CM10 - Génétique et néoplasies Flashcards
2 grandes méthodes de dx des néopalsies?
- Cytogénécité : identifier sur les chromosomes les gènes mutés
ex : caryotype, FISH - Biologie moléculaire : identifier les gènes mutés via une étude GÉNÉTIQUE, et non chromosomique
ex : PCR, RT-PCR et Q-PCR
Au caryotype, on arrête la progression des chormosomes pour les isoler à quelle phase?
Métaphase
Avantages et désavantages du caryotype
A :
- identification d’anomalies de nombre (aneuploïdie) et de structure (translocations, larges délétions)
D :
– Peu sensible (examine 20 cellules)
– Basse résolution
2 utilités du caryotype?
- Preuve de CLONALITÉ
- DIAGNOSTIC pour des maladies avec anomalies caractéristiques ex T(9,22) pour LMC : le caryotype avec 9,22 est un dx de LMC
Pour quelle maladie le caryotype est un facteur pronostic majeur?
La LMA
certaines mutations qui ont un pronostic favorable, vs certaines mutations qui ont pronostic défavorable
4 avantages du FISH?
- Rapide : en 24H
- Pas besoin des cellules en métaphase : on les prend en interphase (ok meme si une cellule se réplique lentement, pas besoin d’attendre sa métaphase pour faire le FISH)
- Très sensible (500 cellules vs 20 pour le caryotype)
- Détecte les translocations et les aneuploïdies (ex délétions ou amplifications)
Vrai ou Faux?
Le FISH ne détecte qu’une seule anomalie, soit celle recherchée. De plus, cette méthode détecte des mutations de grande tailles (amplification, délétion, translocation).
Vrai
Avantages du PCR quantitative en temps réel?
Test quantitatif : détecte le nb de mutations via la fluorescence visible durant la réplication
- Test quantitatif
- Test très sensible!
- Permet de mesurer la maladie résiduelle minime (MRM) selon la qté de mutations présentes
En quoi consiste le RT-PCR/ différence?
- Point de départ = ARN messager, qui sera converti en ADN par RT
- ARN un peu plus « labile » mais utile quand les « break points » potentiels dans la séquence d’ADN couvrent de grandes distances et sont nombreux.
_____% des LMA ont un caryotype ______
Dans ces cas, on fait quoi à la place?
50% ont un caryotype normal
Si caryotype N, on fait biologie moléculaire à la place qui peuvent identifier mutations qui pemrettent un dx
___% de toutes les LMA ont une mutation ______
Cette mutation est de bon ou mauvais pronostic pour LMA?
Le fardeau allélique pour cette mutation indique quoi?
30% des LMA = FLT3 muté
Mauvais pronostic de LMA
Fardeau allélique variable = + on a de mutations, + le pronostic est PAS BON
Mutation FLT3 est associé avec LMA avec quelles caractéristiques? RÉpond comment à la chimio?
LMA +++++++ proliférative
HYPERLEUCOCYTAIRE (car LMA c’est logique)
Répond BIEN À LA CHIMIO, mais rechute presque assurée / récidive
FLT3 est quoi dans la cellule (la mutation du gène entraîne quoi)? QUels sont ses rôles?
FLT3 = récepteur à activité tyrosine kinase (récepteur du fct de croissance FLT3-L)
Rôles : survie, prolifération et différenciation des cellules hématopoïétiques
2 types de mutation pour le FLT3 et entraînent quoi au niveau du récepteur tyrosine kinase FLT3?
- 20-25% : MUTATION DUPLICATION INTERNE (ITD) dans exon 14 ->activité constitutive du récepteur FLT3 (hausse survie, différenciation et prolifération des cellules lignée myéloïde)
- MUTATION PONCTUELLE d835 (TKD) dans exon 20 : 5-10%
Traitements de 1ère ligne et entretien pour la LMA à mutation FLT3?
Nouveau traitement depuis jan 2020?
- MIDOSTAURIN (chimio)
- SORAFENIB : entretien post greffe allogénique (LMA)
NOUVEAU : GILTERINIB : traitement de rechute en remplacement d’une chimiothréapie d’induction (pas tous les effets indésirables d’une chimio, c’est une pilule à la maison!)
Marqueurs caractéristiques aux labos de LMA promyélocytaire?
- CIVD : baisse des plaquettes + baisse du fibrionogène —-> entraîne TT/PT et TCA allongés : marqueur important
- +++++ de granulocytes (indique myélocytaire)
- Bâtonnets d’Auer (indique myélocytaire)
Acronyme utilisé pour leucémie promyélocytaire?
Représente quel pourcentage des LMA?
FAB M3
Promyélocytaire : 3-10% des LMA
LMA promyélocytaire associé à quelle mutation?
Traité avec quoi?
RARa-PML T(15,17)
Traité avec ATRA
Quelle est l’Action des gènes RARa (chr 17) et PML (chr 15) séparés , et pourquoi entraîne LMA quand mis ensemble?
RARa : PERMET DIFFÉRENCIATION DES CELLULES AVEC CONTACT AVEC agonistes (ACIDE RÉTINOÏQUE/vitamine D)
Assemblé avec
PML : facteur de régulation nucléaire
ENTRAÏNE RARa-PML: gène qui favorise prolifération (avantage de croissance) et bloque différenciation des myéloblastes au stade PROMYÉLOCYTE
entraîne un BLOC DE LA MATURATION ET HAUSSE DE LA CROISSANCE DES PROMYÉLOCYTES
2 méthodes utiles pour observer T(15,17) RARa-PML et pourquoi celles-ci en particulier (en relation avec caractéristique de cette LMA)?
POURQUOI ON UTILISE PAS UNE CERTAINE TECHNIQUE?
- FISH (1er choix)
- très RAPIDE (LMA promyélocytaire = urgence médicale, besoin dx rapide) - Q-PCR (PCR quantitatif en second temps)
- détecte T(15,17) et utile dans détection de la maladie résiduelle minime (MRM)
PAS CARYOTYPE : MOINS PRÉCIS ET TROP URGENCE : ON A PAS LE TEMPS D’ATTENDRE
Utilisation ATRA seul pour LMA promyélocytaire : fonctionne bien?
Peut-on l’utiliser seul uniquement?
- Permet différenciation COMPLÈTE et RÉMISSION COMPLÈTE SANS CHIMIO!!
- —->avec le contrôle de la CIVD en plus!
- —->mais RÉMISSION COMPLÈTE MAIS COURTE ; rechute rapidement - ATRA + chimio ou ATRA + arsenic = guérison complète 85%!!!!! (chimio ou arsenic évite les rechutes)
Quelle est la meilleure leucémie à avoir?
LMA promyélocytaire
-bon taux de guérison
Le turn-over cellulaire, montré par Ki-67, des lymphomes de BURKITT est de combien?
100% : très agressif, très gros turn-over cellulaire
Si pas à 100%, se demander si c’est vrm un Burkitt
Comment sont les cellules dans le lymphome de Burkitt?
- Expriment Ig de surface
- Cellules vacuolisées souvent
- Cellules de taille intermédiaire
*Moelle ressemble à ciel étoilé
