Chapitre 3 Flashcards
Quelle est la particularité des sites de restriction reconnus par les enzymes de restriction et pourquoi est-ce ainsi?
Ce sont des palindromes. C’est ainsi car les enzymes de restriction sont souvent des dimères qui arrivent de chaque côté
Quelle protéine modifie l’ADN de sorte à ce que ses enzymes de restriction ne le coupe pas ?
La méthylase qui ajoute un groupement méthyl
Quelles sont les deux sortes de coupes des enzymes de restriction ?
Franche (les deux membre du dimère coupent au milieu) et cohésive (coupure asymétrique)
Quelle est la probabilité qu’une suite de 4 nucléotides survienne ?
1/4^4 soit 1/256
Les enzymes de restriction ayant des sites de 4 nucléotides coupent des fragments plus courts ou plus long que celles avec des sites de 8?
Plus courts
Qu’est ce qu’on utilise pour visualiser l’ADN lors d’expériences comme l’électrophorèse?
Le bromure d’éthidium car il est plat comme une feuille et vient s’intercaler entre les bases
Un ADN coupé par une enzyme de restriction donne-t-il toujours les mêmes fragments?
Oui, à moins d’une mutation
À quoi font référence les noms des enzymes?
À l’organisme dans lequel elles ont été trouvé
Quelle est la structure d’un plasmide qui peut être utilisé comme vecteur de clonage?
Une origine de rélpication, un marqueur de sélection (souvent une gène de résistance) et un site de multiclonage
À quoi sert le site de multiclonage?
Il sert à contenir divers sites de restriction pour ensuite éventuellement couper avec les enzymes et mettre l morceau d’ADN qu’on voulait répliquer
Combien d’origines de réplication les pasmides ont-ils et que détermine-t-elle?
Une seule et elle détermine le nombre de copies que la bactérie peut faire
Nomme les 4 antibiotiques qui auxquels résistent les marqueurs de sélection les plus utilisés
Tétracycline, Ampiciline, Kanamycine et Chloramphénicol
Quelle est la particularité de l’ampiciline ?
Les gènes résistants à l’ampiciline sécrètent de la béta lactase donc des colonies non résistantes se créent autour des bactéries résistantes
Quelle est la grandeur de la séquence à amplifier dans la réaction PCR?
Elle est délimitée par les amorces
Quelles sont les 5 éléments nécessaires à la réaction PCR?
Des ADN polymérases résistantes à hautes températures, une ADN matrice, des amorces spécifiques capables de s’hybrider sur l’ADN, des dNTP et la capacité de changer rapidement la température