Analisis genomicos proteicos: Parte 3 (Interacciones proteina-proteina) Flashcards
VERDADERO O FALSO
La expresion de proteinas es un proceso dinamico
VERDADERO
VERDADERO O FALSO
Las proteinas pueden o no activarse o expresarse
VERDADERO
VERDADERO O FALSO
El tipo de celula es un factor importante para saber como se expresa una proteina
VERDADERO
Cuales son los 6 aspectos importantes para entender la funcion de una proteina?
- Secuencia y estructura de la proteina
- Historial evolutivo y secuencias conservadas
- Perfil de expresion
- Modificaciones postraduccionales
- Interacciones entre otras proteinas
- Localizacion intracelular
Cuales son los 2 tipos de interacciones entre proteinas?
Estables
Transitorias
Son interacciones fuerte o debiles
Las interacciones estables entre proteinas estan asociadas a….
Estan asociadas a:
- Complejos de multiples subunidades identicas o diferentes
Da 2 ejemplos de proteinas con interacciones estables?
Hemoglobina
RNA polimerasa central
Que otros enlaces se encargan de unir a las proteinas?
Enlaces hidrofobos
Fuerzas de Van der Waals
Puentes Salinos
Que 5 efectos biologicos tendremos por las interacciones proteina-proteina?
- Alteracion de propiedades cineticas de enzimas
- Canalizacion de sustratos
- Creacion de nuevos sitios de union
- Inactivacion o destruccion de una proteina
- Cambio en la especificidad de una proteina
Cuales son los 4 metodos para analizar los tipos de interacciones entre proteinas?
- Co-inmunoprecipitación (co-IP)
- Ensayos pull-down
- Análisis de interacción por crosslinking de proteínas.
- Análisis far-western blot
Para que sirve el ensayo de Co-inmunoprecipitación, cual es el cebo y cual es la presa? y para que tipo de interacciones se usa? y que otro componente usa?
- Inmunoprecipitacion de una proteina unica
- Cebo (anticuerpo): Proteina inmunoprecipitada
- Presa (Proteina que se esta buscando): Complejo asociado de union a proteina
- Tambien se usa una molecula magnetica
- En interacciones Estables (fuertes)
Cuales son las caracteristicas de los Ensayos Pull-down, y cual es el cebo? y para que interacciones se usa?
- Uso de una Matriz de soporte
- Cebo: Proteina para purificar
- En interacciones Estables
- NO usa anticuerpos
Cuales son las caracteristicas del ensayo de Análisis de interacción por crosslinking de proteínas? y para que interacciones se usa?
- Generar o marcar el entrecruzmiento de proteinas y poder unirlas de manera permanente
- Para interacciones debiles (transitorias)
- Se usan pasos extra (lisis celular, purificacion por afinidad, electroforesis o espectrometria)
Cuales son las caracteristicas para el ensayo Análisis far-western blot? y para que interacciones se usa?
- NO usa anticuerpo
- Usa proteinas marcadas, cebo y purificada
- Deteccion por incubacion con electroforesis
- Interacciones moderadas
Cuales son las caracteristicas del Gel de Poliacrilamida?
- Gel de soporte
- Polimerizacion de Acrilamida + Bisacrilamida
- Mucha poliacrilamida, tamaño del poro disminuido