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UE 2 Biocellulaire > Chapitre 3 : Microscopie > Flashcards

Chapitre 3 : Microscopie Flashcards

1
Q

Quelle est la taille de la plus petite particule détectable à l’œil nu ?

A

100 μm/ 0,1 nm

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Q

Quel est l’avantage important du microscope optique ?

A

La lumière est relativement peu destructrice

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3
Q

Quel est l’inconvénient du microscope optique ?

A

La faible résolution (ordre de 200 nm)

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4
Q

Quels sont les + petits éléments détectables au microscope optique ?

A

Les bactéries et les mitochondries

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5
Q

Quelles sont les 2 lentilles de verre dans le microscope à transmission ?

A

L’objectif et l’oculaire

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6
Q

Quel est l’avantage du microscope à fluorescence ?

A

La détection reste possible même pour une faible quantité de molécules fluorescentes
= Grande sensibilité

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7
Q

Quels sont les exemples de la microscopie à fluorescence ?

A

DAPI : ADN, fluorescence bleue
LysoTracker : lysosomes, fluorescence rouge
MitoTracker : mitochondries, fluorescence verte

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8
Q

Quel est l’avantage d’un microscope électronique ?

A

Sa résolution (2nm) = 100x supérieure à celle MO

= repérer l’ultrastructure

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9
Q

Quel est l’inconvénient du microscope électronique ?

A

La préparation est complexe et fastidieuse

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10
Q

Quelle est la taille possible d’un MET ?

A

2m de hauteur

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11
Q

Quels sont les 2 jeux de lentilles électromagnétiques dans le MET ?

A

L’objectif et le projecteur

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12
Q

Quelle est la couleur des images en MET et pourquoi ?

A

Les images sont forcément en noir et blanc :
Soit les électrons peuvent traverser l’objets : on obtiendra une zone claire
Soit la structure de l’objet entraîne une déviation des électrons : on obtiendra une zone sombre

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13
Q

Quelle est la différence du MEB ?

A

Le faisceau d’électrons est condensé en un foyer très précis qui peut être déplacé grâce à un générateur à balayage, ces électrons arrachent des électrons à l’objet qui vont être détectés et transformés en une image

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14
Q

Quelles sont les 5 étapes de la préparation en ME ?

A 
Fixation 
Déshydratation 
Inclusion
Coupe 
Obtention du contraste
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15
Q

Qu’est-ce que la fixation ?

A

Objectif : tuer les cellules tout en maintenant les constituants

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16
Q

Donner des exemples de fixateurs

A

Le formaldéhyde
Le glutaraldéhyde
Le tétroxyde d’osmium

17
Q

Qu’est-ce que la déshydratation ?

A

Elle élimine l’eau et prépare l’inclusion

Eviter des déformations si le vide est nécessaire

18
Q

Quelle est la méthode de la déshydratation ?

A

Plonger la préparation dans des bains d’éthanol successifs en augmentant la concentration en éthanol au fur et à mesure

19
Q

Qu’est-ce que l’inclusion ?

A

Afin d’obtenir des tranches fines, avant de les couper, on les inclut dans des matériaux plus durs

20
Q

Donner des exemples de matériaux intervenant dans l’inclusion

A

La paraffine (MO) et la résine (ME)

21
Q

Quelle est la taille des coupes ?

A

1 à 10 μm pour MO

50 à 100 nm pour ME

22
Q

Comment se réalisent les coupes ?

A

Grâce à un microtome qui présente une lame aiguisée :
en acier (MO)
en verre ou diamant (ME)

puis les coupes sont placées :
lame de verre (MO)
grille de cuivre (ME)

23
Q

En MO, quelles sont les 2 possibilités d’obtenir le contraste ?

A

La réfringérence naturelle des cellules

Coloration par fluorochrome ou colorants

24
Q

Quels sont les 2 types de colorants en MO ?

A

basiques qui se lient aux structures acides de la cellule

acides qui se lient aux structures basiques de la cellule

25
Q

En MET, quelle est la méthode de coloration ?

A

On réalise une imprégnation des cellules ou des tissus par les métaux lourds

26
Q

Donner des exemples de métaux lourds

A

Sels de plomb
Sels d’argent
Sels d’uranium
Tétroxyde d’osmium

27
Q

En MEB, quelle est la technique de coloration ?

A

Il ne faut pas que les électrons traversent l’objet donc vaporisation par une fiche couche de métaux lourd

28
Q

Donner des exemples de métaux pour une vaporisation

A

Or
Platine
Palladium

29
Q

Quel est l’intérêt de l’immunocytochimie ?

A

D’identifier de manière spécifique des protéines dans les tissus et les cellules

30
Q

Quel est le principe de l’immunocytochimie ?

A

De faire reconnaître des protéines de type antigène par des anticorps qui sont couplés à des molécules détectables

31
Q

Quels sont les différents types de marquage cellulaire ?

A

Le Marquage direct (1 anticorps = 1 antigène)
Le Marquage double (2 anticorps = 2 antigènes)
Le Marquage indirect (1 anticorps primaire contre 1 antigène + anticorps secondaires)

32
Q

En microscopie fluorescente, à quoi est couplé l’anticorps ?

A

A un fluorochrome :
FITC : fluorescéine
TRICT : rhodamine

33
Q

En ME à quoi est couplé l’anticorps ?

A

A des métaux :
L’or colloïdal
Le fer de la ferritine

UE 2 Biocellulaire (30 decks)

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