Capítulo 1 - Técnicas De Tinción, Preparación De Tejidos, Microscopia Flashcards
Es el estudio de estructuras microscópicas de los tejidos y órganos del cuerpo:
Histología
Este tipo de microscopio sirve para visualizar preparados histológicos
Microscopía óptica
Este tipo de microscopia sirve para visualizar muestras microscópicas digitalizadas en la pantalla de una computadora o dispositivo móvil:
Microscopía virtual
¿Cuál es el tipo de colorante más usados en los estudios histológicos con el microscopio óptico?
Hematoxilina y eosina
Ordena desde el primer al último procedimiento de la preparación de tejido:
- Estracción
- Fijación
- Deshidratación y aclarado
- Inclusión
- Microtomía, corte o sección
- Montaje y tinción
¿Con qué componentes se deshidrata el tejido (generalmente) y se incluye ?
Con alcohol en concentraciones de 50% a 100% y se incluye con parafina para observar con el M.O. pero con el electrónico es la resina Epoxi.
¿En qué se basan los procedimientos histoquímicos y citoquímicos?
Se basan en la unión específica de un colorante con un componente celular que exhibe actividad enzimática inherente.
¿Qué es la eosina?
En un colorante con carga negativa que tiñe de color rosado. Reacciona con grupos catiónicos cargados positivamente en células y tejidos en particular con grupos amino (estructuras eosinófilas).
¿Qué es la hematoxilina?
Es un colorante básico con carga neta positiva que tiñe de color azul. Principalmente reacciona con grupos fosfato ionizados cargados negativamente en ácidos nucleicos (estructura basófila)
Tiñe hidratos de carbono y moléculas ricas en hidratos de carbono de un color púrpura característico:
Ácido peryódico-reactivo de Schiff (PAS)
Se utiliza para demostrar el glucógeno en las células, moco en las células y tejidos, la membrana basal y fibras reticulares en el tejido conjuntivo:
Tinción de ácido peryódico-reactivo de Schiff (PAS)
Se basa en la especificidad de una reacción entre un antígeno y un anticuerpo que está conjugado ya sea con un colorante fluores- cente (para microscopia óptica) o con partículas de oro (para microscopía electrónica):
Inmunocitoquímica
Método de localización de ARNm o ADN mediante la secuencia de interés con una sonda de nucleótidos de secuencia complementaria:
Hibridación
Técnica que utiliza colorantes fluorescentes combinados con sondas de nucleótidos, para visualizar múltiples sondas al mismo tiempo:
Técnica de hibridación in situ con fluorescencia (FISH)
Técnica de tinción muy utilizada en pruebas genéticas:
Técnicas de hibridación in situ con fluorescencia (FISH)
Utiliza una emulsión fotográfica colocada sobre un corte histológico para localizar material radiactivo dentro de los tejidos:
Autorradiografía
Capacidad de una lente o sistema óptico del microscopio para producir imágenes separadas de los objetos que están muy cerca uno de otro:
Poder de resolución
¿Cuál es el poder de resolución de un microscopio óptico?
Es de aprox. 0.2 micrómetros
Estos microscopios utilizan la interacción de un haz de electrones con una muestra para producir una imagen y tienen una potencia teórica de resolución de 0,5 micrómetros:
Microscopios electrónicos de transmisión
¿Cuáles son las diferencias en el proceso de preparación de muestras del óptico con el electrónico?
En el electrónico se van a usar fijadores como: glutaraldehído o tetraoxido de osmio, en la inclusión es con resina plástica o epoxi y para la tinción y montaje fue metales pesados.
Estros microscopios utilizan electrones reflejados o fosforizados a salir de la superficie de la muestra que se recogen mediante detectores y se reprocesan para formar una imagen de esta superficie con un poder de resolución de 2,5 nm:
Microscopio electrónico de barrido
Son microscopios no ópticos que utilizan una sonda puntiaguda muy fina (soporte o voladizo) que se mueve a través de la superficie de una muestra poder de resolución de 50 pm:
Microscopio de fuerza atómica.
Tratamiento del tejido con sustancias químicas que no sólo retardan las alteraciones hísticas posteriores a la muerte (o a la remoción del organismo), sino que también conservan su configuración normal:
Fijación
¿Cuáles son los componentes de fijación más usados en microscopia óptica?
Formalina 37-40% y fijador de Bouin
¿El formaldehído reacciona con los lípidos?
No y por esta razón es un mal fijador de membranas celulares
¿Cuáles son los medios de inlcusión más usados?
En M.O. es la parafina y en M.E es la resina epoxi
¿Cuáles son las tres clases de colorantes para tejidos?
- Colorantes para diferenciación de ácidos y bases
- Colorantes que distinguen componentes fibrosos de la matriz extracelular
- Sales metálicas
El azul de toluida tiñe de color azul los tejidos ricos en polianiones (cartílago y gránulos de células cebadas), que se tiñen de color purpura. ¿Qué se afirma cuando un componente se tiñe de color azul o purpura con este colorante?
Si es purpura es metacromático y si es azul es metacromasia.
¿Qué tipo de fijador se usa para células adiposas?
El tetraóxido de osmio o permanganato de osmio
¿Que método de tinción se puede utilizar para el material elástico y la impregnación argéntica para fibras reticulares y las membranas basales?
Orceína y fuscina
¿Cuáles son las tinciones de uso más frecuente para las biopsias por congelación?
Hematoxilina y eosina, azul de metileno y tinción de PAS
¿Qué componentes se pierden durante la rutina de fijación?
Glucógeno, proteoglucanos y glucosaminoglucanos
¿Qué componentes se pierden durante la preparación de muestras en parafina y hematoxilina y eosina?
Sodio, cloro, metabolitos intermedios, glucosa
De los siguientes colorantes clasifícalos de acuerdo a si son ácidos o básicos y de qué color son:
Naranja G
Eosina
Azul de Toluidina
Azul de Anilina
Verde de metilo
Fuscina ácida
Pironina G
Azul de metileno
COLORANTES BÁSICOS
- Verde de metilo (verde)
- Azul de metileno (Azul)
- Pironina G (Rojo)
- Azul de toluidina (Azul)
COLORANTES ÁCIDOS
- Fuscina ácida (rojo)
- Azul de anilina (azul)
- Eosina (rojo)
- Naranja G (Naranja)
De acuerdo a el colorante menciona su color y lo que tiñe:
Hematoxilina
Azul: Núcleo, regiones ácidas del citoplasma; matriz de cartílago
De acuerdo a el colorante menciona su color y lo que tiñe:
EOSINA
Rosa o rojo: regiones básicas del citoplasma; fibras de colágena
De acuerdo a el colorante menciona su color y lo que tiñe:
Tricrómica de Masson
Azul oscuro: núcleo
Rojo: Músculo, queratina, citoplasma
Azul claro: mucinógeno, colágena
De acuerdo a el colorante menciona su color y lo que tiñe:
Colorante de orceína para fibras elásticas
Pardo: fibras elásticas