Chapitre 3 Flashcards
Quelle est la particularité des sites de restriction reconnus par les enzymes de restriction et pourquoi est-ce ainsi?
Ce sont des palindromes. C’est ainsi car les enzymes de restriction sont souvent des dimères qui arrivent de chaque côté
Quelle protéine modifie l’ADN de sorte à ce que ses enzymes de restriction ne le coupe pas ?
La méthylase qui ajoute un groupement méthyl
Quelles sont les deux sortes de coupes des enzymes de restriction ?
Franche (les deux membre du dimère coupent au milieu) et cohésive (coupure asymétrique)
Quelle est la probabilité qu’une suite de 4 nucléotides survienne ?
1/4^4 soit 1/256
Les enzymes de restriction ayant des sites de 4 nucléotides coupent des fragments plus courts ou plus long que celles avec des sites de 8?
Plus courts
Qu’est ce qu’on utilise pour visualiser l’ADN lors d’expériences comme l’électrophorèse?
Le bromure d’éthidium car il est plat comme une feuille et vient s’intercaler entre les bases
Un ADN coupé par une enzyme de restriction donne-t-il toujours les mêmes fragments?
Oui, à moins d’une mutation
À quoi font référence les noms des enzymes?
À l’organisme dans lequel elles ont été trouvé
Quelle est la structure d’un plasmide qui peut être utilisé comme vecteur de clonage?
Une origine de rélpication, un marqueur de sélection (souvent une gène de résistance) et un site de multiclonage
À quoi sert le site de multiclonage?
Il sert à contenir divers sites de restriction pour ensuite éventuellement couper avec les enzymes et mettre l morceau d’ADN qu’on voulait répliquer
Combien d’origines de réplication les pasmides ont-ils et que détermine-t-elle?
Une seule et elle détermine le nombre de copies que la bactérie peut faire
Nomme les 4 antibiotiques qui auxquels résistent les marqueurs de sélection les plus utilisés
Tétracycline, Ampiciline, Kanamycine et Chloramphénicol
Quelle est la particularité de l’ampiciline ?
Les gènes résistants à l’ampiciline sécrètent de la béta lactase donc des colonies non résistantes se créent autour des bactéries résistantes
Quelle est la grandeur de la séquence à amplifier dans la réaction PCR?
Elle est délimitée par les amorces
Quelles sont les 5 éléments nécessaires à la réaction PCR?
Des ADN polymérases résistantes à hautes températures, une ADN matrice, des amorces spécifiques capables de s’hybrider sur l’ADN, des dNTP et la capacité de changer rapidement la température
Quelles sont les 3 étapes de la réaction PCR ?
Dénaturation, hybridation et élongation
Comment peut-on calculer le nombre de fragments produits dans une réaction PCR?
2^n-2n où n est le nombre de cycles
Quelle et la différence majeure entre l’ARN et l’ADN au niveau des bases ?
L’ARN a de l’uracile au lieu de la thymine
Est ce qu’il existe un mécanisme de correction pour l’ARN comme pour l’ADN?
Non car il y a trop de copies de l’ARN pour que ce soir rentable
L’ARN est-il forcément un simple brin droit ?
Non, les structures en tyge boucle sont très communes
Quelles sont les 4 sortes principales d’ARN et quelles sont leur fonction?
L’ARN messager est la copie de l’ADN qui sera traduite en protéine, l’ARN de transfert reconnait les codons et transfert les acides aminés, l’ARN ribosomal forme les ribosomes et les ARN nucléaires participent à l’épissage des ARN messagers
Combien existe-t-il de codons possibles?
4^3=64 codons possibles
Quelle est la structure des ARNt?
Ils ont une partie avec un anticodon qui se lie à un codon particulier et une autre partie se liant à l’acide aminé correspondant
Quelle est la méthode la moins efficace de détermination de l’identité des codons?
In vitro en mettant assez d’acides aminés et d’ARNm, on peut voir les réactions et faire des déductions
Expliquer l’expérience d’hybridation sur filtre
- On a une solution avec un codon précis, des acides aminés dont un radioactif, des ARN t, des ribosomes et un filtre qui laisse tout passer sauf les ribosomes
- L’ARNt se lie avec l’acide aminé correspondant à son anticodon
- Le codon se lie avec le ribosome
- L’anticodon se lie au codon
- Tout ca est collé au filtre et on voit avec la radioactivité quel codon est associé à quel acide aminé
Le code génétique est-il universel?
Presque, à quelques exceptions près
