Cours 4 - Électrophysiologie

Question 1

Nommer le(s) type(s) de pipette(s) utilisé(s) en patch-clamp

Answer 1

Pipette de verre

Question 2

Nommer le(s) type(s) de pipette(s) généralement utilisé(s) en enregistrement intracellulaire

Answer 2

Pipette en verre

Question 3

Nommer le(s) type(s) de pipette(s) généralement utilisé(s) en enregistrement extracellulaire

Answer 3

Pipette en métal

Question 4

Nommer 1 avantage de l’enregistrement extracellulaire

Answer 4

Très facile à faire

Question 5

Nommer 1 inconvéniant de l’enregistrement extracellulaire

Answer 5

Ne permet pas de mesurer les changements de potentiels sous le seuil d’un seul neurone

** Possibilité de mesurer la réponse synaptique de nombreux neurones => LFP **

Question 6

Nommer 2 avantages de la technique patch-clamp vis-à-vis d’un enregistrement intracellulaire

Answer 6

• Un meilleur ratio signal/bruit
• Possibilité d’étudier un seul canal ionique

Question 7

Nommer 3 avantages à utiliser des tranches de cerveau

Answer 7

• Enregistrements intracellulaires plus facile (Bouge pas)
• Culture à long terme possible
• Rôle des neurones dans un circuit peut être étudié

Question 8

Nommer 3 inconvéniants à utiliser des tranches de cerveau

Answer 8

• Moins bonne visibilité qu’avec des cultures isolées primaires
• Substance pharmacologique doivent pénétrer le tissu
• Connectivité peut changer à long terme

Question 9

Nommer 3 avantages au patch-clamp cellule attachée

Answer 9

• Facile
• Physiologique
• Permet l’étude d’un seul canal

Question 10

Nommer 1 inconvéniant au patch-clamp cellule attachée

Answer 10

La valeur du potentiel à la membrane n’est pas connue

Question 11

Nommer 2 avantages au patch-clamp cellule entière

Answer 11

• Permet un enregistrement en voltage imposé
• Permet de contrôler la composition du cytoplasme

Question 12

Nommer 1 inconvéniant au patch-clamp cellule entière

Answer 12

Wash-out du contenu du cytoplasme

Question 13

En voltage imposé, un courant ____________ _____________ neurone est toujours tracé vers le bas

Answer 13

En voltage imposé, un courant POSITIF ENTRANT dans le neurone est toujours tracé vers le bas

Question 14

Décrivez la procédure du patch-clamp pas à pas

Answer 14

1) Tirer une pipette (3-5 MOhm)
2) Début de la perfusion avec de l’ACSF (T°C cte)
3) Placer la tranche dans la chambre d’enregistrement
4) Placer les électrodes de stimulation
5) Placer la pipette d’enregistrement dans le ACSF en appliquant une pression positive
- Verifier si des bulles d’air obstruent la pointe
6) Mis à 0 mV
7) Impulsion de voltage rectangulaire
=>Résistance de la pipette
8) Approcher la membrane avec la pipette
=> Apparition d’une fossette
9) Relacher la pression positive et ajouter un peu de suction
- Vérifier le joint giga-Ohm
- Vérifier les paramètres (Rm > 10 Ra)