CM10 - Génétique et néoplasies Flashcards
2 grandes méthodes de dx des néopalsies?
- Cytogénécité : identifier sur les chromosomes les gènes mutés
ex : caryotype, FISH - Biologie moléculaire : identifier les gènes mutés via une étude GÉNÉTIQUE, et non chromosomique
ex : PCR, RT-PCR et Q-PCR
Au caryotype, on arrête la progression des chormosomes pour les isoler à quelle phase?
Métaphase
Avantages et désavantages du caryotype
A :
- identification d’anomalies de nombre (aneuploïdie) et de structure (translocations, larges délétions)
D :
– Peu sensible (examine 20 cellules)
– Basse résolution
2 utilités du caryotype?
- Preuve de CLONALITÉ
- DIAGNOSTIC pour des maladies avec anomalies caractéristiques ex T(9,22) pour LMC : le caryotype avec 9,22 est un dx de LMC
Pour quelle maladie le caryotype est un facteur pronostic majeur?
La LMA
certaines mutations qui ont un pronostic favorable, vs certaines mutations qui ont pronostic défavorable
4 avantages du FISH?
- Rapide : en 24H
- Pas besoin des cellules en métaphase : on les prend en interphase (ok meme si une cellule se réplique lentement, pas besoin d’attendre sa métaphase pour faire le FISH)
- Très sensible (500 cellules vs 20 pour le caryotype)
- Détecte les translocations et les aneuploïdies (ex délétions ou amplifications)
Vrai ou Faux?
Le FISH ne détecte qu’une seule anomalie, soit celle recherchée. De plus, cette méthode détecte des mutations de grande tailles (amplification, délétion, translocation).
Vrai
Avantages du PCR quantitative en temps réel?
Test quantitatif : détecte le nb de mutations via la fluorescence visible durant la réplication
- Test quantitatif
- Test très sensible!
- Permet de mesurer la maladie résiduelle minime (MRM) selon la qté de mutations présentes
En quoi consiste le RT-PCR/ différence?
- Point de départ = ARN messager, qui sera converti en ADN par RT
- ARN un peu plus « labile » mais utile quand les « break points » potentiels dans la séquence d’ADN couvrent de grandes distances et sont nombreux.
_____% des LMA ont un caryotype ______
Dans ces cas, on fait quoi à la place?
50% ont un caryotype normal
Si caryotype N, on fait biologie moléculaire à la place qui peuvent identifier mutations qui pemrettent un dx
___% de toutes les LMA ont une mutation ______
Cette mutation est de bon ou mauvais pronostic pour LMA?
Le fardeau allélique pour cette mutation indique quoi?
30% des LMA = FLT3 muté
Mauvais pronostic de LMA
Fardeau allélique variable = + on a de mutations, + le pronostic est PAS BON
Mutation FLT3 est associé avec LMA avec quelles caractéristiques? RÉpond comment à la chimio?
LMA +++++++ proliférative
HYPERLEUCOCYTAIRE (car LMA c’est logique)
Répond BIEN À LA CHIMIO, mais rechute presque assurée / récidive
FLT3 est quoi dans la cellule (la mutation du gène entraîne quoi)? QUels sont ses rôles?
FLT3 = récepteur à activité tyrosine kinase (récepteur du fct de croissance FLT3-L)
Rôles : survie, prolifération et différenciation des cellules hématopoïétiques
2 types de mutation pour le FLT3 et entraînent quoi au niveau du récepteur tyrosine kinase FLT3?
- 20-25% : MUTATION DUPLICATION INTERNE (ITD) dans exon 14 ->activité constitutive du récepteur FLT3 (hausse survie, différenciation et prolifération des cellules lignée myéloïde)
- MUTATION PONCTUELLE d835 (TKD) dans exon 20 : 5-10%
Traitements de 1ère ligne et entretien pour la LMA à mutation FLT3?
Nouveau traitement depuis jan 2020?
- MIDOSTAURIN (chimio)
- SORAFENIB : entretien post greffe allogénique (LMA)
NOUVEAU : GILTERINIB : traitement de rechute en remplacement d’une chimiothréapie d’induction (pas tous les effets indésirables d’une chimio, c’est une pilule à la maison!)
Marqueurs caractéristiques aux labos de LMA promyélocytaire?
- CIVD : baisse des plaquettes + baisse du fibrionogène —-> entraîne TT/PT et TCA allongés : marqueur important
- +++++ de granulocytes (indique myélocytaire)
- Bâtonnets d’Auer (indique myélocytaire)
Acronyme utilisé pour leucémie promyélocytaire?
Représente quel pourcentage des LMA?
FAB M3
Promyélocytaire : 3-10% des LMA
LMA promyélocytaire associé à quelle mutation?
Traité avec quoi?
RARa-PML T(15,17)
Traité avec ATRA
Quelle est l’Action des gènes RARa (chr 17) et PML (chr 15) séparés , et pourquoi entraîne LMA quand mis ensemble?
RARa : PERMET DIFFÉRENCIATION DES CELLULES AVEC CONTACT AVEC agonistes (ACIDE RÉTINOÏQUE/vitamine D)
Assemblé avec
PML : facteur de régulation nucléaire
ENTRAÏNE RARa-PML: gène qui favorise prolifération (avantage de croissance) et bloque différenciation des myéloblastes au stade PROMYÉLOCYTE
entraîne un BLOC DE LA MATURATION ET HAUSSE DE LA CROISSANCE DES PROMYÉLOCYTES
2 méthodes utiles pour observer T(15,17) RARa-PML et pourquoi celles-ci en particulier (en relation avec caractéristique de cette LMA)?
POURQUOI ON UTILISE PAS UNE CERTAINE TECHNIQUE?
- FISH (1er choix)
- très RAPIDE (LMA promyélocytaire = urgence médicale, besoin dx rapide) - Q-PCR (PCR quantitatif en second temps)
- détecte T(15,17) et utile dans détection de la maladie résiduelle minime (MRM)
PAS CARYOTYPE : MOINS PRÉCIS ET TROP URGENCE : ON A PAS LE TEMPS D’ATTENDRE
Utilisation ATRA seul pour LMA promyélocytaire : fonctionne bien?
Peut-on l’utiliser seul uniquement?
- Permet différenciation COMPLÈTE et RÉMISSION COMPLÈTE SANS CHIMIO!!
- —->avec le contrôle de la CIVD en plus!
- —->mais RÉMISSION COMPLÈTE MAIS COURTE ; rechute rapidement - ATRA + chimio ou ATRA + arsenic = guérison complète 85%!!!!! (chimio ou arsenic évite les rechutes)
Quelle est la meilleure leucémie à avoir?
LMA promyélocytaire
-bon taux de guérison
Le turn-over cellulaire, montré par Ki-67, des lymphomes de BURKITT est de combien?
100% : très agressif, très gros turn-over cellulaire
Si pas à 100%, se demander si c’est vrm un Burkitt
Comment sont les cellules dans le lymphome de Burkitt?
- Expriment Ig de surface
- Cellules vacuolisées souvent
- Cellules de taille intermédiaire
*Moelle ressemble à ciel étoilé
quelles sont les 3 translocations possibles du lymphome de Burkitt?
- t(8;14)
- t(8;22)
- t(2;8)
8 est tjrs là pcq MYC tjrs présent
% des Burkitt qui sont quelle mutation, et pourquoi entraîne cancer?
80% T(8,14) MYC
MYC = fct de transcription oncogène, superposé sur gène de chaîne lourde
20% T(2,8) ou (8,22), MYC sur les gènes de chaînes légères
technique idéale pour identifier MYC (8,14) et autre technique possible?
Pourquoi on utilise pas une certaine technique?
- FISH : grosse translocation bien visible*
- Caryotype standard : plus long, alors moins idéal, mais montre la translocation
ON UTILISE PAS PCR ; breakpoint est trop large pour la mutation de mYC
* 1 seule sonde peut détecter les 3 translocations
Quel est un sx dermato pour les PV?
PRURIT ou ROUGEUR CUTANÉE : par le ++++++ de GR
Nomme les critères de PV.
3 majeurs ou 1et2 majeur + 1 mineur
Majeurs
1. Hémoglobine/Hématocrite augmenté ou Augmentation de la masse érythrocytaire (> 25% au-delà de la valeur normale attendue)
2. BOM montrant une hypercellularité avec prolifération excessive des 3 lignées (panmyélose), incluant une prolifération de mégacaryocytes polymorphes et matures (avec des tailles cellulaires différentes)
3. Présence d’une mutation JAK2V617F ou JAK2 exon 12
Critère mineur : EPO sérique subnormale
En cas de PV, quels sont les 2 test qui doivent absolument être effectués?
Dosage EPO
Recherche JAK2
Dans mutation JAK2 V617F, la mutation est où exactement?
Dans domaine pseudokinase qui contrôle négativement action de JAK2 –>mutation = arrêt inhibition JAK2 et activité constitutive
Vrai ou Faux?
95% des PV s’expliquent par la mutation JAK2-V617F, alors qu’elle explique environ 50% des thrombocytose essentielle et myélofibrose primimve
Vrai
Quel est le meilleur test lab pour dx polycythémie vera via identification de JAK2 V617F?
Ce test permet aussi quoi en lien au suivi?
Biologie moléculaire : PCR
Permet aussi mesurer fardeau allélique : permet de mesurer évolution PV vers possiblement myélofibrose ou LMC, et d’évaluer réponse au traitement
En cas de polycythémie avec BCP EPO et pas de JAK2 muté, on soupçonne quoi?
Polycythémie secondaire à la hausse d’EPO
- Appropriée : tabac, altitude, MPOC, apnée du sommeil, Hb à haute affinité O2, etc
- Non-appropriée : tumeur rénale, androgènes, etc
Quels sont les critères qui peuvent définir LMC phase accélérée/blastique? il faut avoir au moins 1 des critères!
-≥20% blastes myéloides dans le sang ou moelle
-Présence de prolifération de blastes extramédullaire
-Présence d’une ↑ de lymphoblastes dans le sang ou la moelle
Méthodes pour identifier T(9,22)?
LMC
- Caryotype standard
- FISH
- RT-PCR pour mutation BCR-ABL
Pour LMC, on fait quel test aux 3 mois pour évaluer évolution?
Et quel test pour évaluer réponse au traitement
- Évolution* : RT-PCR aux 3 mois
- but: réduction de 3 log / 1000x moins - Réponse : FSC aux 2 semaines initialement
*Il peut y avoir résistance primaire et secondaire au traitement
Qu’est-ce que le syndrome de différenciation?
Quand on a LMA promyélocytaire RARa-PML traité avec ATRA, il y a +++++ différenciation et maturation des myélocytes en même temps = hausse des leucocytes intense = ++++ de cytokines produites par les granulocytes et sx inflammatoires
Traité avec corticostéroïdes
Nomme 1 inhibiteur de la tyrosine kinase
1 parmi:
– Imatinib
– Dasatinib et Nilotinib
– Bosutinib
– Ponatinib
Nomme 2 types de guérison pour la LMC
- La guérison sans greffe.
- L’arrêt de traitement (« treatment-free remission »)
