Cours 9 - Identification des Gènes / Protéines Flashcards

1
Q

Nommez 1 rôle du criblage classique

A

1) Générer des hypothèses (milliers de gènes à la fois)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Nommez 1 rôle du criblage inversé

A

1) Évaluer une hypothèse (1 gène à la fois)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Qu’est-ce qu’un criblage classique

A

Lorsqu’on cherche à identifier les gènes inconnus associés à un phénotype connu

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Qu’est-ce qu’un criblage inversé

A

Lorsqu’on cherche à identifier les phénotypes inconnus associées à un gène connu

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Nommez les 5 étapes d’un criblage classique

A

1) Élaboration du test de mesure du phénotype
2) Obtenir un mutant
3) Dépistage d’un phénotype anormal
4) Regroupement des mutants
5) Localiser le gène

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Nommez 3 caractéristiques d’un test pour mesurer le phénotypes (Étape 1)

A

1) Simple
2) Quantitatif
3) Permet de distinguer les phénotypes normaux et anormaux

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Nommez 4 modes de mutagenèses pour obtenir un mutant (Étape 2)

A

1) Mutations naturelles
2) Mutagenèse chimique
3) Mutagenèse par irradiation (UV)
4) Mutagenèse par insertion (Transposon)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Le mode de mutagenèse chimique provoque quel type de mutation

A

Des mutations ponctuelles (un seul nucléotide)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Nommez 3 conséquences possibles d’une mutation ponctuelle

A

1) Changement de l’AA
2) Création d’un codon stop
3) Création ou délétion d’un site d’épissage

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Le mode de mutagenèse par irradiation provoque quel type de mutation

A

Provoque des ruptures dans l’ADN double brin

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Nommez 3 conséquences possibles d’une mutation par irradiation

A

** Réarrangements chromosomiques **
1) Délétion / Insertion / Duplication
2) Inversion
3) Translocation

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Qu’est-ce que le mode de mutagenèse par insertion

A

Lorsqu’on insère un gène marqueur aléatoirement qui perturbe soit la séquence (région codante) ou l’épissage du gène (région non-codante adjacente)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Vrai ou Faux
Il faut attendre plusieurs génération avant qu’une mutation soit fixée

A

Vrai
La 1ere génération est instable et mosaïque
=> Après 5-10 générations la/les mutations sont fixées

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Décrivez la méthode pour le regroupement des mutants (Étape 4)

A

Test allélique: - Est-ce que 2 mutants ensemble
=> Phénotype normal (Complémentaire; Gènes différents)
=> Phénotype anormal (Pas complémentaire; Même gène)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Nommez 2 méthodes pour localiser le gène (+ modes de mutation associés)

A

1) Analyse de liaison (Chimique et irradiation)
2) Séquence du transposon (Insertion)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Décrivez les 3 étapes du criblage inversé

A

1) Identifier un gène d’intérêt
2) Perturber ce gène
3) Observer la variation des phénotypes

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Nommez le rôle des siARN et shARN

A

Perturber l’expression d’un gène spécifique

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

Nommez 3 techniques d’édition du génome

A

1) CRISPR/Cas9 (la plus utilisée)
2) TALEN
3) Zinc finger

19
Q

Nommez le domaine de clivage associée à la méthode d’édition du génome Zinc Finger et TALEN

A

Fok1

20
Q

Que signifie CRISPR

A

Clustered Regularly Interspaced Short Palendromic Repeat

21
Q

Nommez 2 composants essentiels à la technique de CRISPR

A

1) La protéine associée à CRISPR (Cas 9)
2) Un ARN guide (ARNg)

22
Q

Qu’est-ce que Cas 9

A

Une endonucléase clivant l’ADN et encode dans l’opéron Cas du chromosome bactérien

23
Q

Nommez les 2 segments de l’ARNg de CRISPR et leur rôle

A

1) ARN CRISPR (ARNcr)
=> Criblage de l’ADN viral par appariement de bases
2) ARN CRISPR trans-activant (ARNtracr)
=> Séquence palindromique qui adopte une structure 3D servant d’échaffaudage moléculaire pour l’ancrage de l’ARNg

24
Q

Qu’est-ce que la séquence PAM

A

Il s’agit d’un mécanisme de sécurité (Motif de 3-5 nucléotides présent du côté 3’ de l’ADN cible

25
Q

Vrai ou Faux
Les séquences PAM varient

A

Vrai
Elles varient en fonction de la Cas 9 (CRISPR nucléase)

26
Q

Nommez 3 conséquences possibles à un NHEJ

A

1) Réparation
2) Délétion
3) Insertion

27
Q

Nommez les 2 voies de réparation de l’ADN d’une cassure double-brin

A

1) NHEJ
2) HDR

28
Q

Nommez 2 types de marqueurs utilisé pour faire un criblage génétique

A

1) Marqueurs microsatellites
2) Micropuce SNPs

29
Q

Nommez 1 avantage et 1 inconvéniant pour les marqueurs microsatellites

A

Avantage
=> Très polymorphique
Inconvéniant
=> Couverture inégale (parfois avec des gap)

30
Q

Nommez 1 avantage et 1 inconvéniant pour les micropuce SNPs

A

Avantage
=> Grande quantité de marqueurs (Couverture intégrale)
Inconvéniant
=> Peu polymorphique

31
Q

Qu’est-ce qu’une analyse de liaison

A

Il s’agit d’une technique de criblage génétique
- Nécessite de grandes familles
- Pour les maladies mendéliennes
=>Score LOD (significatif >= 3)

32
Q

Qu’est-ce qu’une étude d’association (GWAS)

A

Il s’agit d’une technique de criblage génétique
- Nécessite beaucoup d’individu
- Pour les maladies/ traits complexes
=>Graphique de type Manathan (Fréquence des variants)

33
Q

Nommez 3 avantages et 2 inconvéniants aux séquencages de l’exome

A

Avantages:
1) Identifie directement les variants potentiels
2) Ne nécessite pas de grande famille
3) Toutes les maladies / traits*

Inconvéniants:
1) Plus dispendieux
2) Couvre 2% du génome*

34
Q

Nommez 4 techniques de criblage génétique

A

1) Marqueurs microsatellites
2) Micropuce SNPs
3) Séquençage de l’exome
4) Séquençage du génome

35
Q

Nommez 3 avantages et 2 inconvéniants aux séquencages de l’exome

A

Avantages:
1) Identifie directement les variants potentiels
2) Ne nécessite pas de grande famille
3) Couvre le génome en ~entier*

Inconvéniants:
1) Dispendieux
2) Limitation dans l’interprétation des données*

36
Q

Nommez 3 techniques de criblage in silico

A

1) UCSF
2) Ensembl
3) BLAST

37
Q

Qu’est-ce que BLAST

A

Il s’agit d’une approche de criblage in silico
- Compare les séquences d’ADN et de protéines (similarité)
- Toute les espèces

38
Q

Qu’est-ce que Ensembl

A

Il s’agit d’une approche de criblage in silico
- Emphase sur les analyses génomiques

39
Q

Qu’est-ce que UCSC

A

Il s’agit d’une approche de criblage in silico
- Similaire à Ensembl et BLAST

40
Q

Nommez 1 rôles des criblages moléculaires

A

Identifier des gènes en lien avec un processus biologiques spécifiques

41
Q

Nommez 2 techniques de criblage moléculaire

A

1) Micro-puce cADN
2) Séquençage de l‘ARN

42
Q

Nommez 2 avantages et 1 inconvéniant de la technique de micro-puce ADNc

A

Avantage:
1) Analyse simple
2) Peu couteux

Inconvéniant:
1) Sondes prédeterminées (=> Pas d’info sur les transcris seulement l’ADN)

43
Q

Nommez 2 avantages et 2 inconvéniants de la technique de séquençage de l’ARN

A

Avantage:
1) Séquençage de tous les transcrits exprimés dans le tissu
2) Possibilité de détecter les transcrits de faible abondance

Inconvéniants:
1) Plus coûteux
2) Nécessite de l’expertise