Cours 10 - Visualisation Fonctionnelle Flashcards
Nommez 3 techniques pour visualiser l’activité neuronale
1) Expression de gènes précoces immédiats
2) Prolifération cellulaire (BrdU)
3) Marqueurs sensible au voltage et calcium
Nommez 2 techniques non-électrophysiologiques pour
visualiser et manipuler l’activité du cerveau
1) Libération de molécules « uncaging »
2) Canaux activés par la lumière
Nommez 2 approches des marqueurs statiques de l’activité
1) Observer indirectement la présence d’activité en mesurant des PRODUITS (durant ou après)
2) Incorporer un marqueur dans les cellules qui indique la présence d’activité dans des futures examens HISTOLOGIQUES
Nommez le(s) limitation(s) des marqueurs statiques de l’activité
1) On observe l’activité à un moment bien défini (arrêt sur image: « snapshot ») d’un processus dynamique
Nommez 2 méthodes histologiques pour détecter les IEGs
1) Hybridation in situ
2) Immunohistochimie (Direct et Indirect)
Qu’est-ce qu’un IEG
Gène précoces immédiates
Vrai ou Faux
Les IEGs sont un produit induit lentement par l’activité neuronale
Faux
L’activité neuronale induit rapidement (quelques minutes) la
transcription transitoire des IEGs
Les IEGs encodent pour quoi
** Protéine jouant un rôle dans la plasticité neuronale **
1) Facteurs de transcription (c-fos, c-myc et c-jun)
2) Protéines interagissant avec le cytosquelette (Arc)
3) Facteurs de croissance (BDNF)
Qu’est-ce que BDNF
Il s’agit d’un facteur de croissance (Brain derived neurotrophic factor)
Qu’est-ce que Arc
Il s’agit d’une protéine interagissant avec le cytosquelette
Qu’est-ce que le Allen Brain Atlas
Il s’agit d’un site internet qui donne beaucoup d’information sur les protéines / gènes d’intérêt
Que signifie IHC
Immunohistochimie
Que signifie ISH
Hybridation in situ
Vrai ou Faux
Il existe 2 types d’immunohistochimie
Vrai
Direct et indirect
L’immunoréactivité (IHC) de __________ comme marqueur de l’activité dans l’activité dans le cortex visuel
c-Fox
** Utile aussi en ISH **
Nommez le(s) limitation(s) de l’immunoréactivé de c-Fos comme marqueur de l’activité dans le cortex visuel
1) Tissu est FIXÉ donc ne représente pas la vraie activité neuronale.
2) Marqueurs STATIQUES ne représente pas la continuité ou la dynamique des changements « snapshot ».
3) Nécessité de faire des études ADDITIONNELLES pour démontrer que les changements observés sont pertinents
Qu’est-ce que le BrdU
Aka: - Bromodeoxyuride
Il s’agit d’un nucléoside synthétique analogue de la thymine
Nommez 1 rôle de BrdU
Détecter la prolifération cellulaire dans des tissus vivants (Les cellules qui sont en train de répliquer l’ADN vont
intégrer le BrdU dans leur ADN)
Expliquez la méthode de marquage au BrdU
1) Incorporation / fixation de BrdU à l’ADN
2) Dénaturation de l’ADN
3) Liaison des anticorps anti-BrdU
4) Anticorps associés avec une molécule fluorescente
** Contrôle positif => DAPI **
Expliquez la signification des expériences de Fernando Nottebohm
Elles fournissent la preuve finale que la neurogenèse se produit dans le cerveau adulte des vertébrés
Quelle technique a permis à Fernando de prouver la neurogenèse dans le cerveau adulte des vertébrés
La méthode de marquage au BrdU
Que signifie HVC
High Vocal Center
Expliquez les expériences de Fernando Nottebohm
1) Injections de BrdU pendant 5 jours
2) Oiseaux libres de chanter pendant le reste du mois**
3) Un groupe a été stimulé à chanter et un groupe a été empêcher (Pendant 1 semaine)
4) Examens histologiques
** L’hippocampe a été utilisé comme contrôle **
Décrivez les résultats de l’expérience de Fernando Nottebohm
Le nombre de neurones marqués par BrdUrd dans le HVC du groupe chanteur été significativement plus élevé que celui du groupe non chanteur (P < 0,005)
