Cours 9 - Identification des Gènes / Protéines Flashcards
Nommez 1 rôle du criblage classique
1) Générer des hypothèses (milliers de gènes à la fois)
Nommez 1 rôle du criblage inversé
1) Évaluer une hypothèse (1 gène à la fois)
Qu’est-ce qu’un criblage classique
Lorsqu’on cherche à identifier les gènes inconnus associés à un phénotype connu
Qu’est-ce qu’un criblage inversé
Lorsqu’on cherche à identifier les phénotypes inconnus associées à un gène connu
Nommez les 5 étapes d’un criblage classique
1) Élaboration du test de mesure du phénotype
2) Obtenir un mutant
3) Dépistage d’un phénotype anormal
4) Regroupement des mutants
5) Localiser le gène
Nommez 3 caractéristiques d’un test pour mesurer le phénotypes (Étape 1)
1) Simple
2) Quantitatif
3) Permet de distinguer les phénotypes normaux et anormaux
Nommez 4 modes de mutagenèses pour obtenir un mutant (Étape 2)
1) Mutations naturelles
2) Mutagenèse chimique
3) Mutagenèse par irradiation (UV)
4) Mutagenèse par insertion (Transposon)
Le mode de mutagenèse chimique provoque quel type de mutation
Des mutations ponctuelles (un seul nucléotide)
Nommez 3 conséquences possibles d’une mutation ponctuelle
1) Changement de l’AA
2) Création d’un codon stop
3) Création ou délétion d’un site d’épissage
Le mode de mutagenèse par irradiation provoque quel type de mutation
Provoque des ruptures dans l’ADN double brin
Nommez 3 conséquences possibles d’une mutation par irradiation
** Réarrangements chromosomiques **
1) Délétion / Insertion / Duplication
2) Inversion
3) Translocation
Qu’est-ce que le mode de mutagenèse par insertion
Lorsqu’on insère un gène marqueur aléatoirement qui perturbe soit la séquence (région codante) ou l’épissage du gène (région non-codante adjacente)
Vrai ou Faux
Il faut attendre plusieurs génération avant qu’une mutation soit fixée
Vrai
La 1ere génération est instable et mosaïque
=> Après 5-10 générations la/les mutations sont fixées
Décrivez la méthode pour le regroupement des mutants (Étape 4)
Test allélique: - Est-ce que 2 mutants ensemble
=> Phénotype normal (Complémentaire; Gènes différents)
=> Phénotype anormal (Pas complémentaire; Même gène)
Nommez 2 méthodes pour localiser le gène (+ modes de mutation associés)
1) Analyse de liaison (Chimique et irradiation)
2) Séquence du transposon (Insertion)
Décrivez les 3 étapes du criblage inversé
1) Identifier un gène d’intérêt
2) Perturber ce gène
3) Observer la variation des phénotypes
Nommez le rôle des siARN et shARN
Perturber l’expression d’un gène spécifique