Tema 8 - Genes de las inmunoglobulinas

Question 1

Generación de la diversidad de las inmunoglobulinas y TCR - en general

Answer 1

• hay más que 10^11 variantes de microorganismos
• genoma humano solo tiene 25.000 genes
• > recombinación del DNA somatico
• solo en células B y T

Question 2

Organización de los genes de las Igs

Answer 2

• hay segmentos:
  VL: V, J
  VH: V, D, J
• de cada segmento hay multíples copias diferentes
• 3 grupos de cadenas son localizados en cromosomas diferentes: pesada en 14, ligera kappa en 2, ligera lambda en 22
  -> en total 3,4*10^6 variantes possibles por combinacion de los segmentos y cadenas
  (-> no explica toda la diversidad)

Question 3

Secuencias señales de recombinacion

Answer 3

• cada segmento V/D/J esta separado uno de otro por secuencias flangueantes (flankierend)
• se llaman RSS
• no son codificantes
• garantizan el reordenamiento correcto
• 3 partes:
• • heptámero con secuencia fija
• • espaciador: 12 o 23 bp, varian en secuencia
• • nonámero con secuencia fija

Question 4

Recombinacion somatica: mecanismo

Answer 4

• reordenamiento de los segmentos génicos V/D/J
• RSS: nonámeros/heptámeros con espaciador 12 son complementarias a los con espaciador de 23 (bolsa en el ADN)
• las secuencias RSS de los segmentos elegidos se unen formando un lazo -> delección del ADN entre ellos (si fragmentos so en direcciones diferentes)
• en pocas ocasiones son en la misma direccion -> ADN forma una espiral

Question 5

Etapas enzimáticas en el reordenamiento de los segmentos

Answer 5

• enzimas específicas: productos de genes RAG (RAG1 y 2), TDT (desoxinucleotidil terminal transferasa)
• complejos de proteínas RAG se unen a las RSS de los fragmentos
• > 2 complejos se unen, ADN forma un lazo, segmentos son próximos
• RAGs tienen actividad endonucleasa -> cortan el ADN -> horquillas en los extremos codificantes
• > fines se unen -> segmentos al lado del otro

Question 6

Mecanismos adicionales de generación de diversidad (N, P)

Answer 6

• horquilla producido por RAG (al azar pero cerca del fragmento)
• Artemisa rotura la horquilla, genera nucleotidos P (palíndromos) (2-4 b)
• al fines des los palíndromos: TdT añade nucleotidos al azar
• apareamiento de las hembras
• nucleótidos no complementarios son eliminados por exonucleasa
• rellenar huecos (loecher auffuellen)
• -> region codificante corto entre los segmentos

-> más diversidad: 10^11, puede resultar en cambio del marco de lectura (Frameshift)

Question 7

Exclusión alélica

Answer 7

• siempre haz 2 alelos/cromosomas para cada cadena

- cuando se reordena un cromosomo, el otro no!

Question 8

Desarrollo do la especificidad - proceso

Answer 8

1. cél pro-B temprana: reordenamiento del gen cadena H (D-J en ambos cromosomas)
2. cél pro-B tardía: reordenamiento cadena H (V-DJ en primer cromosoma, si unión no productiva - 2. cromosoma)
3. cél pre-B: reordenamiento gen cadena L (reordenamientos: kappa 1.cr -> si no: kappa 2.cr -> si no: lambda 1.cr -> si no: lambda 2.cr)
4. cél B inmadura: cesar del reordenamiento: célula con my:kappa o my:lambda