Cours 1 - Transport Noyau Flashcards
Une méthode pour separer les différents organelles
Centrifugations différentielles ou les éléments massifs vont sédimenter en premier genre noyau et cytosquelette
C’est quoi qui permet d’identifier chaque organites ?
Des marqueurs moléculaires
Ou sont principalement synthétisées les protéines ?
Cytosol
Technique de microscopie pour voir la localisation intracellulaire d’une protéine? Donne l’exemple de p-65
Microscopie à fluorescence
P-65 fusionnée a GFP peut être suivie dans la cellule par fluorescence
Avec un traitement au TNF elle passe du cytosol au Noyau
C’est quoi la différence entre l’immunofluorescence direct et indirecte ?
Détection des protéines par anticorps
Direct : 1 anticorps
Indirect : 2 anticorps
Avantage de la microscopie électronique ?
Meilleure résolution, plus précis
Fonction avec des e- donc on voit tout d’un coup pas seulement la prot d’interet
Quel est l’élément biologique principal dans la cellule?
Les membranes intracellulaires
Est ce que la quantité et la variété des organelles varient selon le type de cellules ?
Oui
Dans un hepatocyte quel est le volume a peu près occupé par les organelles ?
Environ 50% du volume
Combien de molécules protéiques ? Et combien de type de prot différents ?
10 Milliards
10 mille
Les 3 mécanismes majeurs d’import des protéines dans les organelles ?
Pore nucléaire
A travers les membranes
Par des vesicules
3 points sur le mécanisme 1 (pore nucléaire) et le mécanisme 2 (par les membranes)
Mécanisme 1 :
Protéine repliée
Passage bi directionnel
Conformation dilaté des pores permet le passage de plis gross prot
Mécanisme 2 :
Nécessite des translocateurs
Les prots doivent être depliées
Unidirectionnel
De quoi depend la translocation des protéines ? 3
Structure (expose les séquences signales)
Modif post trad (modifie les signaux)
Interaction prot prot (cache les sequences signales)
Comment la cellule sait si une prot doit etre transportée ailleurs ? Quel est le ciblage par defaut ?
Grace a des signaux encodés dans leur structure
Necessaire pour cible la mb plasmique, organelles et secretion
Ciblage par defaut = pas de signal = reste dans le cytosol
Est ce que la fonction et la localisation des prot intracellulaire ont un rapport ? Que peut on faire si on connait pas la fonction d’une prot ?
Ouiii souvent la localisation influence bcp la fonction
On regarde sa sequence on trouve des séquences signales qui pourraient indiquer sa loc cellulaire et ça nous donne deja une bonne idée de quelle pourrait etre sa fonction
Est ce que l’exposition d’une prot est modulable ?
Oui en fonction des stimulis qu’elle reçoit (infection agoniste …)