Cytométrie de flux - Dre Turcotte (AR)

Question 1

Nommer trois applications de la cytométrie en flux

Answer 1

immunophénotypage
ploïdie
maladie résiduelle
hémoglobinurie paroxystique nocturne

Question 2

3 paramètres pouvant être évalués par la cytométrie en flux

Answer 2

taille des cellules
granularité
immuno

Question 3

qu’est-ce que le forward scatter donne comme info

Answer 3

taille des cellules

Question 4

qu’est-ce que le side scatter donne comme info

Answer 4

complexité/granularité du cytoplasme

Question 5

la technique de cytométrie en flux permet d’utiliser plusieurs anticorps sur une même cellule pour connaître son immunophénotype. Ceci entraîne cependant un chauvauchement dans les signaux émis par les fluochromes.
Qu’est-ce qui doit être fait pour contrer cet effet?

Answer 5

compensation (faite par le logiciel)

Question 6

Quelle image visualisée sur le nuage de points doit nous faire penser à une compensation inadéquate?

Answer 6

image en pointe

Question 7

Nommer deux mesures (actions) de contrôle qualité en cytométrie de flux

Answer 7

évaluation de l’intensité de fluorescence et du coefficient de variation (en utilisant des particules qui ont une fluorescence stable et modérée)

évaluation du bruit de fond avec des particules non-fluorescentes

Question 8

Quels spécimens peuvent être utilisés pour la cytométrie en flux

Answer 8

tout spécimen à l’état frais duquel on peut obtenir une suspension de cellules :
ponction de liquide
sang
ponction de MO
tissu solide comme ganglion
etc

Question 9

Dans quel(s) milieu(x) doivent être mis les échantillons pour la cytométrie de flux?

Answer 9

sang et MO : tube avec anticoagulant
tissu solide : milieu de culture RPMI

Question 10

Quels genres de résultats de cytométrie de flux nous indiquent qu’on a une population néoplasique (4)?

Answer 10

• gain d’antigène non-exprimé normalement par cette lignée
• niveau d’Expression anormalement faible ou élevé, ou perte
• expression asynchrone
• expression anormalement homogène

Question 11

Quel est site de maturation des lymphocytes B

Answer 11

moelle osseuse

Question 12

QUel est le site de maturation des lymphocytes T

Answer 12

thymus

Question 13

Quels paramètres nous permettent de sélectionner la population de lymphocytes

Answer 13

CD45+
side scatter : peu ou pas granulaire
forward scatter : petite taille

Question 14

quel antigène permet d’identifier la population de plasmocytes

Answer 14

CD38

Question 15

Quels antigènes permettent d’identifier la population de lymphocytes B

Answer 15

CD20
CD19
CD22

Question 16

Quels antigènes permettent d’identifier la population T

Answer 16

CD3
CD4, CD8

Question 17

Quel est le profil suggestif d’un lymphome folliculaire

Answer 17

CD20+, CD19+ (population B)
lambda OU kappa + (population monoclonale = anormal)
CD10+ (+ dans le lymphome folliculaire)
CD5-, CD43-, CD23-, CD38- (DDx autres lymphomes B matures)

Question 18

Quels marqueurs sont suggestis d’une population B polyclonale (ex hyperplasie folliculaire réactionnelle)

Answer 18

présence des chaînes légères lambda ET kappa

Question 19

Quel est le profil attendu dans un lymphome de Hodgkin en cytométrie de flux? Expliquer brièvement.

Answer 19

absence d’anomalie (absence de population monoclonale)
parce que la proprotion de cellules tumorales dans le lymphome de Hodgkin est très faible donc on ne la détecte pas

Question 20

Vous observez une image de “botte” sur le graphique CD45 x side scatter et 2 “bosses” sur le graphique CD19 x CD20. Quel est le diagnostic le plus probable?

Answer 20

LLC/SLL

Question 21

Quel est le profil immuno de la leucémie lymphoïde chronique / lymphome lymphocytique à petites cellules B

Answer 21

marqueurs B : CD19+
CD20 diminué, CD45 dim, CD38 dim
clonalité des chaînes légères (dim), lambda ou kappa
CD23+
expression aberrante de CD5+
CD200+

Question 22

Quel est l’aspect de maturation normale de la moelle osseuse sur le graphique
a) CD13 x CD14
b) CD34 x CD117

Answer 22

a) CD13 x CD14 forme une boucle
b) CD34 x CD117 forme un hippocampe

Question 23

Nommer les marqueurs d’immaturité des blastes myéloïdes

Answer 23

CD34
CD117

Question 24

Nommer les marqueurs d’immaturité des blastes lymphoïdes

Answer 24

TdT

Question 25

Nommer les marqueurs myéloïdes

Answer 25

CD13
CD15
CD33
MPO

Question 26

Nommer les marqueurs monocytaires

Answer 26

CD4
CD14
CD33 fort
CD64
CD11b
CD68
CD36
lysozyme

Question 27

Nommer les marqueurs lymphoïdes B

Answer 27

CD19, CD22, CD79a

Question 28

Nommer les marqueurs lymphoïdes T

Answer 28

CD2
CD3 (s et c)
CD5
CD7

Question 29

Nommer les marqueurs positifs dans les lymphoblastes de la LLA-B

Answer 29

• marqueurs B : CD19, CD79a, CD22
• CD10
• CD24
• TdT (= immaturité/blastes)

(peut aussi exprimer les marqueurs myéloïdes CD13 et CD33)

Question 30

Nommer les marqueurs positifs dans la LLA-T

Answer 30

marqueurs T : CD3 cytoplamique (spécifique), CD4, CD8, CD5, CD7, CD1a
TdT (immaturité)
CD10 peut être +

Question 31

Quel est le profil attendu dans la leucémie aigüe monocytaire et monoblastique

Answer 31

marqueurs d’immaturité : CD117 + souvent que CD34
expression variable de : CD13, CD33, CD15, CD65, MPO
au moins deux marqueurs monocytaires : CD14, CD4, CD11b, CD11c, CD64, CD68, CD36, lysozyme
expression aberrante de CD56 et/ou CD7 dans 25-40%
souvent HLA-DR +