Cycle Cellulaire Flashcards
Eg cellules qui ne se divisent pas
C du foie hepatocites ou neurones
Qui est Facteur promoteur de la mitose
MPF
Transition G2/M B1
Cytometrie en flux comment
Mol fluo
Intercalant adn
Colorant
🦁Cyto en flux : qd est ce que courbe synchrone
G2M
Ct obs pdt S (replication)
Brdu : analogue thymidine
Marquage thymide 3H autoradiographie
Qui permet équilibre complexe actif ?
Synthese vs degradation
Proteasome
Qui s’occupe inhibiton
CKi
Tjs expression CdK ?
Cste mais active que avec cycline
Cdk = kinase = catalyitque
Rôle cycline
Regulatrice
Impact duplication anormale centrosomes
Polarite
Problem fuseau mitotique
Defaut divisiob
Regularion Transition G1/S
E2F accroche à Rb
Phosphorisation
E2F s’accroche sur promoteur
Regulation transition G2M
B1 3 phosp acti ou inhi
CDC 25 puis dephos cdc25
B1 p actuf
Role E2F
Facteur de transcription qui controle expression genes codant pour cyclines E et A
Qd pt de restriction
Pt de controle G1 :
Bonnes conditions pour Assez de cycline E/cdk2 areussi à être produite
Qd autoradio
Phase S
🦁Utiliser cytometrie en flux et micro confocal ?
Non
Ct activer une CdK
Phosphorisation actuvatrice CAK
PHOS inhi Wee1 Myth1
Dephos activ cdc25
Localisation subcell adequate
E2F sous unite catalytique de Prot Rb ?
Non car doit etre coupkee pour agir
Duree cycle cel
24h : 23h interphase et 1h de mitose
🦁Tous les points de controle obli ?
Que restriction G1 et pt de controle du fuseau en M
Pt de controle entree en mitose que si anomalie detectee
Relation kinase et cdk
Kinase phsophoryle et cdk regule son act
Kinase cycline dpt quand
G1 d4d6
Fin G1 E2
S A2
G2 A1
M b1
🦁Analyser phase cycle cell
Ac contre MT pas MF
Ac contre Cki
Ac contre cycline B
speci G0
cycle ou quitter (apo, senesc, differenciation)
carac G0
etat quiescent mais actif, duree variable
passage G0 a G1
presence de fac mitogenes
mesure qte ADN toutes phases du cyle
que mol fluo intercalant de AND (brdu etc QUE en S)
ct analyser diff phases
ac contre MT, cyclines, CKI
🦁nb de cell ds une phase donnee montre quoi
reflet direct de la duree
qte AND > 4C
anormal
🦁duree phases
G1 (10h), S (9h), G2(4h), M(1h)
🦁variation de duree des phases
G (et surtout G1) : tres variables, vs S etvM stables
cycle cell reorganisaiton de quoi
MT et activation proteasome
🦁qd pt de controle entr_e en mitose
G1,S,G2 QUE si pb detecte
role cdk
kinase phosphoryle autres prot et transfert le 3e phosphate de l’ATP sur prot
ordre intervention des cdk dpd de
ordre de synthese des cyclines
lien phosphorylation et etat activation
NON car phos inhi ou activatrice
act cdk/cycline sans CAK
faiblement active
🦁Wee1 phosph qui
BAE12
synthese inhibiteurs favorisee
facteurs antimotigenes
p21 ou p27
inaxtive Dimere speci (eg E2 mais pas D4)
p15 ou 16
inac monomere de cdk (eg, inhinition 4 ou 6)
acti-inhibition dpd de localisation ?
oui = regulation par localisation subcell
localisation MPF
G2:entre cyto et noyau ou phosp par wee1 =inacitf / plk active cdc25 / cdc25 et plk active MPF, debut prophase : MPF activee rentre noyau et phospho wee1 qui sort
passage du point R (entre iRrversible) dpd
facteurs mitogenes
deroulement du cyle dpd de qui apres R
facteurs internes
🦁ct petite prot G activee rasGDP –> rasGTP ?
ligand se fixe sur rece TRANSm a act tyrosine kinase => dimerisation du recep et phospds domaines IC du recep)
voie des MAP kinases
phospho active cascade de signaux IC
ct synthese de Myc
MAPK activee enter noyau et phospho autre fac de transci qui induit synthese de Myc
🦁role de Myc active
active expr de genes D, prot E2F, cdc25, p21/p27
Myc inhibe
cKi comme p15
Ct E2F relache
phosp de rb par D4D6, Rb devient incactive (change de confor) et relache E2F
🦁qui leve inhibition exercee par rb ?
factuers mitogenes
role 1 prot E2F
activ transcrip gene codant pour E et GENES DE REPLI de cdk2 => permet passage R et regulation act cdk g phosp de Rb
🦁 role 2 E2
phosp p27 -> sort du noyau -> reconnu par SCf –> proteaasome
sortir de G1 pour revenir en G0
facteurs antimitognes, senecesence, inhibition de contatc, TGFbeta, differenciation => stimule CKI => bloque cdk (contrbal fac mito)
role E2
phos Rb et active gene codant pour cycline A ET les genes de la repli => fin de G1 et debut de S
phosopho de Rb
passage de R, prep de la repli, accu E2 qui permet transtion G1/S
cancer
passage du pt R independamment de presence de facteurs mitogenes
composition centrosome
2 centriole (1 mere avec appendices), mat pericentrio, MT non depoly par drogues, sigma tubuline => ancrage
🦁qui regule sigma tubuline
kinases Plk et Aurora A
ou se trouve centrosome en G0/G1
unique et pres du noyau
qui phoso NPM
E2
qui controle et favorise duplication du centrosome
en partie A2 et E2
ct sont les pro centrioles formes
perpendiculaires aux centrioles originaux
qui clive lien fibreux en G2 et agit en mitose sur centrosome
Aurora A, plk, MPF
allongement du fuseau
polymerisation et separation des centrioles
qui : replication de AND
A2 phospho cx de prot pour repli
qui detruit E2 en S
A2
🦁pb A.D.N G1 ou G2
kinases sentinelles (ATM ATR ChK) => active p53 –> S de p21
qui bloquer en G1 vs G2
E2 vs B! (MPF)
duree cycle cell cell hepatocyte
1 an
BrdU analogue thymidine mariue aussi ADN ?
oui mais ne s’incorpore que pdt phase S
checkpoints obli
R et fuseau mitotique en mitose
🦁MAPk tjs ds noyau
non rentre qd phos
E2
- phso p27
- Rb –> E2F –> A et genes de repli
passage G1/S
accu de E2
role sigma turc
ancrage de sprot
🦁separation des centrosomes
- G1 2. G2 3.Mitose
qui regule sigma turc
Plk et aurora A
qd destrcu nucleophosmine
G1 E2 phos donc ubi proteasome
eg mutation qui entraine anomlaie polarite de cellule
plk mutant
pdt mitose : allongement du fuseau ?
oui
pq plus de E2
A2 phos E
qd verif ADN
G1/2
🦁3 roles de E2 en G1
- genes de repli de A
- phos nucleophosmine
- phos p27
🦁qui phos H3-H1 et qd
G2 - Aurora A et Plk
3e rupture centrosomes qd
G2 : Aurora A, Plk et MPF
qui active cdc25
plk
🦁qd condensation chromatine
G2 grace a H3H1 phos par aurora B et B1
location MPF
G2 : enter noyau pour etre phospho par Wee1 –> inactif dc fait navette –> actif rentre noyau
qd nucleation importante de microtubules
G2
ct sont procentrioles par rapport a avant
perpendiculaires
l🦁🦁🦁🦁e point de controle deG1 signe le debut instantane de S
nonc’est passage G1 precoce et tardive
on passe de 2n chromosomes à n chromosomes.
non pas de chgt de chromosomes mais 4C a 2C
🦁 kinase tjs une enzyme
oui
repli des centrosomes ind de repli adn
oui
🦁eg intercalant adn
iodure de prpidun et dapi
qd peut on utliser cytometrie en flux
QD on veut
🦁auraora A vs B
A : separation des centrosomes - B : appariement Bipolaire
centriol a des microtubules normaux
non diff
🦁nocodazol entraine depolimerisation totale des MT
non car ne touche pas aux MT du centriol
E2F est une prot
oui
qui inhibe E2
p21-27
🦁p.21/27 inhiber D4
non
🦁p15-p16 inhibe qui
cdk 4 ou 6
p15 ou p16 inhibe la cycline ou ka kinse et laquelle
cycline 4 ou 6
cdc25 et Plk activenet fortemement le MPf ?
oyui
regulation par localisation subcell ?
oui
phosphirlaTION DE RB regule act des cyclines
oui
pq entree en phase S
genes de la repli active - et A2 => E2 a phos rb et et activer le gene pour cycline Q
cdc25 active E2 ?
oui
ct stopper si pb ADN en G1
kinases bloquer E2 => bloquer cdc25 et rendre actif Cki de E2 : p21
ct STOP si pb adn en G2
bloquer entrre en mitose –> boloquer B1 –> bloquer cdc25 et p21
E2F = fac de transcipion
oui
🦁pq nom ‘point R’
R(b) non phosph
‘separTION 1 DES centrosomes’
eloignement des centrioles : NPM phosop
‘separation 2 des centrosomes’
VERITABLE separation des 2 centrosomes dupliques –> Aurora A, Plk et MPF clivent lien fibreux
‘separation 3 des centrosomes’
migration des 2 centrosomes vers le pole
🦁ct MT enchasses ds centrosme
y tubuline a extremite -
qd MPF agit sur centrsome
G2 : clivage lien fibreux avec Aurora A et plk
cdc25 est une kinase
non phopshatse
cki = phosphatase
non ni kinases ni phosphatase
🦁CAK = cdk
non kinase
kinase et cdk = m chose
non cdk= cycline dpd kinasevs kinase
🦁cak peut phopho cdk
non sur DIMERE
🦁rb liee a e2f
non car pas qd rb phospho
autoradiogrphie : brdu
non auTo radio - Thymidine 3h
🦁def immunohistochimie
ac avec anticorps
q mol pour immunohisto de adn
brdu
immunohistochimie ; peut e utilise tout le temps pour mesure q adn
non QUE en S
autoradio : QUE en phase S
yes
q prot du cycle cell a des receptuers tyrosine kinase
MAPkinase
🦁 mot cle exo de enonce
prot EC –> donc pas fac de transcrip
q prot qd signal de differenciation
cki
cdk peuvent etre inactiveees par des kinases cki
non car cki pas de kinases
prot chk, patm ,pATR induisent une lesion de ADN
oui car stopper le cycle
🦁p53 stable qd active ou inactive
qd ACTIVE car conformation 3d speci de la p53
fourche de repli arretee peut entrainer mort de la cell
yes
