cellules souches, hématopoïèse et homéostasie du sang

Question 1

Où trouve-t-on des cellules souches hématopoïétiques (CSH)?

Answer 1

1. dans la moelle osseuse
2. dans le sang
3. dans le cordon ombilical et le placenta
4. dans le système hématopoïétique foetal

Question 2

où trouve-t-on les niches des CSH embryonnaires?

Answer 2

AGM = aorte-gonad-mésonéphros, foie du foetus

Question 3

où trouve-t-on la niche des CSH adultes?

Answer 3

dans la moëlle osseuse rouge

Question 4

Comment trouver des CSH dans la moëlle osseuse?

Answer 4

marquer ADN des CSH “Label Retaining Cells”,

Question 5

comment étudier l’hématopoïèse?

Answer 5

• in vivo
• utilisation du FACS / essai de formation de colonies in vitro
• analyse de cellules individuelles:
  -> RNA-seq
  -> Barcoding

Question 6

comment marquer des populations cellulaires spécifiques? à quoi ça peut servir?

Answer 6

• utilisation de combinaisons d’anticorps pour marquer des protéines de surface spécifiques à chaque type de cellules
• pour les purifier et tester leur potentiel

Question 7

ça sert à quoi Colony forming unit-culture (CFU-c)?

Answer 7

• quantification du nombre de progéniteurs et de leur potentiel in vitro
• étudier des colonies dérivées de CSH et de cellules plus différenciées in vitro
• estimer taille, nombre de cellules et leur morphologie

Question 8

c’est quoi les étapes du CFU-c?

Answer 8

1. transfert des cellules sur une culture de méthylcellulose contenant des cytokines (IL3, IL6, Epo, SCF)
2. compter et examiner des colonies 12 jours plus tard

Question 9

comment analyser la fct des CSH humaines in vivo?

Answer 9

il est possible d’avoir une differentiation de cellules T et B humaines in vivo, en transplantant des CSH et des tissus immunitaires humains dans une souris immunodéficiente

Question 10

méthodes d’analyse de cellules individuelles

Answer 10

single cell RNA-seq et pour analyser on fait de la reduction de dimensionalité pour positionner les cellules en fonction de leur similarité de leur transcriptome

Question 11

principe de l’analyse du potentiel des CSH par barcoding

Answer 11

insérer dans le génome de chaque CSH une séquence d’ADN artificielle différente = code barre, on peut ensuite quantifier la représentation de chaque code barre dans diff types de cellules du sang

Question 12

comment réguler l’hématopoïèse?

Answer 12

avec des facteurs de croissance stimulants ou des cytokines inhibitrices

Question 13

substance synthétisée par le rein en réponse à une hypoxie

Answer 13

érytropoiétine (EPO)

Question 14

comment mesure la fonction homéostasique des CSH?

Answer 14

Dox+ (doxycycline) active facteur de transcription M2-rtTA, HSB c’est une transposase qui va permettre au transposon de sauter dans le génome à un autre endroit, les CSH vont se différencier et on obtient des labelled progeny

Question 15

applications thérapeutiques des CSH

Answer 15

• transplantation de CSH pour traiter la leucémie: autologue (on lui transplante ses propres cellules souches apres être traitées), allogénique (d’un donneur à un patient)

Question 16

avantages de la transplantation allogénique et autologue

Answer 16

allogénique: évite maladies aiguë et chronique du greffon contre l’hôte en éliminant les cellules T immunoréactives de la greffe
autologue: cas de purification des CSH de patients cancéreux et réintroduction après thérapie -> peu de risque de restitution des cellules cancéreuses au patient

Question 17

qu’est-ce qui determine la compatibilité entre donneur et receveur?

Answer 17

HLA = MHC humain

Question 18

que se passe-t-il après la greffe?

Answer 18

risque prolongé d’infection aux virus et champignons

Question 19

complications de la greffe de CSH

Answer 19

echec/rejet, attaque de l’hôte par la greffe, infection par immunosuppression

Question 20

les deux types de circulations sanguines

Answer 20

petite ou pulmonaire, et grande ou systémique (tout le reste)

Question 21

types de vaisseaux sanguins

Answer 21

veine: vers le coeur -> petites=veinules
artère: depuis le coeur -> petites = arterioles, contient plus de muscle que les veines

Question 22

fonctionnement circulation dans le foie

Answer 22

• reçoit sang des intestins (veine porte) puis le remet en circulation
• reçoit oxygène par l’artère hépatique depuis le coeur
• role majeur dans le métabolisme des lipides et des glucides
• sang repart par veine hépatique

Question 23

échanges entre réseau lymphatique et sanguin

Answer 23

ils se font entre les capillaires sanguins et lymphatiques, la circulation lymphatique recollecte le fluide extracellulaire

Question 24

qu’est-ce qui permet au fluide de se déplacer dans vaisseaux lymphatiques?

Answer 24

valves pas des pompes

Question 25

rôle de la coagulation

Answer 25

implique 12 protéines circulantes (facteurs de coagulation), qui vont générer une cascade protéolytique pour aboutir à la polymérisation de fibrine

Question 26

les deux pathways pour la coagulation sanguine

Answer 26

1. activation par contact (intrasèque), conversion de facteur XII en XIIa
2. facteur VII qui quitte circulation sanguine lors d’une lésion pour entrer en contact avec Tissue Factor sur fibroblastes et leucocytes

Question 27

étapes de la formation d’un bouchon plaquettaire de la premiere hémostase

Answer 27

1. adhesion and primary activation
2. primary aggregation
3. secondary activation
4. secondary aggregation

Question 28

étapes de la formation d’un caillot sanguin de la seconde hémostase

Answer 28

tissue facteur déclenche cascade de coagulation; expression du complexe phospholipidique; activation de la thrombine; fibrinopolymérisation

Question 29

étapes suite à une lesion d’un vaisseau sanguin

Answer 29

1.vasoconstriction du vaisseau pour limiter perte de sang, libération d’endotheline
2. hémostase primaire forme un bouchon plaquettaire fragile
3. hémostase secondaire stabilise caillot par fibrine
4. processus anti-thrombotique qui équilibre l’hémostase et dissous le caillot