Tolerancia Inmunológica Flashcards
Explique el equilibrio entre mecanismos de tolerancia y de inmunidad
Defina tolerancia inmunológica
- es la ausencia de respuesta inmune a un antígeno en PARTICULAR
- es un antígeno específico (pregunta de prueba dice el profe).
- Se induce a partir de una exposición previa del sujeto a este mismo antígeno.
Compare la tolerancia con la inmunosupresión
- la tolerancia,
- implica reconocimiento de antígenos específicos
- inmunosupresión
- afecta una diversidad de clones distintos, cuya respuesta está deprimida.
Defina tolerógeno
- linfocitos interactúan con el antígeno y no inducir respuesta inmune
- en este caso el antígeno se llama tolerógeno.
La autotolerancia es una propiedad normal que se adquiere en la …
Se produce en fallas de mecanismos a nivel central en los siguientes órganos
Su falla
vida fetal
Médula (LB) y Timo (LT)
resulta en reacciones contra antígenos propios (autóloga)
Explique la teoría de la Selección Clonal, enunciada por MacFarlane Brunet en 1957)
Explque el experimento de Ray D Owens en 1945
- En ganado bovino, observó que en el periodo fetal, gemelos dicigotos que compartían sangre en grado variable y esta misma proporción se mantenía en la adultez.
- Entonces demostraba que estos sujetos eran capaces de mantener estas células sin mayores alteraciones uno respecto del otro, a pesar de ser sujetos completamente diferentes.
- Esto tiene que ver con el fenómeno de tolerancia, pero no acuñó el término. En el año 2014 se destaca su aporte aún cuando no haya definido el concepto.
Explque el experimento de Milan Hasek en 1944
- unió dos embriones de pollo fecundados (genéticamente diferentes) a través de un puente de tejido blastodérmico por 12 días, lo que permitió el intercambio sanguíneo entre los embriones.
- Después observó una inmunización cruzada de la sangre de ellos y encontró que cada sujeto no generaba anticuerpos contra los eritrocitos del compañero, pero sí podían hacerlo contra eritrocitos de otros pollos no relacionados.
Explique el experimento de Medawar en 1950
LA tolerancia puede ser
- central: en órganos linfoides primarios.
- periférica: órganos linfoides secundarios.
Describa los 3 mecanismos de tolerancia central
- Existen mecanismos de lesión clonal
- ocurren por apoptosis
- el mecanismo es de deleción clonal (aunque la imagen destaca apoptosis).
- Sólo en el caso de los LBt
- anergia a nivel central y de recambio del receptor, pero SÓLO en LB.
- Desarrollo de LT reguladores, que se desarrollan en el timo, pero que su acción es en la periferia.
Describa los 3 mecanismos de tolerancia Periferica
- Deleción clonal
- en LB y LT
- Anergia
- Supresión por linfocitos T reguladores
Explique la tolerancia central en linfocitos B y indique sus 3 principales mecanismos
En resumen los mecanismos de tolerancia central en LB:
- Lesión clonal (por apoptosis)
- Edición del receptor BCR
- Anergia
Explque el mecanismo de edición del BCR
- Se genera la cadena oesada en LB
- Cadena mu (IgM) se expresa en superficie junto a cadena liviana
- Celula prolifera
- reorganiza exones de cadena liviana
- Expresa cadena liviana
- BCR enfrenta a antigenos propios
- Si hay mucha afinidad: se reordenan exones de cadena liviana del alelo siguiente (siempre se reordena la cadena kappa en un alelo materno o paterno
- Si no funciona, le queda la cadena lamda
- Tiene 4 posibilidades
Esto ocurre solo a nivel central en la medula osea y en el LB
Explique lo que es la anergia y ejemplifique con un experimento
anergia es que la célula está viva, pero no produce el anticuerpo respectivo porque el antígeno está presente desde el periodo fetal (y el antígeno es visto como propio).
En relación a la tolerancia periférica de Linfocitos B, las células maduras que se unen a antigenos propios sufren de tres mecanismos. Estos son
Explique la regulación por anergia en la tolerancia periferica de LB
- LB auto-reactivos son repetidamente estimulados por auto-antigénos
- se hacen anérgicos: quedan hiporrespondedores o inactivos para tal antígeno
- Los LB anérgicos requieren elevados niveles de BAFF (B-cell activating factor), llamado también BLys (B lymphocyte stimulator) para sobrevivir
- no pueden competir con LB naive normales por BAFF.
- Los linfocitos normales (los que no son anérgicos) les ganan la competencia por el BAFF a los linfocitos anérgicos.
- los linfocitos B anérgicos comienzan a morir por apoptosis.
Explique la regulación por receptores inhibitorios en la tolerancia periferica de LB
ITIM son tirosinas que mandan señales inhibitorias
- BCR activa ITAM
- Se produce Activación PLC, increenta el Ca por PIP3
- IgG se une a través de su Fc a FcGammaRIIB
- FcGammaRIIB es fosforilado por quinasas Src
- Recluta SHIP (fosfatasa)
- Desfosforila a PIP3, inactivandolo (PIP2)
- Bloqueo señal activadora al aumento niveles de Ca
regulación por receptores inhibitorios es un mecanismo de inducción a tolerancia, pero es un mecanismo de retroalimentación …, y esto ocurre a…
negativa
nivel periférico.
¿Por qué las vacunas no se ponen de inmediato en wawas?
- IgG tienen la capacidad de traspasar la placenta activamente, de manera que llegan al feto.
- El feto recién nacido tiene los anticuerpos de la mamá, entonces si uno prematuramente vacuna a un recién nacido con un agresor, lo que va a ocurrir es el mecanismo anteriormente descrito
- va a formar complejo inmune con los anticuerpos maternos y se va a generar inhibición de este tipo
Explique la Regulación por receptor inhibitorio CD22/Siglec-2
- CD22 al tener motivos ITIM, también van a lograr reclutar a SHIP, pero en este caso es específicamente a SHIP-1.
Ratones con defectos en SHIP-1 o Lyn, sufren autoinmunidad severa.
Describa los dos mecanismos utilizados en la tolerancia central de linfocitos T
- Deleción clonal (apoptosis)
- Regulación de LT naturales (Treg): CD4+, CD25+ y FOXP3+ (se produce a nivel central, en el timo, pero su actuar es a nivel periférico)
esto ocurre en el timom donde se expresa TCR
Explique el mecanismo de deleción clonal
- Los TCR surgen por recombinación de los exones que codifican para la cadena beta del TCR tipo alfa-beta.
- expresan la cadena beta
- se expresa la cadena alfa transitoria
- se recombinan los exones de la cadena alfa para expresar la cadena alfa definitiva
- Se expresa el TCR, doble positivo: CD8+ y CD4+, además de CD3+ (que transduce la señal hacia el interior)
- Inicia la presentación de antigenos propios, dejando solo a las celulas con baja afinidad por estructuras propias
Explique el proceso mediante se eligen que LT son exportados a la periferia
Explique el rol de la cadena beta TCR y la alfa en la deleción clonal
Explique la selección positiva de los linfocitos T
- Negativas para todos los marcadores
- Se expresa cadena alfa y beta
- CD4+ y CD8+
- Linfocitos interactúan con celulas epteliales timicas de la zona cortical
- Células epiteliales
- muestran la identidd
- Muestran MHC (propio)
- Selección positiva
- salvar células que reconocen nuestro MHV
- Células que reconocen CD4 apagn CD8 y vicevrsa (monopositivas)
Explique la selección negativa de los linfocitos T
- En la médula, donde la interacción es entre células epiteliales medulares (contienen un regulador autoinmunitario, AIRE) y dendríticas,
- Estas células expresan en su MHC moléculas propias (todas nuestra constitución química).
- Aquellos linfocitos T que reconocen con mucha afinidad estas moléculas serán eliminadas por DELECIÓN CLONAL, y salen a la periferia las que tienen afinidad baja.
- Las que tengan afinidad intermedia generan los T-reguladores naturales (FOXP3+, CD4+ y CD25+).
Describa la ubicación de los precursores de LT en el timo
Describa la función de AIRE en la expresión de Ags restringidos a tejidos en células epiteliales timicas medulares.
- AIRE es parte del complejo que regula la expresión de Ags restringidos a tejidos (TRA) en las células epiteliales tímicas medulares (MTEC).
- Los péptidos de estos Ags los muestran las MTEC y son reconocidos por LT inmaduros específicos al Ag,
- llevando a la eliminación de los LT autorreactivos.
- AIRE permite que las MTEC puedan transcribir prácticamente todo el genoma independiente de la diferenciación
Sin AIRE funcional, se originan enfermedades de tipo
autoinmunes multiórganicas
Las células dendríticas si poseen la capacidad de presentar antígenos en el timo. Sin embargo, no expresan AIRE. ¿Cómo lo hacen sin AIRE?
Las células epiteliales medulares transfieren lo que expresan mediante uniones intercelulares a la célula dendrítica.
Existen tejidos conocidos como sitios de privilegio inmune es decir, no son presentados por AIREs. Debido a esto existirán en circulación células autorreactivas contra estos tejidos. Estos tejidos son
(SNC, retina, testis, ovarios),
Cuando existe AIRE no se produce autoinmunidad, pero una deficiencia de AIRE genera…
la liberación de células autorreactivas a la periferia
Por qué el desarrollo de autoinmunidad en el cerebro responde a otros mecanismos, y no por su privilegio inmune?
El cerebro es un sitio con privilegio inmune, sin embargo se sabe que hay circulación de células inmunes hacia la BHE, que no es hermética para estas células, permitiendo su circulación.
Explique el mecanismo de la oftalmia simpatica
- Si se produce un trauma ocular, se liberan antígenos y se produce una respuesta inmune.
- Dado que las células autorreactivas para estos tejidos no fueron eliminadas atacan el tejido del ojo dañado y sin dañar.
- AIRE permite la eliminación de linfocitos T en el timo.
- Sin AIRE funcional, los LT autorreactivos circulan y alcanzan a los TRAs llevando a enfermedad
Explique el Desarrollo de Linfocitos T Reguladores Naturales (Treg)
- Tregs CD25+ y FoxP3+ se generan por reconocimiento con afinidad intermedia de TRAs propios en el timo.
- El desarrollo y la supervivencia de Tregs requiere IL-2 y FoxP3.
- Su función la ejercen en órganos linfoides secundarios y tejidos periféricos
- . Pueden interferir
- la presentación antigénica
- la activación de las células T
- en la acción de células efectoras en la periferia
Los linfocitos Treg naturales o tímicos son un linaje de …que suprimen RI y mantienen la auto-tolerancia
LT CD4+
Treg expresan altos niveles de la cadena alfa del…, del factor de transcripción forkhead FoxP3 y de CTLA-4, siendo su fenotipo CD4+ FoxP3+ CD25 high (gran cantidad de este último).
CD25, FoxP3 y CTLA-4 son esenciales para su funcionalidad, así como la disponibilidad de IL-2 como factor de crecimiento….será fundamental para la proliferación de la mayoría de las células del sistema inmune.
IL-2R (CD25)
IL-2
El sindrome IPEX y la ausencia de Treg CD25+ se relacionan con mutaciones en
gen FOXP3 humano
Explique los mecanismos de acción de los Tregs
- Reducir capacidad de APCs para activar a LT naive o generación de APCs tolerogénicas
- CTLA4 es una molécula expresada por el Treg
- genera inhibición y compite por los coestimuladores, impidiendo que estos últimos se unan a otra célula.
- LAG3
- se une a MHC II inhabilitando a la APC para que presente antígenos.
- CTLA4 es una molécula expresada por el Treg
- Citólisis directa por perforinas y granzimas
- Consumo de IL-2 requeridas para la sobrevida de LT efectores, (-) diferenciación y proliferación.
- Recordar que los receptores de IL-2 de Treg tiene mayor afinidad que el de otras células
- Producción de citoquinas IL-10 y TGF-β1 anti-inflamatorias.
- IL-10 inhibe la activación de LT y termina RI celulares.
Cuales son los mecanismos de la Tolerancia Periférica de LT
- Anergia o Hipo-respuesta
- no hay coestimulación (CD28 del LT no liga nada)
- la célula se hace alérgica, pero no muere.
- Supresión por Linfocitos Treg
- directamente o por secreción de citoquinas.
- Deleción Clonal
- eliminación de LT en la periferia, inducido por la CD que tiene poca coestimulación.
Explique la anergia en linfocitos T
- De manera normal hay 2 señales
- el contacto del TCR con el antígeno
- coestimulación (CD28+B7), permitiendo la activación y proliferación de LT-
- En energía sólo existe la primera señal
- por ausencia o muy baja presencia de coestimuladores en la APC, generando el bloqueo del LT y su conversión a una célula anérgica.
- Otra opción es a través de CTLA4,
- Se une a los coestimuladores con mucha más afinidad que CD28.
- En un inicio, el LT posee en su superficie mucha mayor cantidad de CD28, pero con el tiempo, posterior a su actuar, este disminuye, y comienza a aumentar la expresión de CTLA4, permitiendo acallar la respuesta inmune.
- CTLA 4 produce una señal negativa en el linfocito
- posee en su dominio citoplasmático ITIM,
- que recluta fosfatasa e inactiva al linfocito o queda anérgico.
- posee en su dominio citoplasmático ITIM,
- Otros reguladores negativos
- PD-1, cuyo ligando es PDL-1 (ubicado en la superficie de las APC)
- Tim-3 (ligando controversial).
Explique la acción de CTLA4 en la anergia en linfocitos T
- Mecanismo Celular Intrínseco
- Luego de la activación del LT, se expresa CTLA-4,
- compite con CD28 por B7, activando fosfatasa, que desfosforila moléculas transmisoras de señales asociadas a TCR y CD28 y así termina las respuestas.
- Luego de la activación del LT, se expresa CTLA-4,
- Mecanismo Celular Extrínsico
- Treg expresan TCR específicos para el antígeno
- Altos niveles de CTLA-4,
- se une al coestimulador (B7), evitando que el LT se active ya que no tiene la señal del coestimuladora.
- Se usa para prevenir la activación de células potenciales respondedoras.
Explique el rol de B7 en la endocitosis de CTLA-4
- El tallo citoplasmático de CTLA-4 contiene un motivo que lo conecta a clatrina, una proteína involucrada en la endocitosis mediada por receptores
- Al unirse a B7 en APCs lo remueve e ingiere a estas moléculas como complejo (CTLA4 + B7).
CTLA-4 expresado en…, compite con CD28 y reduce cantidad de B7 disponible en APCs para proveer coestimulación vía CD28.
LT activados y en Treg
CTLA-4 limita la activación dependiente de coestimulación inicial de los LT en…
órganos linfoides secundarios
Polimorfismos en el gen de CTLA4 se asocia con varias enfermedades autoinmunes humanas, incluyendo…
DM1 y enfermedad de Graves.
Explique la acción de PD-1
- PD-1 se expresa en LT activados antigénicamente
- posee 2 ligandos
- PD-L1
- expresado en APCs y en muchas otras células
- PD-L2
- expresado principalmente en APCs.
- PD-L1
- posee 2 ligandos
- La unión de PD-1 a cualquiera de sus ligandos, lleva al reclutamiento de fosfatasas de su tallo citoplasmático
- cortan las señales de activación mediadas por quinasas
- inhiben las señales del TCR y de CD28, llevando a inactivación de LT.
Ratones knockout para PD-1 desarrollan enfermedades autoinmunes menos severas que en knockout para CTLA-4. (v o f)
V
Compare las acciones de CTLA-4 y PD-1
Explique la función de los iTregs
- son linfocitos Treg inducidos
- en la periferia por mecanismos que son parecidos a los que se han descubierto en el laboratorio.
- Se puede inducir en el laboratorio o en los organismos en forma periférica.
- Los Tregs NO se pueden diferenciar de los iTREGS
- a pesar de que algunos dicen que a través de la medición de la expresión de un factor transcripción IKAR (no estoy seguro si se escribe asi) dicen que se puede, pero no es fácil diferenciarlo.
- Los iTreg se inducen a partir de
- linfocitos T CD4 vírgenes o naive en órganos linfoides secundarios en ausencia de potentes señales de inmunidad innata
- luego de procesos inflamatorios.
- Se pueden inducir para
- antígenos propios
- exógenos.
- In vitro se pueden inducir la generación de los iTreg en presencia del estímulo antigénico,
- es decir, TCR (el cual tiene que ser activado con el ligando o con un anticuerpo),
- TGF-b e IL-2. TGB-B lo que hace es estimular la expresión de FoxP3, esencial para el desarrollo del linaje Treg.
Además del linaje de LT CD4+, que otros linajes existen para los iTREGS
- los linfocitos reguladores tipo 1 (Tr1) y Th3 que actúan por secreción de citoquinas inmunosupresoras
- IL-10
- TGF-B1.
- Tr1 producen IL-10
- se inducen in-vitro a partir de células T CD4 vírgenes o naive que interactúan con células dendríticas tolerogénicas (DC-10), que producen altos niveles de IL-10
- Está es la forma en la que se producen principalmente. Estas células dendríticas también pueden expresar altos niveles de HLA-G, pero principalmente IL-10.
- los Th3 producen
- TGF-B1.
Compare las celulas dendriticas toleronergicas con las inmunogenicas
Compare la inmunogenicidad con la tolerancia
En relación a la susceptabilidad genética de la perdida de tolerancia, comente las alteraciones moleculares que generan inmunidad
Explique la relación entre genes ambiente y perdida de tolerancia
Explique la relación entre agentes infecciosos e inmunidad
Cuente los agentes virales relacionados con enfermedades autoinmunes
