DNA Profil

Question 1

hva er viktige punkter man må ha med seg for å lykkes i en PCR?

Answer 1

• Primerdesign er viktig for PCR
• Sammensetning av basene
– Unngå at primerne har komplementære 
sekvenser (primerdimere)
– Unngå indre homologi (”loop”-dannelse)
• Magnesium må tilpasses hver PCR reaksjon

Question 2

hvorfor er magnesium viktig i en PCR?

Answer 2

• Magnesium viktig for bl.a. aktiviteten av
DNA-polymerasen
• Magnesium stabiliserer primer-templat
binding

Question 3

hva skjer hvis man har for høy konsentrasjon av magnesium?

Answer 3

• Jo høyere kons. av
magnesium, jo større
sjanse for uspesifikke
PCR-produkter

• For mye magnesium kan også binde opp nukleotidene, så da blir det for lite nukleotider for å danne dna tråder

Question 4

hva kan skje hvis man har for lav eller for høy temperatur i en PCR?

Answer 4

• For lav temperatur kan føre til flere uspesifikke PCR-produkter siden primerne da for sjansen til å binde seg til flere gener i dna tråden
• Ved for høy temperatur vil ikke primerne kunne binde seg til noen del av dna tråden og det vil ikke kunne skje noen PCR

Question 5

hva er forskjellen multiplex PCR og andre typer PCR?

Answer 5

i Multiplex PCR har man flere primerpar i samme rør. man kan derfor kopiere flere dna sekvenser i samme rør

Question 6

hva står STR for? og hvorfor er det viktig i dna profilering?

Answer 6

STR = Short Tandem Repeats
I noen områder varierer antallet av den repeterte enheten i et bestemt locus fraperson til person. Denne genetiske forskjellen benyttes
til å lage DNA profile

Question 7

hvordan kan man vha elektroforese om et gen er fra en kvinne eller mann?

Answer 7

det finnes visse gener som er kortere hos det ene kjønne sammenlignet med det andre.
eks: amelogenin ; gen som koder for et protein som er viktig i utviklingen av tannemalje.
Kan benyttes i kjønnsbestemmelse da exon 1 i dette genet er 6 nt kortere på X-kromosomet i forhold til Y-kromosomet. det vil si at om man får to bånd på ved PCR av dette genet så har man en mann, er det et bånd er det en kvinne