Cours 5 - Signalisation Et Recepteur A Activite Enzymatique X Récepteurs-canaux Flashcards
Les RTKs sont des récepteur à activité enzymatique intrinsèque ou extrinsèque ?
Intrinsèque car capable de s’activer tout seul avec la présence d’un ligand
Topologie d’un RTK ? 2 caractéristiques principales ?
1 domaine extra cell N-t
1 passage transmembranaire
1 domaine intracellulaire C-t
Activité enzymatique de phosphorylation
Agissent sous forme de dimere
Comment fonctionne l’activation des RTK ?
Liaison du ligand favorise la dimerisation et l’activation des domaines intracellulaires contenant l’activité enzymatique qui fait la phospho
Explication de la dimerisation avec EGFR par EGF ? Partie extracellulaire
Le ligand touche le domaine 1 et 3
C’est le domaine 2 qui permet la dimerisation
Le domaine 2 est cache par domaine 4 quand inactif
Explication de la dimerisation avec EGFR par EGF ? Partie Intracellulaire (4)
Dimerisation asymétrique
Partie N-t du donneur activé va interagir avec partie C-t du récepteur
C’est favorisé par la rotation des domaines transmembranaires
Auto-trans-phosphorylation
Quel est le motif qui compose la partie transmembranaire du RTK et permet la rotation des domaines transmembranaires ?
GxxxG du cote N-t
La majorité des phospholyration dans les RTK est de quel type ?
Transphosphorylation
C’est quoi le rôle de Scr ?
C’est une tyrosine Kinase soluble (pas un recepteur) qui sert aussi a phosphoryler les residus de Tyr
Est ce que selon ou le RTK est phosphoryle ça va impacté le recrutement d’effecteurs ?
Ouii chaque site de phospho peut dicter l’activation du recrutement d’un effecteur différent
Quelles sont les particularités de la famille EGFR/ErbB niveau recepteur
4 récepteurs 11 ligands
Erb2 n’a aucun ligand specifique mais fonctionne en heterodimere
Erb3 n’a pas d’activité kinase donc pas de phospho a part s’il est heterodimerise
Erb3-Erb3 par contre ne fonctionne pas
dans quoi est essentiel le EGF ?
Dvlp embryonnaire
Quel est le recepteur EGFR avec l’activité la plus forte ?
Erb2 il est mm souvent oncogène
Comment peut on inhiber Erb2 ? Contre quel maladie ?
Herceptin AC monoclonal
Cancer du sein HER2+
Medoc qui bloque le erb1 ?
Iressa qui bloque le site de liaison de l’ATP au domaine tyrosine kinase
Diff entre GPCR et RTK ?
RTK 1 passage transmembranaire vs 7
Activités enzymatique vs aucune
Dimerisation obligatoire vs possible
Les 3 etapes qui suivent la phospho des RTK ?
1 Recrutement de prot adaptatrice via des domaines
2 Assemblage de complexes de signalisation
3 Activation des effecteurs
Grâce à quoi les protéines adaptatrices interagissent elles avec les récepteurs activés ?
des domaines d’interaction pour phospho tyrosine genre
SH2
SH3
PTB
Deux domaines qui se lient specifiquement au Tyr phosphoryles ?
SH2 et PTB
A quel type de prot se lient SH3 et WW ?
Séquences riche en Proline
Le domaine PH ? PDZ ? FYVE ? A quoi se lient ils ?
Ph: phospho inositides (mb)
PDZ: c-t hydrophobe
FYVE: PI3P
C’est quoi le residu du domaine SH2 qui lie la phospho tyrosine ?
Arginine qui est 100% CONSERVÉE
Est ce que y’a bcp de prot avec domaine SH2 ?
Oui
Exemple de prot adaptatrice avec domaine PTB ? Quel motif specifique lie le domaine PTB ?
IRS1 et IRS2
Asn-Pro-X-pTyr
Les recepteurs a insuline IGFR font partie de quelle classe de RTKs ? Quel est le rôle des IRS ?
Classe 2
Agissent comme des intermédiaires dans le recrutement d’effecteurs so basically son rôle de prot adaptatrice
Que lie particulierement le domaine PH ?
Phosphoinositol PIP2 et PIP3
(Phospholipide permet la relocalisation aux membranes)
Particularité du domaine PDZ ?
Interecation prot prot
Feuillet beta extensible
Associe les protéines au cytosquelette actine et tout (essentiel)
Imagine la topologie d’une prot adaptatrice qui peut lier le récepteurs EGF s’ancrer aux lipides membranaires de types PI et phosphoryler son effecteur
N-t : domaine SH2/PTB qui se lie a EGFR activé
domaine centrale : domaine PH qui se lie aux PI membranaires
C-t : domaine Kinase qui phosphoryle les prot effectrices
C’est quoi les 4 voies de signalisation activees par EGFR ?
MAPK/ERK
PI3K/AKT
PLCgamma
JAK/STAT
5 etapes pour resumer activation voie MAPK/Erk
- Activation EGFR par EGF et dimerisation puis phospho du recepteur sur tyr
- Recrutement Grb2 qui s’accroche a pTyr via son domaine SH2 et lie SOS via son domaine SH3. SOS (une GEF) active RAS
- RAS se lie a RAF apres avoir GDP-GTP
- Cascade de phospho RAF MEK ERK
- Translocation au noyau
Fonction de Grb2 ?
Proteine adaptatrice qui une fois phospho par RTKs active SOS
Si pas de Grb2 = mort
C’est quoi l’activité de RAS ? Cmb de genes chez l’humain ? Oncogene ? Potentiel mitogenique resulte de mutation somatique ou associées aux gamètes ?
GTPase
3
Oui proto-oncogene
Mutation somatique
Detaille la structure et le role de PI3K ?
Phosphoinositide 3 kinase
Sous unité regulatrice qui contient domaine SH2 et 3 = p85
Sous unité catalytique = p110 qui convertie PIP2 en PIP3
5 étapes clés de la voie PI3K-AKT
- Activation RTK comme on connait deja
- Recrutement PI3K avec domaine SH2 et activation par phospho
- PI3K phosphoryle PIP2 en PIP3 a la mb mais PIP3 va RECRUTER AKT et PDK1
- Activation de AKT via phospho par PDK1 qui va phospho Thr308 et mtorc2 qui va phospho Ser473
- Apres AKT phosphoryle tout ce qu’il peut enft
Est ce que Akt ou Proteine kinase B peut fonctionner si y’a juste Thr qui est phospho ?
Oui mais faibleeee besoin des deux pour activite maxxx
Rôle de PTEN ?
Phosphatase qui dephosphoryle PIP3 et stop la signalisation
Supresseur de tumeur
(De moins en moins present)
Mutation qui fait que la voie Akt peut etre tres oncogenique
mutation p110a sous unite catalytique de PI3K
Étapes de la voie de PLCgamma
- Activation du RTKs comme d’hab
- Recrutement PLCy via domaine SH2 (2) et va vers mb domaine PH
- Phosphorylation de PLCy qui l’active
- Liaison sur la mb via PH a PIP2
- Hydrolyse de PIP2 en IP3 + DAG
- IP3 avec IPR3 = relache intracell du Ca2+
- A l’aide du Ca2+ DAG va activer PKC
PLCy serait implique dans l’entree cellulaire de Ca++ via canaux ioniques ROC ?
Ouuuuii
4 façons d’inhiber PLCy ?
Tyr phosphatase : PTB-1B, Shp2
PKA/PKC par la phospho d’une ser
Ligase CbI pour ubiquitination et degradation
Recrutement de Grb2 qui bousille liaison avec PIP2
Quelques mots sur la variance genetique de la PLCy ?
Pas mal de mutation activatrice qui vont transformer la forme auto inhibée vers la forme active constitutive
Souvent dans les leucémies = réponse immunitaire déréglée
Avec une transcription dépendante de NFAT et NF-kb
Est ce que les domaines JH1 et JH2 de JAK ont une activité Kinase ?
Non juste JH1
JH2 a mm une fonction inhibitrice sur JH1
A la base est ce que la voie JAK/STAT est à activité enzymatique intrinsèque ?
Noonn mais parfois peut être activée par EGFR
Resume la voie JAK/STAT basique
- Liason de la cytokine a recepteur
- Dimerisation du recepteur et activation de JAK
- Phospho des recepteurs par JAk
- Recrutement et phospho des prot STAT
- Dissociation des STAT qui forment des dimeres et vont dans le noyau
- Activation de la transcription des genes dans le noyauuu
Le rapport entre EGFR et JAK/STAT ?
EGFR peut phospho STAT et augmenter la dimerisation des recepteurs JAK/STAT et la signalisation
Peut on bloquer la voie JAK/STAT ? (4)
Oui bcp d’inhibiteurs a diff niveau
Inhibe phospho avec AC
Bloque liaison ATP
Bloque SH2
Inhibe STAT
Quelques infos sur les récepteur tyrosine PHOSPHATASE (5)
Y’a les transmenbranaires et non membranaires
Y’a un domaine phosphatase PTP proximal
Un domaine distal essentiel
Bah son travail c’est de de dephosphoryler han
Inactivation par oxidation du site enzymatique
Ex d’une tyrosine phosphatase on en a deja parlé
PTEN
Supresseur de tumeur
Neuroprotection
Dans quel classe de recepteur sont ceux du TGFbeta ?
Recepteurs intrinseque serine/threonine kinase
Comment fonctionne la signalisation dans le TGFBR ?
Le TGFB se lie au TGFBR2 qui va se lier au TGFBR1 et le phosphoryler
Une fois actif il va recruter et phosphoryler les R-SMAD
Est ce que le smad est tout seul ?
Nonn il fait toujours heterodimerisation avec un coSMAD
Quel est le seul co smad ?
Smad4
Est ce que y’a des smad inhibiteurs ? Si oui lesquels ?
Oui I-Smad
Smad 6 et 7
Une fois au noyau les R smad agissent comme des quoi ?
Facteurs de transcription
Y’a t il des stratégies pour inhiber la voie TFGB notamment 1 2 et 3 qui sont pathogenes parfois ?
Ouii ex:
Bloquer activité kinases du recepteur
Ou utiliser des AC mono pour sequestrer le TGFB ou bloquer la liaison au ligand
Dans quoi son impliqué les recepteurs de la famille NPR (ici guanylyl cyclase) ?
Natriurèse Na+ dans l’urine
Et vasodilatation
Particularité du recepteur NPR-C
Il est inactif pas de portion intracellulaire peut juste sequestrer un ligand
Comment ça se passe au niveau de la phosphorylation pour les recepteurs NPR
Ils sont phosphorylés en permanence et la liason du ligand = DEPHOSPHO
C’est quoi le but de la voie de la guanylyl cyclase ?
Guanylate cyclase qui fait GTP->cGMP
Pour activer PKG
Rôle des récepteurs-canaux ici canaux ioniques ?
Convertissent des signaux chimique pre synaptique en signal post synaptique électrique
Quels sont les 3 types de recepteurs canaux selon leur structure
Récepteur boucle cys
Recepteur ionotropique
Canaux actives par l’ATP
Un ex de recepteur a cys boucle cationique ?
nAChr qui lie l’acetycholine et la nicotine
Ainsi que d’autre drogues qui peuvent tuer ou servir dans l’anesthésie comme les curares qui ont été remplacé pout fenêtre thérapeutique mince
Effet de la nicotine sur nAchR ?
Agoniste qui libere de la dopamine
Desensibilisation de la dopamine
Un ex de recepteur canal a boucle cys anionique ?
GABAr qui est inhibiteur de l’excitation neuronale
Il favorise l’entree des ions Cl- qui hyperpolarise la mb
Role des benzodiazepines ?
Modulateur allosterique positif des GABAr car augmente leur affinité
= hyperpolarisation avec ouverture = sedation et la dépression du SNC
A quoi servent l’isoflurane propofol lorazepan ect…
Anesthésie sedation aide medical a mourir et anti dépresseur
Le propofol agit sur quel neurorecepteur ?
GABAr avec modulation positive
Exemple de recepteur canal ionotropique ?
Celui du glutamate avec un domaine modulateur et un domaine de liaison
Quels sont les deux conditions d’activation du recepteur de glutamate ?
Liaison du glutamate = ouverture canal
Dépolarisation = enleve l’ion magnésium qui bloque le canal
So attention carence magnesium
Agoniste dangereux du recepteur de glutamate ?
PCP
Ex de canal activité par ATP ?
P2X qui est activé par regulation
Est ce que la notion de degradation et de recyclage s’aplique aussi pour ces recepteurs ?
Ouiii peut varier selon cellule normale ou tumorale avec surexpression du recepteur
Quel est le mode principal d’internalisation et de recyclage des GABAr ?
Vesicule de clathrine
