Chimie ana : Emission moléculaire Flashcards
Quand peut avoir lieux l’émission moléculaire ?
S’il y a eu absorption avant
Quels sont les différents moyens de passage de l’état excitée à fondamental ?
- Relaxation vibrationnelle non rayonnante
- Relaxation rayonnante
Principe de la relaxation vibrationnelle non rayonnante ?
Redescente sur le niveau fondamental sans émettre de rayonnement
→ Perte d’énergie par collision
Principe de la relaxation rayonnante ?
→ Phénomène d’émission
Avec un léger dégagement de chaleur
Quand peut on observer la relaxation rayonnante ?
Que si elle à une durée inférieure à la relaxation non rayonnante
Quel est le phénomène que l’on peu observé (entre 2 ≠) ?
On observe toujours le rayonnement le plus court
Qu’est-ce que la photométrie d’émission ?
Mesure de l’émission d’un rayonnement électromagnétique :
- UV
- Visible
Due à la désexcitation d’atomes excités par de l’NRJ apporté par :
- Transfert à une T° très élevée
- Faisceau lumineux
- Rayonnement électromagnétique
Relation entre l’énergie et la longueur d’onde ?
Si l’NRJ est + forte alors la longueur d’onde est + faible
Que sont les raies de résonnance ?
Apparaissent qd passage entre 2 niveau électronique → longueur d’onde d’excitation
Différence entre la fluorescence et la phosphorescence ?
- Fluo → Passage d’un état singulet à un autre singulet
- Phospho →Passage d’un état triplet à un état singulet
Spectre caractéristique d’émission moléculaire ?
Spectre de bandes
Relation entre l’énergie absorbée et émise ?
NRJ absorbée > NRJ émise
Relation entre λ d’absorption et d’émission ?
λ excitation < λ émission
Qu’est-ce que le déplacement de Stock ?
Différence entre λ exi° et λ émis°
Qu’est-ce que la bande de Rayleigh ?
Diffusion de la lumière à une longueur d’onde d’excitation
A quoi sont dues les bande de Rayleigh et Raman ?
A la diffusion du solvant
Comment reconnaitre les bandes de Rayleigh et Raman ?
- Possèdes des harmonique à 2λ
- Pas de variation d’intensité avec la variation de []° de l’analyte
Qu’est-ce que le rendement quantique ?
→ ϕ
* Nb de mol fluorescente / nb totales de mol excitées
→ Marqueur de fluorescence
ϕ = 1 …
Molécules très fluorescentes
ϕ = 0…
Molécules non fluorescentes
Quelles sont les conditions de fluorescence des molécules ?
- Elle doit absorber
- Structure permettant un tps de relaxation rayonnant < non rayonnant
- Emission d’un état singulet à singulet
Quels sont les facteurs favorisant la fluorescence ?
- Aromaticité
- Nb de cycle / D° de condensation
- Rigidité
- Groupements électrodonneurs
- Viscosité
Groupement électrodonneur favorisant la fluorescence (du + au -)
- NR > - NH > - OR > - OH
Comment la viscosité favorise-t-elle la fluorescence ?
Gène :
* Mobilité
* Nb de collisions
→ Limite la perte d’NRJ
Quels sont les facteurs défavorables à la fluorescence ?
- T°
- Groupements électroattracteurs
- Quencheurs
Comment la T° est elle défavorable à la fluorescence ?
Elle ↑ la mobilité des espèces en solution → favorise la perte d’NRJ par collision
Quels sont les groupements électro attracteurs qui diminuent la fluorescence ?
- -COOH
- -COOR
- -CHO
- -COR
- -NOO
- -NO
Que sont le Quencheurs ?
Molécules entrainant la diminution/disparition de la fluorescence des molécules auxquelles elle sont additionnées
Quelles sont les effets de la []° sur la fluorescence ?
Si A < 0,05 ou T > 90%
Intensité du rayonnement fluorescent = proportionnel à la c° :
F = K * c°
Que se passe-t-il si A > 0,05 ou T < 90% ?
Plus de relation linéaire : auto-désactivation ou self-quenching
Quelles sont les méthodes les plus sensible entre les méthodes fluorimétriques et d’absorption ?
Fluorimétrique → proportionnel à P0 (alors que A → proportionnel à log(P0/P) )
Quel est l’effet du solvant sur la fluorescence ?
+ le solvant est polaire + λ d’émission sera grande MAIS - intense
Effet du λ d’excitation sur la fluorescence ?
- Influe directement sur intensité de fluorescence
- 0 action sur l’allure de la courbe
Quand est ce que le pH influe sur la fluorescence ?
Que s’il y a une molécule à caractère acido-basique
Effet du pH sur le spectre d’émission fluorescent ?
Modifie l’allure de spectre
Principale différence entre l’appareillage de l’absorption moléculaire et l’émission ?
La détection se fait à 90° du faisceau incident → limite effet Raman et Rayleigh
Caractéristiques des cuves d’émission moléculaire ?
- Quartz (jamais plastique)
- 4 parois transparentes au UV
- Existe en 96 puits
Quelles sont les application de la spectroscopie fluorescente ?
Etudes :
* Quantitative
* Thermodynamique
* Cinétique
* Acidité
Quelles sont les voies d’application de la spectroscopie fluorescente ?
- Méthode directe : agent chélatant + analyte = fluorescence
- Méthode indirecte : étude du quenching de la molécule → Anion
Comment sont faites les application au niveau des espèces inorganique ?
Complexation avec des molécules fluorescente
Quelles sont les application de la spectrométrie fluorescente pour les molécules organique ?
- Application quantitative
- Prélèvement médicaux
- Marquage cellulaire
Quelle est la condition d’utilisation d’un filtre en marquage cellulaire ?
Déplacement de Stock > 20 nm
