Cours 6 - Recepteurs Nucléaires Flashcards
Quel est la molécule précurseur de toutes les hormones stéroïdiennee ?
Cholestérol
Quelle est l’étape limitante dans la formation des hormones steroidiennes ?
Lorsque la chaine latéral du cholestérol est coupée par la P450scc
Donne le nom de 5 hormones steroidiennes produites a partir du cholestérol ?
Aldosterone (sel)
Cortisol(sucre/stress) p450c17
Testosterone p450aro
Estradiol 17b-HSD
Progesterone
Donne 4 proteines de transport des hormones lipidiques ?
Albumine
CBG
SHBG
TBG
C’est par quelle technique qu’on a pu reconnaître la majorité des recepteurs nucléaires d’aujourd’hui ?
Via homologie de séquences
Est ce qu’on connait tous les ligands des recepteurs ?
Non y’a des recepteurs orphelins on sait qu’ils existent mais on ne connaît pas leur activateur
Ex : ERR qui lie pas estradiol
Est ce que les recepteurs nucléaires ont bcp de fonctions associées
Ouiii pleins
Métabolisme
Dvlp foetal
Diff et croissance cellulaire
A quelle famille appartiennent les recepteurs nucléaires ??
Facteurs de transcription
Quelles sont les 3 caractéristiques clés des recepteurs nucléaires ?
Interaction hormone-proteine :
Activation avec liaison du ligand
Interaction protéine-ADN :
Avec promoteur ADN
Interaction protéine-protéine :
Entre le récepteur et les coactivateurs et la machinerie transcriptionnelle de base
Structurellement quelles sont les 3 composantes majeurs d’un recepteur nucléaire et ses caractéristiques ?
Domaine AF-1 :
En N-t il est très VARIABLE il est activé par PHOSPHORYLATION il associe les COFACTEURS et la TRANSCRIPTION
Doigt de Zinc :
Au milieu il est TRÈS TRÈS CONSERVÉ il lie l’ADN fait la DIMERISATION et aide a la LOCALISATION NUCLÉAIRE
Domaine AF-2 :
En C-t il est Très CONSERVÉ il lie le LIGAND les CHAPERONS les COFACTEURS et la TRANSCRIPTION
Quel est le domaine le plus conservé dans les recepteurs nucléaires ?
La structure des doigts de Zinc
Est ce que les domaines AF1 et AF2 sont dépendants ?
Nonn l’un peut fonctionner sans l’autre
Quel est le recepteur nucléaire qu’on retrouve bcp dans le cytoplasme ? Comment est il transloque dans le noyau ?
Celui des glucocorticoide
L’arrivée du cortisol dissous le lien avec les chaperones HSP90 qui bloquaient le recepteur dans le cytoplasme
=> translocation noyau
La majorité des recepteurs nucléaires sont ou ?
Deja dans le noyau voire deja lie a l’ADN juste ils sont inactifs
Y’a combien de doigts de zinc sur un monomère recepteur nucléaire ? Il s’agit de quel type de doigts de zinc ? Y’en a combien de type en tout ?
2 doigts de zinc
Doigt de zn avec 4 CYS
3 types
4 CYS
2 CYS 2 HIS
6 CYS
Est ce qu’une mutation des cys des doigts de zinc des recepteurs nucléaires serait grave ?
Oui catastrophique
Explique moi la configuration d’un recepteur homodimerique et ses caractéristiques ?
Donc 2 monomeres identiques
Ex : ER - ER
Ils sont en configuration inversée, c’est a dire qu’ils vont reconnaître sur l’ADN une IR-3 soit une region palindromiques inversée séparée par 3 Nucléotides
Explique moi la configuration d’un recepteur heterodimerique et ses caractéristiques ?
Donc 2 monomeres différents dont 1 est quasi tjrs RXR
Ex : VDR-RXR
Ils sont en configuration direct, c’est a dire qu’ils vont reconnaître sur l’ADN une DR-? des séquences répétées dans le meme sens séparées par un nombre VARIABLE de nucleotides
Mais du coup ou reside la spécificité de liaison au niveau de l’ADN pour les differents recepteurs ?? Et cela se traduit ou sur le recepteur ??
Au niveau deux 2 NUCLEOTIDES qui sont dans ces séquences IR3 ou DR?
Sur 3 acides aminés du doigts de zinc autour des cys conservées
Quelle est l’expérience clé qui permet d’étudier l’activité des facteurs de transcription ? Quel a été son 1er rôle ?
Essai de gène rapporteur de la luciférase par transfection cellulaire pour mesurer l’activité des facteurs de transcription
Identifier les éléments de réponse des promoteurs
Avec l’essai à la luciferase qu’a on pu tirer comme info sur l’identification des éléments de réponse des promoteurs
Qu’il y’avait 2 sites de liaisons sur les HRE (Element de reponse hormonale (un peu comme promoteur))
Si tu perds ces sites ou tu as des mutations dedans bah y’aura une baisse de la transcription
C’est quel analyse qui a permis d’identifier les sites de liaison du recepteur nucléaire ERalpha sur les gènes ?
Qu’a t on decouvert ?
Analyse ChiP
Immunoprecipitation de la Krmatine
La régulation distale du ERalpha par des enhancers car plus le site de liaison est distale plus y’a une grande activité
qu’est qu’on a identifié d’autres via l’analyse ChiP ?
D’autres facteurs de transcription clé comme FoxA1 à proximité de ERE
C’est quoi le rôle de la proteine FoxA1 dans la réponse estrogenique ?
Facteur de transcription pionnier qui permet de dicter l’arriver de ERalpha aux éléments ERE du génome
En gros il ouvre la chromatine pour l’arrivée de ERalpha
