criopreservación Flashcards
Medio de criopreservación más utilizado
DMSO 10%
Beneficios de criopreservar
No contaminación
Distribuir la cepa a otros
Se detiene la senescencia
Variación genotípica
El congelamiento óptimo es caracterizado por:
- Número máximo de células viables después del descongelamiento gradual
- minima conformación de cristales intracelulares
- mínima formación de focos de altas concentraciones de solutos
Características para obtener un congelamiento óptimo
Congelar lento para eliminar el contenido de agua
utilizar criopreservadores hidrofílicos
almacenar a temperatura lo más baja posible
Descongelar rapidamente para minimizar formación de cristales y el daño a la célula y el gradiente de solutos
Velocidad óptima de enfriamiento
1ºC/minuto.
Es el rango adecuado entre el enfriamiento rápido para minimizar la formación de cristales y el enfriamiento lento que permite el desplazamiento extracelular del agua
La curva de enfriamiento es afectada por:
Temperatura ambiente
Aislamiento termico
La absorción de calor latente durante el congelamiento
Características del aislamiento termico
- El poliestireno provee un aislamiento térmico de 1°C/minute en el congelamiento
- Colocar en un ultra congelador a –80°
- Transferir a nitrógeno líquido después de 24 horas o un congelador de -150°C
- El nitrógeno líquido es ampliamente utilizado para almacenamiento de células por periodos largos de tiempo
Como se debe descongelar un vial
debe ser rápido a Baño maria 37ºC
¿Qué es vitrificación?
es el procedimiento por el cual un líquido se convierte en vidrio
Es un procedimiento utilizado para congelar embriones para preimplantación y células madre embrionarias humanas
Que criopreservadores se utilizan
DMSO y etilen glicol
