3 Video Transformación genética Flashcards
Pasos para la desinfección de las semillas
1-Se colocan las semillas en un recipiente con agua estéril, agitando y luego se descarta
2-Se añade alcohol 70% y se agita por 1 minuto
3-Se descarta el alcohol y se añade NaClO 2.5% y se agita por 20 mins
3-Descartar NaClOy lavar las semillas con agua 8 veces
Plaqueamiento (?)
¿Cómo se ponen las semillas en las placas?
Distribuir las semillas peladas y desinfectadas en placas petri con un medio de inducción de callos
Las cajas se cierran con parafilm
¿Cuánto tiempo se incuban las semillas? ¿Se incuban en la luz o oscuridad? ¿T°?
Se incuban en la oscuridad 28°C de 3 a 4 semanas
¿Cómo se inicia la inducción de callos?
Después de 3-4 sem se observa en la región del embrión la formación de callos y unidades embriogénicas; éstos se retiran y se transfieren a un medio de inducción fresco
¿T° y tiempo por el que se cultivan las unidades embriogénicas?
Por 1- días en la oscuridad a 28°C
Cuando se tienen más unidades embriogénicas, ¿qué se hace?
Se escogen las que sean compactas, firmes y resistentes a la presión de la pinza para usarlas como material de la transform
¿Cómo se hace el co-cultivo de callos con A. tumefaciens?
Se colecta todo el cultivo bacteriano de la placa y se transfiere al medio de cult líquido
El medio de cultivo líquido al que se transfiere A. tumefacies está suplementado con…
Mencione su utilidad
acetosiringona, activa los genes responsables de la transferencia de genes de interés para la planta
¿Para qué se realiza el secado de las unidades embriogénicas?
El secado de lasunidades embriogénicas es un puto crítico para prevenir el desarrollo de Agrobacterium en el medio de cultivo
¿Porqué se pasan los callos a un medio con antibiótico?
Son el agente de selección apropiados
¿Cuántos cm deben tener los brotes antes de transferirlos a un tubo de ensayo?
Aproximadamente 2cm de altura.
