cellules souches, hématopoïèse et homéostasie du sang Flashcards
Où trouve-t-on des cellules souches hématopoïétiques (CSH)?
- dans la moelle osseuse
- dans le sang
- dans le cordon ombilical et le placenta
- dans le système hématopoïétique foetal
où trouve-t-on les niches des CSH embryonnaires?
AGM = aorte-gonad-mésonéphros, foie du foetus
où trouve-t-on la niche des CSH adultes?
dans la moëlle osseuse rouge
Comment trouver des CSH dans la moëlle osseuse?
marquer ADN des CSH “Label Retaining Cells”,
comment étudier l’hématopoïèse?
- in vivo
- utilisation du FACS / essai de formation de colonies in vitro
- analyse de cellules individuelles:
-> RNA-seq
-> Barcoding
comment marquer des populations cellulaires spécifiques? à quoi ça peut servir?
- utilisation de combinaisons d’anticorps pour marquer des protéines de surface spécifiques à chaque type de cellules
- pour les purifier et tester leur potentiel
ça sert à quoi Colony forming unit-culture (CFU-c)?
- quantification du nombre de progéniteurs et de leur potentiel in vitro
- étudier des colonies dérivées de CSH et de cellules plus différenciées in vitro
- estimer taille, nombre de cellules et leur morphologie
c’est quoi les étapes du CFU-c?
- transfert des cellules sur une culture de méthylcellulose contenant des cytokines (IL3, IL6, Epo, SCF)
- compter et examiner des colonies 12 jours plus tard
comment analyser la fct des CSH humaines in vivo?
il est possible d’avoir une differentiation de cellules T et B humaines in vivo, en transplantant des CSH et des tissus immunitaires humains dans une souris immunodéficiente
méthodes d’analyse de cellules individuelles
single cell RNA-seq et pour analyser on fait de la reduction de dimensionalité pour positionner les cellules en fonction de leur similarité de leur transcriptome
principe de l’analyse du potentiel des CSH par barcoding
insérer dans le génome de chaque CSH une séquence d’ADN artificielle différente = code barre, on peut ensuite quantifier la représentation de chaque code barre dans diff types de cellules du sang
comment réguler l’hématopoïèse?
avec des facteurs de croissance stimulants ou des cytokines inhibitrices
substance synthétisée par le rein en réponse à une hypoxie
érytropoiétine (EPO)
comment mesure la fonction homéostasique des CSH?
Dox+ (doxycycline) active facteur de transcription M2-rtTA, HSB c’est une transposase qui va permettre au transposon de sauter dans le génome à un autre endroit, les CSH vont se différencier et on obtient des labelled progeny
applications thérapeutiques des CSH
- transplantation de CSH pour traiter la leucémie: autologue (on lui transplante ses propres cellules souches apres être traitées), allogénique (d’un donneur à un patient)
avantages de la transplantation allogénique et autologue
allogénique: évite maladies aiguë et chronique du greffon contre l’hôte en éliminant les cellules T immunoréactives de la greffe
autologue: cas de purification des CSH de patients cancéreux et réintroduction après thérapie -> peu de risque de restitution des cellules cancéreuses au patient
qu’est-ce qui determine la compatibilité entre donneur et receveur?
HLA = MHC humain
que se passe-t-il après la greffe?
risque prolongé d’infection aux virus et champignons
complications de la greffe de CSH
echec/rejet, attaque de l’hôte par la greffe, infection par immunosuppression
les deux types de circulations sanguines
petite ou pulmonaire, et grande ou systémique (tout le reste)
types de vaisseaux sanguins
veine: vers le coeur -> petites=veinules
artère: depuis le coeur -> petites = arterioles, contient plus de muscle que les veines
fonctionnement circulation dans le foie
- reçoit sang des intestins (veine porte) puis le remet en circulation
- reçoit oxygène par l’artère hépatique depuis le coeur
- role majeur dans le métabolisme des lipides et des glucides
- sang repart par veine hépatique
échanges entre réseau lymphatique et sanguin
ils se font entre les capillaires sanguins et lymphatiques, la circulation lymphatique recollecte le fluide extracellulaire
qu’est-ce qui permet au fluide de se déplacer dans vaisseaux lymphatiques?
valves pas des pompes
rôle de la coagulation
implique 12 protéines circulantes (facteurs de coagulation), qui vont générer une cascade protéolytique pour aboutir à la polymérisation de fibrine
les deux pathways pour la coagulation sanguine
- activation par contact (intrasèque), conversion de facteur XII en XIIa
- facteur VII qui quitte circulation sanguine lors d’une lésion pour entrer en contact avec Tissue Factor sur fibroblastes et leucocytes
étapes de la formation d’un bouchon plaquettaire de la premiere hémostase
- adhesion and primary activation
- primary aggregation
- secondary activation
- secondary aggregation
étapes de la formation d’un caillot sanguin de la seconde hémostase
tissue facteur déclenche cascade de coagulation; expression du complexe phospholipidique; activation de la thrombine; fibrinopolymérisation
étapes suite à une lesion d’un vaisseau sanguin
1.vasoconstriction du vaisseau pour limiter perte de sang, libération d’endotheline
2. hémostase primaire forme un bouchon plaquettaire fragile
3. hémostase secondaire stabilise caillot par fibrine
4. processus anti-thrombotique qui équilibre l’hémostase et dissous le caillot
