Testy immunologiczne

Question 1

czym jest precypitat? jak powstaje?

Answer 1

laczenie sie rozpusczalnego antygenu z rozpuszczalnym przecwicialem - tworzy sie nierozpuszczalny kompleks. Precypitat jest zmetnieniem skladajacym sie z wielu kompleksow polaczanych w siec.

Question 2

jakie antygeny moga tworzyc precypitaty?

Answer 2

• wielowartosciowe
• o masie 40-140 kDa
• rozpuszczalne

Question 3

dwuwartosciowosc monogamiczna

Answer 3

laczenie sie dwoch miejsc wiazacych antygen z dwoma determinantami tego samego antygenu, co uniemozliwia wytworzenie sieci i precypitatu

Question 4

warunki wytworzenia precypitatu

Answer 4

• duze stezenie reagentow, a w szczegolnosci ich rownowaga
• ph 6,4- 8,5
• temperatura dla ludzkich ok.37
• stezenie molowe NaCl 0,15
• uklad dopelniacza- koniecznosc inaktywacji, bo moze doprowadzic do zwiekszeia rozpuszczalnosci
• czas ( kompleks powstaje szybko, precypitat- kilka godzin)

Question 5

podzial metod precypitacyjnych

Answer 5

• w plynnym, stalym

- jakosciowe, ilosciowe

Question 6

test w srodowisku plynnym

Answer 6

• szkielkowy- jakosciow- identyfikacja szczepow bakterii
• klaczkujacy- VDRL test na kile- odczyn flokulacyjny
• pierscieniowy- jakosciowy- m. sadowa, pochodzenie plam krwi

Question 7

test w srodowisku stalym

Answer 7

• pojedyncza dyfuzja plykowa ( radialna)- test ilosciowy
• podwojna immunodyfuzja plytkowa- test jakosciowy i polilosviowy- pokrewienstwo bialek- wspolne, rozne lub identyczne determinanty

Question 8

Pojedyncza immunodyfuzja plytkowa

Answer 8

przeciwciala uwiezione w zelu agarozowym, anytgeny ruchome. sprawdzenie po 24 h

Question 9

Immunoelektroforeza

Answer 9

laczy elektroforeze w zelu agarozowym z dyfuzja podwojna. 
Zastosowanie:
- ocena frakcji bialkowych
- rozpoznawanie gammapatii
- -II- niedoborow immunologicznych

Question 10

Immunoelektroforeza schreidegera - zastosowamie

Answer 10

nieprawidlowoscie bialek- szpiczak mnogi, ammapatie, niedobory immunologiczne, bialka bence-jonesa

Question 11

rodzaje immunoelektroforezy

Answer 11

• schreidegera
• rakietkowa
• krzyzowa

Question 12

zasada dzialania immunoelektroforezy rakietkowej

Answer 12

przy stalym stezeniu ig w podlozu, jej migracja jest wprost proporcjonalna do stezenia

Question 13

immunoelektroforeza krzyzowa

Answer 13

sluzy do wykrywania antygenu o barzdo niewielkim stezeniu, np hormonow, AFP alfa-fetoproteiny, CEA bialka kacynogennego embrionalnego

Question 14

czym jest aglutynogen

Answer 14

element upostaciowiony- np. komorka na ktorej pojawia sie antygen, np bakterie, grzyby, erytrocyty, leukocyty, lateks, polistyren

Question 15

warunki zajscia aglutynacji

Answer 15

• ph 6,8- 7,2
• temperatura: dla zimnych- 4-22 IgM, ok 37 cieple
• sila jonowa- im wyzsza tym lepiej sie lacza
• czas- 15-60 min

Question 16

podzial aglutynacji

Answer 16

• posrednia

- bezposrednia

Question 17

odczyn lateksowy

Answer 17

do wykrywania przecwcial rozpuszcalnych. na lateksie znajduja sie antygeny, do ktorych przyczepiaja sie przeciwciala towrzac siec.
do wykrywania ASO-zakazenie paciorkowcem lub RZS
odwrotny test aglutynacji- test ciazowy: lateks z przeciwdzialem + antygen

Question 18

odczyn hemaglutynacyjny

Answer 18

1) proba krzyzowa i grupy krwi
2) miano w zakazeniach
miano- najwyzsze rozcienczenie surowicy-najmnijesze stezenie ig ktore wywola aglutynacje

Question 19

co sprawdza proba krzyzowa

Answer 19

zgidnosc ab0 oraz rh

Question 20

metody znakowania

Answer 20

• radioimmunologiczne
• enzymatyczne
• fluorymetryczne

Question 21

immunofluorescencja

Answer 21

znaczniki w wyniku pobudzenia emituja odpowiednie swiatlo
jednym z najczesciej stosowanych barwnikow jest FITC( izotiocyjanian fluoresceiny)- swiatlo zielone
1)posrednia
2) bezposrednia

Question 22

immunofluorescencja bezposrednia

Answer 22

wykrywanie bakterii w materiale pobranym od pacjenta

Question 23

immunofluorescencja posrednia

Answer 23

ykrywanie immunoglobulin w tkankach, np. w chorobie schonleina henocha, czyli plamicy alergicznej, ktora jest choroba autoimmunologiczna prowadzaca do zapalenia naczyn wlosowatych oporzez odladanie IgA

Question 24

metody radioizotopowe

Answer 24

izotopy lacza sie z jednym ze skladnikow ag-ab. wykorzystuje sie glownie jod 125 i jod 131
rast- do wykrywania igE anty badany alergen gdy niemzlowi test skorny
rist- do wykrywania calkowitego igE w surowciy

Question 25

elisa zastosowanie

Answer 25

• bakterie- helicobacter pylori, kila
• autoimmunologiczne- rzs, zapalenie watroby
• choroby wirusowe- wzw, hiv
• nowotwory
• stezenie hormonow
• celiaklia ( przeciwciala przeciwko transglutaminazie)

Question 26

analiza western blot

Answer 26

polaczenie immunoelektroforezy ze znakowaniem

pozwala na wykryie niemal kazdego antygenu w mieszaninie bialek

Question 27

test ciazowy charakterystyka

Answer 27

• test immunoenzymatyczny

- wykorzystuje przeciwciala przeciwko lancuchowi beta gonadrotropiny kosmowkowej

Question 28

kolejne etapy testu ciazowego

Answer 28

1. przeciwciala A niezwiazane z nitroceluloza wiazace hormon obecny w probce
2. przeciwciala b zwiazene swoiste, wiaza kompleks a-gonadotropina
3. przeciwciala c zwiazane, wiaza niezwiazana gonadotropine