2- Formule sanguine Flashcards
Quels sont les 6 étapes de la réalisation de la formule sanguine?
- Prélèvements et soumission des échantillons
- Préparation du frottis sanguin
- Fonctionnement des analyseurs
- Paramètres érythrocytaires
- Paramètres leucocytaires
- Examen du frottis sanguin
Quelle est la différence entre l’ Hct et le microHct
o L’ Hct est le « volume occupé » par les GR tel que calculé par la
machine: Hct VGMxEry
o Le microHct est mesuré après la centrifugation d’un capillaire
o Normalement, les deux valeurs devraient être identiques
Quels sont les avantages de prélever dans la veine jugulaire?
- rapide
- débit élevé
- moins de risque de caillot
- ne pas forcer
- éviter hémolyse
Que permet de faire l’EDTA et le citrate de sodium pour l’envoi des échantillons? Quand sont-ils utilisés?
- EDTA = chélation irréversible du Ca2+ (anticoag de choix pour formule sanguine et fluides corporels)
- Citrate de sodium= chélation réversible du Ca2+ (habituellement en homéostase, peut être pour formule sanguine = comptage plaquettaire)
Comment prévenir les
caillots?
o Prélèvement rapide non traumatique
o Bien mélanger le sang avec l’anticoagulant sans secouer le tube
o Renverser un minimum de 5x
Que peut-il se produire si lors du prélèvement on ne respecte pas le volume de remplissage minimum (vacuum)?
- Excès d’EDTA = baisse volumes cell et hématocrites = surestime prot total
Pourquoi doit-on effectuée le frottis tout de suite après la ponction?
Préserve la morphologie cellulaire
Que sont les analyseurs par impédance?
- Rapide, fiable, précise
- Cell passent entre 2 électrodes = hausse résistance = génère impulsions électrique
- Comptage cell déterminé par nbre d’impulsions
- Taille cell déterminée par la baisse de l’impédance électrique
Dans les analyseurs par impédeur, grâce à quoi le différentiel cellulaire est déterminée?
Par la taille cellulaire
Différentiel en 3 parties : lymphocytes, monocytes, granulocytes
Comment se fait le différentiel en 5 parties avec l’analyseur par impédance?
Utilise 2 solutions lytiques
- Lyse = mesure Hgb et détermine un différentiel en 3 parties
- Lyse 2 = lyse des GB pour séparer Éo
- Mesure Hgb par spectrophotométrie
Que sont les principes de base pour la cytométrie de flux?
- Sang dilué passe dans une chambre traversé par faisceau laser
- Passage cell a/n du faisceau provoque dispersion et absorption lumière
- Dispersion/absorption donne infos sur taille cell, complexité du noyau (rond, lobulé), granularité du cytoplasme
Quelles sont les principales différences entre les analyseurs hématologiques d’impédance ou de cytométrie de flux?
o Impédance: surestimation du comptage leucocytaire en présence de GR nucléés
o Impédance: différentiel leucocytaire parfois en 2 ou 3 parties seulement (ex.: granulocytes et cellules mononucléaires)
o Comptage réticulocytaire possible seulement par certains analyseurs fonctionnant avec un principe optique ( cytométrie de flux)
o Distinction plaquettes globules rouges en fonction de la taille est parfois difficile chez le chat
Signification : Hgb Hct ÉRY VGM CGMH
- Hémoglobine Hgb
- Hématocrite Hct
- Nombre de globules rouges ÉRY
- Volume globulaire moyen VGM
- Concentration moyenne en Hgb CGMH
Quand est-ce que l’Hgb peut être surestimé?
- Hémolyse in vivo (fréquent)
- Lipémie (effet marqué)
- Ictère (augmentation des bilirubines)
- Corps de Heinz
Que peut-on déterminer si le VGM est diminué, augmenté, normal?
- Si le VGM est diminué : microcytose
- Si le VGM est augmenté: macrocytose
- Si le VGM est normal: normocytaire
Quels races présentent fréquemment une macrocytose?
Akita (normal) Caniche toys (parfois associé corps Howell-Joly, anémie (rare))
Que peut-on déterminer si le CGMH est diminué, augmenté, normal?
- Si la CGMH est diminuée : hypochromie
- Si la CGMH est augmentée toujours un artefact
- Si la CGMH est normale: normochromie
Quelles sont les 2 méthodes d’utilisation de l’hématocrite pour évaluer la masse érythrocytaire?
o Méthode indirecte: Hct = VGM x ÉRY
o Méthode directe : avec tubes capillaires et centrifugation
Quand l’Hct peut-elle être sous-estimé?
Hématocrite peut
être sous estimé si l’ÉRY ou le VGM est sous estimé
• Échantillon trop vieux (hémolyse)
• Présence d’agglutination (sous estimation de ÉRY)
• Microcytose
• Diminution de l’osmolalité sanguine
Quand l’Hct peut-elle être surestimé?
L’
Hct peut être surestimé si le VGM est surestimé
• Échantillon trop vieux
Qu’indique un Hct indirect plus bas?
Indique une sous estimation de ERY ou du VGM
Technique du comptage réticulocytaire
Technique
• 1 goutte de sang + 1 goutte de NBM
• Après 15 min, faire un frottis sanguin
• Évaluer le % de réticulocytes sur 400 500 GR puis calculer leur nombre en valeur absolue.
• Chien: dénombrer agrégés et ponctués ensemble
• Chat: dénombrer seulement les agrégés
Quand y a-t-il une sur ou sous-estimation du comptage leucocytaire?
- Présence de globules rouges nucléés
- Présence de corps de Heinz
- Présence d’amas plaquettaires
- Lyse incomplète des globules rouges
- Lipémie
Particularité du différentiel automatisé pour la détermination du leucogramme?
- Différentiel en 3 ou 5 parties
* Toujours incomplet si présence d’un virage à gauche
Particularité du différentiel manuel pour la détermination du leucogramme?
• Effectué au microscope sur un frottis sanguin
coloré
• Dénombrement sur 100 ou 200 cellules
Critères pour effectuer un différentiel leucocytaire manuel
- Présence de globules rouges nucléés.
- Présence de neutrophiles immatures.
- Présence de cellules atypiques non identifiées.
- Présence d’une neutropénie, éosinophilie ou d’une forte leucocytose.
- Une mauvaise séparation des populations cellulaires notées à l’examen des graphiques, l’affichage de «flags».
- Bilan d’extension pour une tumeur lymphoïde.
Utilité de la détermination du fibrinogène?
- Fibrinogène : impliqué dans l’hémostase et la guérison tissulaire
- Meilleur indicateur d’inflammation que le comptage leucocytaire dans certaines situations
À quoi peut être due une augmentation du fibrinogène?
- inflammation/stress
- hémoconcentration
Interprétation de la mesure de fibrinogène chez les Bo et Eq?
Bo : fibrinogène 2 5 g/L ratio PP:F >15: déshydratation <10: inflammation Eq : fibrinogène 2 3 g/L ratio PP:F >20: déshydratation <15: inflammation
Quelles lignées cellulaires doivent être examinées lors d’un frottis sanguin?
- Les plaquettes
- Les érythrocytes
- Les leucocytes
Comment se fait la validation du comptage plaquettaire?
- Présence d’amas? distribution uniforme?
2. Estimation du comptage au frottis (/champs)
3 étapes de l’évaluation des érythrocytes?
- Distribution des GR (rouleaux, agglutination)
- Modification de couleur (polychromasie, hypochromie)
- Modification de formes (microcyte, macrocyte)
Qu’indique la présence de microcyte ou macrocyte?
- microcytes (VGM bas): anémie par déficience en
fer, poïkilocytose - macrocytes (VGM haut)
• En présence d’anémie et de de polychromatophilie : indique une anémie régénérative
• en absence d’anémie ou lors d’anémie non rég .: Chez le chat, penser au FeLV
Que peuvent indiquer ces différentes morphologies lors d’anémie?
- sphérocytes
- corps de Heinz
- eccentrocytes
- microcytes + hypochromie
- fragmentation érythrocytaire
- parasite érythrocytaire
- sphérocytes : AHMI
- corps de Heinz : dommages oxydatifs
- eccentrocytes : dommages oxydatifs causant fusion membranaire repoussant cytoplasme
- microcytes+hypochromie : déficience en Fe
- fragmentation érythrocytaire: CIVD
- parasite érythrocytaire: hémolyse
Quand est-ce que les corps de Heinz peuvent être observés?
• Observés lors d’anémie hémolytique causée par dommages oxydatifs • Parfois sans anémie, surtout chez le chat: Propofol , diabète mellitus , hyperT4, , IR, lymphome
Quels sont les causes de présence d’acantocytes?
- Maladies hépatiques : lipidose, cholango-hépatite, shunt
- Glomérulonéphrite
- Fragmentation érythrocytaire
Pourquoi peut-on observer des échinocytes?
- Habituellement un artefact
* Parfois: effet de l’EDTA, certains néoplasmes, hyponatrémie, hypochlorémie
Quand peut-on observer des ponctuations basophiles?
• Fine ponctuation
basophile correspondant à des agrégats d’ARN ribosomique
• Fréquente chez les bovins lors d’anémie
régénérative
• Observée lors d’intoxication au plomb (classique) en raison de
l’inhibition de pyrimidine 5-nucléotidase
Que doit-on évaluer lors de l’évaluation des leucocytes?
- Présence d’un virage à gauche?
- Présence de changement toxique?
- Présence de cellules atypiques?
Comment peut-on observer un virage à gauche?
Présence de neutrophiles immatures en circulation.
Indique une demande
accrue en neutrophiles associée causée par un foyer inflammatoire
- La MO libère les granulocytes en commençant par les cellules les plus matures: bands –> méta –> myélo …
Comment peut-on observer un changement toxique? code de sévérité?
Neutrophile démontrant des changements cytoplasmiques indiquant une myélopoïèse accélérée et qui sont associés à la présence d’un foyer inflammatoire
1+ = corps de Döhle
2+ = basophilie
3+ = vacuolisation diffuse
4+ = granulation toxique et maturation nucléaire asynchrone
