VO.1: Celcyclus en kanker

Question 1

Celcyclusduur

Answer 1

Een gemiddelde celcyclusduur van 25 uur
- G1 = 11-14 uur
- S = 8-9 uur
- G2 = 3-5 uur
- M ongeveer 1 uur

Question 2

Paclitaxel

Answer 2

Paclitaxel is een stof die bindt aan tubuline, waardoor microtubuli niet meer kunnen depolymeriseren en cellen dus geen vrij tubuline hebben waarmee nieuwe microtubuli gemaakt kunnen worden

Question 3

Methoden voor bestuderen van cellen in de celcyclus

Answer 3

FACS
Immunokleuring

Question 4

Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)

Answer 4

Celcyclusanalyse door kwantificering van het DNA-gehalte
Cellen in kweek of weefsels zijn asynchroom –> verschillende hoeveelheden DNA

Question 5

Werking FACS

Answer 5

DNA wordt gekleurd door een fluorescent DNA-bindend molecuul: propidium iodide
De cellen worden in een flow cytometer gebracht
Met behulp van een laser wordt de hoeveelheid DNA per cel bepaald

Question 6

Immunokleuring

Answer 6

Voor FACS analyse is het nodig dat de cellen allemaal los van elkaar zijn. Dat is vaak niet mogelijk voor solide tumoren, zoals borsttumoren
Immunokleuring wordt gedaan op coupes van biopten van organen met behulp van antilichamen tegen celcyclus specifieke eiwitten

Question 7

Beschikbare antilichamen

Answer 7

HE kleuring
Phospho-histon H3 kleuring (specifiek voor mitose)
Geminin of cycline A kleuring (specifiek voor S/G2)

Question 8

Effect ioniserende straling

Answer 8

Ioniserende straling zorgt voor dubbelstrengs breuken

Question 9

Tubuline functie

Answer 9

Hechten aan de chromosomen vast