Técnicas análisis Flashcards
1
Q
Técnica microscópica
A
- Fijación: Muestra estabilizada con sustancias para endurecer estructuras. Provoca muerte celular
- Cortes: Muestra solidifica en parafina y cortada con micro/cryotomo
- Tinción: Cortes teñios con colorantes específicos
2
Q
Microscopía óptica
A
- Visualización de objetos más grandes que la longitud de onda de luz
3
Q
Microscopio campo luminoso
A
- Tradicional
- Luz atraviesa muestra
4
Q
Microscopía de contraste de fases
A
- Células vivas
5
Q
Microscopio de polariazación
A
- Emite luz polarizada
- Actividad óptica (materia cristalina)
6
Q
Microscopio de fluorescencia
A
- Células fluorescentes o con fluorocromos
- Captan energía de una longitud de onda y la reflejan a una longitud de onda mayor
- Aplicaciones:
· Conocer localización ADN o ARN con determinadas secuencias de nucleótidos
· Inmunofluorescencia: Marcar proteínas con fluorocromo para visualizar su posición
7
Q
Microscopio confocal
A
- Fluorescencia
- Imágenes tridimensionales (sistema de barrido)
- Imagen colorizada digitalmente
8
Q
Microscopio electrónico
A
- Electrones emitidos en un vacio para obtener imágnes de objetos muy pequeños (1-2 nm)
9
Q
Microscopio electrónico de transmisión (MET)
A
- Muestra obtenida con ultramicrtomo con cuchillas de diamante/vidrio
- Electrones atraviesan muestra y se proyectan sobre una pantalla fluorescente
- Sales de metales pesados depositadas en estructuras celulares, impidiendo paso de electrones
- Imágenes en blanco y negro
10
Q
Microscopio electrónico de barrido (MEB)
A
- Haz de elctrones no atraviesa muestra, barre superficie y se refleja sobre ella
- Electrones reflejdos son recogidos en una pantalla y producen imágnes tridimensionales
- Muestra cubierta con capa metálica para que se reflejen los electrones
11
Q
Microscopio de sonda de barrido (SPM)
A
- Sonda puntiguada muy fina escanea la superficie de la muestra a una distancia muy corta (1nm)
- Interacciones entre sonda y muestra se detectan
- Imagen en 3D
12
Q
Microscopio de efecto túnel (STM)
A
- Tipo de microscopio de sonda de barrido
- Imágenes superficies sólidas a nivel atómico
13
Q
Microscopio de fuerza atómica
A
- Tipo de microscopio de sonda de barrido
- Interacciones electromagnéticas en la sonda se detectan
- Muestras biológicas (virus, ADN, proteínas, membranas)
14
Q
Homogenización
A
- Separar células, romper estructura celular y liberar orgánulos
- Técnicas:
· Choque osmótico: Células en una disolución hipotónica, procova turgescencia y rotura de la membrana plasmática
· Sonicación: Ultrasonidos
· Lisozima: Desestabilización bicapa lipídica, originan orificios en la membrana plasmática y rompen la célula con agentes químicos
· Homogenizador Potter: Aplasta células
· Homogenizador de aspas: Triturar muestra
15
Q
Centrifugación
A
- Separación de los componentes de una mezcla homogeneizada en distintas fracciones, dependiendo de su forma y densidad
- Tubo colocado en centrifugadora hacia fuera