualidad de ser toxico a la célula
