Chap 12 - Cellules souches Flashcards
Qu’est ce que des cellules souches?
Cellules capables de se différencier en une variété de types de cellules d’un organisme pluricellulaire.
Comment sont issu les cellules différenciées?
Les cellules différenciées sont issus de la division asymétrique de cellules souches (1 cellule fille reste cellule souche, l’autre cellule fille enclenche la différenciation)
Quels sont les caractéristiques des cellules souches?
Cellule non différencié, non spécialisé
Cellule capable de se répliquer
Cellules ont la capacité de former un ou plusieurs types de cellules différenciées
Quels sont les différents sous-types de cellules souche?
Totipotente: capable de se différencier en tous les types cellulaires y compris les cellules extra-embryonnaires
Pluripotente: capable de se différencier en toutes les cellules spécialisées d’un individu
Multipotente: capable de se différencier en plusieurs types de cellules spécialisées
Unipotente: capable de se différencier en un seul type de cellule spécialisée
Embryonnaire: trouvé dans l’embryon, forme l’organisme au complet
Adulte: présente dans plusieurs tissus chez l’adulte (a/n M.O.), régénération des tissus
Comment obtenir des cellules souches embryonnaires pluripotente in vitro?
Les cellules souches pluripotentes sont extraites de la masse de cellules interne au blastocyte
Elles sont déposées sur une couche de cellule nourricière des fibroblaste de souris irradiées (empêche division) (surface d’attachement et source de nutriment)
Cellules souche forment colonies
-Grâce au LIF (leukemia inhibiting factor) les cellules souches de souris restent pluripotente/ sans LIF ou sérum elles se différencient en neuronne
Dans les cultures de cellules ES humaines : ajout de bFGF (basic firboblast growth factor) maintiennent la pluripotence
Les cellules souche embryonnaires peuvent ^tre conservé dans ses conditions ce qui leur permettent de se reproduire indéfiniment, tant qu’on les empêches de pousser à confluence
Quels sont les caractéristiques des cellules souches embryonnaires en culture?
Morphologie des cellules et colonies
Expression de gène spécifique (Oct4, Nanog(facteur de transcription qui permet le maintien de la pluripotence))
Capable de se différencier in vitro
Capable de former des tératomes (une tumeur possédant plusieurs types de tissus issue d’une cellules pluripotente , peut contenir des os, cartilage, cheveux, dent, les cellules souche pluripotente sont capable de former des tératomes dans des souris nues immunodéficiente)
Qu’est-ce qui permet la différenciation in vitro des cellules souches?
Facteur de différenciation:
-Homones
-molécule diverse
-expression ectopique de gènes
Cardiomyocyte: on envisage l’utilisation de cellules souches pour traiter les maladies cardiovasculaire
Recherche: comprendre le fonctionnement
Potentiel thérapeutique: injection de cellules souches embryonnaire directement au site endommagé (différenciation correct?? risque de tératome??) injection de cellules souche pré-différenciées in vitro (efficacité variable, demande plus de connaissance) fort risque de rejet
Comment se déroule la fécondation in vitro?
A/p d’un ovocyte et de spermatozoide, fécondation dans un pétri et division cellulaire jusqu’à ce que l’embryon soit implanté dans le corps de la mère.
Comment se déroule le clonage thérapeutique?
Afin d’éliminer le risque de rejet, transfert d’un noyau d’une cellule somatique adulte vers un ovocyte énucléé
Cellule souche de l’humain dans un ovocyte énucléé= embryon (étape critique reprogrammation génétique, télomérase active, enclenchement division cellulaire), inner cell mass du blastocyste isolé en culture pour donner des cellules souches qui peuvent être différencier et ensuite introduit dans l’humain
Comment se déroule le clonage reproductif?
Cellule somatique dans ovocyte énucléé= embryon le blastocyste est ensuite introduit par fécondation in vitro dans une mère porteuse.
Quels sont les limitations quand à la production de cellules souches pour usage thérapeutique?
Il est interdit de créer des embryons humains unique ment pour la recherche, seulement les rejet d’essais de fertilisation in vitro peuvent être utilisé. Autre source d’embryon chimère; patrimoine génétique humain intégré dans ovocyte de mammifère bon pour la recherche mais pas pour le potentiel thérapeutique.
Risque d’instrumentation du corps de la femme pour obtenir les ovocytes pour le clonage thérapeutique (rareté des donneuses) risque d’ouvrir la porte au clonage reproductif
Comment on peut générer des cellules souches induites à partir de tissu différencié adulte?
Dérivent de cellules adultes pleinement différencié
Reprogrammé génétiquement afin de revenir à un état de cellules souches (marqueur de cellule souche, pluripotence, capacité former des tératomes)
Gène requis : Oct4, Sox2, c-Myc et Klf4 ces gènes sont tous des facteurs de trancription qui eux même influence des centaines de gènes
Quels sont les désavantages et les avantages au niveau du potentiel thérapeutique des cellules souches induites?
Résout le problème de rareté des cellules (n’importe quelle cellule peut être tirée d’un patient)
Risque de rejet plus faible
Comment exprimer les facteur de façon sécuritaire? (se fait présentement avec des rétrovirus)
Risque de tumeur? (utilisation de c-Myc)
Très peu efficace= coût prohibitif pour l’instant
