8- Coagulation et test Flashcards
2 fonctions de l’hémostase?
Enrayer saignement
Prévenir thromboses
Que fait l’hémostase primaire, secondaire et leurs mécanismes de contrôle?
- Primaire = clou plaquettaire, efficacité max a/n petits vaisseaux
- Secondaire: consolidation clou plaquettaire, efficacité max vaisseaux petits/moyens
- Contrôle = anticoagulants et substance antiplaquettaire, fibrinolyse
Adhésion
plaquettaire en 3 étapes
- Adhésion rapide et réversible au collagène sous endothélial grâce au facteur von Willebrand et à la GP1b plaquettaire
- La liaison à la GPIb va provoquer l’activation de la GPVI puis l’activation de l’intégrine α 2 β 1
- Adhésion plaquettaire ferme entre le collagène et l’ α 2 β 1
Synthèse du facteur von Willebrand et fonctions?
- Synthétisé par cellules endothéliales et mégacaryocytes
- Fonctions:
a) Cofacteur de l’ adhésion plaquettaire
b) Prolonge la demi vie du FVIII en se liant de manière non covalente. C’est la thrombine qui va libérer le FVIII à proximité du caillot en formation.
Activation plaquettaire
- Exposition des phospholipides chargés négativement
- Changement de forme, formation, pseudopodes
- Synthèse de thromboxane A2 et libération du contenu des granules plaquettaires
Sécrétion plaquettaire
Liaison ADP à R-plaquettaire
Diminution des taux d’ AMPc et augmentation des concentrations de Ca2+
Permet l’activation de alpha IIb beta 3 : Transition d’un état non adhésif à un état adhésif
Récepteurs bloqués par certains médicaments (Clopidogrel)
Rôle de alpha IIb beta 3 dans agrégation plaquettaires?
- 40 000 à 80 000 récepteurs/plaquettes
- Intégrines exprimées dans un état de faible affinité
- Son activation est nécessaire pour être efficace
- Chaque récepteur peut se lier à une molécule de fibrinogène ou de FvW
Rôle du fibrinogène dans agrégation plaquettaires?
- cofacteur essentiel pour assurer l’agrégation plaquettaire
* Lien entre les plaquettes (via alpha IIb beta 3
Qu’est-ce la coagulation?
Série de réactions enzymatiques impliquant près
d’une vingtaine de substances dont la plupart sont
synthétisées par le foie sous une forme inactive
(zymogènes ou cofacteurs inactifs).
facteur X = inactive
facteur Xa = active
Quels facteurs sont dépendant de la vitK?
II, VII, IX, X
protéine C et protéine S et ostéocalcine
Caractéristique commune = capacité à lier le Ca
Qu’est-ce qui est nécessaire pour la fixation du Ca (coagulation) et quelle enzyme le permet?
La carboxylation est nécessaire pour la fixation du calcium. Elle est assurée par l’enzyme y-glutamyl carboxylase dont le cofacteur est la vitamine K réduite en hydroquinone
3 voies de la cascade de coagulation
Voie intrinsèque, extrinsèque, commune (fibrine)
Facteurs de la voie intrinsèque
- débute par la phase de contact (activer par des molécules de surfaces chargées négativement, et subst endogène)
- kinine de HPM (haut poids mol), prékallicréine, facteur XII
- XIIa active XI qui active IX. IXa lie au facteur VIIIa pour former complexe tenase qui active directement facteur X
- thrombine (IIa) acitve facteur XI, VIII et V
Facteurs de la voie extrinsèque
Lors de dommage à l’endothélium : Facteur tissulaire (FT) et facteur VIIa forme complexe FT-FVII-Ca2+
- petite qté de thrombine généré durant la phase d’initiation
Quelles sont les fonctions de la thrombine générée durant la phase d’initiation?
o Activation des plaquettes: exposition des phospholipides membranaires à charge négative, libération du FV contenu dans les granules plaquettaires
o Libération du FVIII lié au FvW
o Activation de facteurs de coagulation: FV et FVIII, FIX
Qu’est-ce que la phase de propagation?
• Se déroule à la surface des plaquettes recrutées en grand nombre au site de la lésion endothéliale
o Formation des complexes tenase et prothrombinase
o Génération massive de thrombine et déposition de fibrine
- 95% de la thrombine est formée durant la phase de
propagation
Quels sont les mécanismes de contrôles de la coagulation?
- Antithrombine (inhibe thrombine, FIXa, FXa, FXIa et FT-FVIIa) 80% activité anticoag
- Complexe protC-protS (synthèse prot C par vit K, thrombine-thrombomoduline= active protC qui lie protS pour inhiber FVIIIa et FVa)
- TFPI (inhibe FT, FVIIa et FXa)
- NO, PGI2
- Active fibrinolyse (plasmine, t-PA)
Que sont les tests d’hémostase primaire et secondaire?
1. Tests de l’hémostase primaire o Comptage plaquettaire o Temps de saignement o Tests de fonction plaquettaire (ex.: test d’agrégation) 2. Tests de l’hémostase secondaire o Temps de coagulation (temps de prothrombine et temps de thromboplastine partielle) o Activité de facteurs de coagulation o Activité de l’antithrombine o FDP et d dimères
Prélèvement sanguin: dans les règles de l’art!!!
o Prise de sang avec un traumatisme tissulaire minimale afin de limiter la présence de facteur tissulaire dans l’échantillon.
o Favoriser les veines jugulaires chez les chiens et chats
o Technique utilisant une aiguille de 20g ou plus
o Inversion adéquate du tube contenant le mélange sang-anticoagulant.
o Le citrate de sodium 3.2% est l’anticoagulant pour les tests en hémostase
• remplir le tube afin de respecter un ratio sang:citrate de 9:1
Choix de l’anticoagulant pour tester coagulation et comptage plaquettaire?
Coag = citrate de sodium 3,2% ou 3,8% Plaquette = EDTA
Qu’est-ce que le test de saignement?
Évaluation in vivo de l’hémostase primaire
- Fe, Ca = incise a/n muqueuse lèvre avec instrument commercial standard
- peu sensible, subjectif
- Ca < 4min
- Fe < 3,3 min
Dx d’une thrombopathie?
Test agrégation plaquettaire par agrégométrie optique ou par impédance (ajout activateur : ADP, thrombine, a.arachidonique, collagène)
Comment évaluer le temps de prothrombine et qu’est-ce qui est évalué?
ou temps de Quick
- Évalue voie extrinsèque et commune (FVII, FV, FII, fibrinogène)
- PT prolongé si niveau facteur à 30% de sa valeur normale
- coagulomètre et chronomètre temps formation caillot après ajout thromboplastine et Ca
Que permet d’évaluer le temps de thromboplastine partielle (aPTT)?
- évalue voie intrinsèque et commune
- = temps formation caillot de fibrine dans plasma citraté après adition substance qui active voie intrinsèque
- évalue activité facteur : 12, 11, 9, 8, 5, 10, prothrombine et fibrinogène
Quel teste pour dx état hypercoagulable?
Activité de l’AT (antithrombine)
Comment se fait le dosage du fibrinogène et D-dimère?
fibri : Méthode de Clauss
Des augmentations de FDPs et de DD sont notées lors d’une activation de la coagulation et de la fibrinolyse : coagulation intravasculaire disséminée, thrombose, hémorragies sévères
