Técnicas análisis Flashcards

1
Q

Técnica microscópica

A
  • Fijación: Muestra estabilizada con sustancias para endurecer estructuras. Provoca muerte celular
  • Cortes: Muestra solidifica en parafina y cortada con micro/cryotomo
  • Tinción: Cortes teñios con colorantes específicos
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2
Q

Microscopía óptica

A
  • Visualización de objetos más grandes que la longitud de onda de luz
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3
Q

Microscopio campo luminoso

A
  • Tradicional
  • Luz atraviesa muestra
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4
Q

Microscopía de contraste de fases

A
  • Células vivas
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5
Q

Microscopio de polariazación

A
  • Emite luz polarizada
  • Actividad óptica (materia cristalina)
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6
Q

Microscopio de fluorescencia

A
  • Células fluorescentes o con fluorocromos
  • Captan energía de una longitud de onda y la reflejan a una longitud de onda mayor
  • Aplicaciones:
    · Conocer localización ADN o ARN con determinadas secuencias de nucleótidos
    · Inmunofluorescencia: Marcar proteínas con fluorocromo para visualizar su posición
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7
Q

Microscopio confocal

A
  • Fluorescencia
  • Imágenes tridimensionales (sistema de barrido)
  • Imagen colorizada digitalmente
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8
Q

Microscopio electrónico

A
  • Electrones emitidos en un vacio para obtener imágnes de objetos muy pequeños (1-2 nm)
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9
Q

Microscopio electrónico de transmisión (MET)

A
  • Muestra obtenida con ultramicrtomo con cuchillas de diamante/vidrio
  • Electrones atraviesan muestra y se proyectan sobre una pantalla fluorescente
  • Sales de metales pesados depositadas en estructuras celulares, impidiendo paso de electrones
  • Imágenes en blanco y negro
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10
Q

Microscopio electrónico de barrido (MEB)

A
  • Haz de elctrones no atraviesa muestra, barre superficie y se refleja sobre ella
  • Electrones reflejdos son recogidos en una pantalla y producen imágnes tridimensionales
  • Muestra cubierta con capa metálica para que se reflejen los electrones
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11
Q

Microscopio de sonda de barrido (SPM)

A
  • Sonda puntiguada muy fina escanea la superficie de la muestra a una distancia muy corta (1nm)
  • Interacciones entre sonda y muestra se detectan
  • Imagen en 3D
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12
Q

Microscopio de efecto túnel (STM)

A
  • Tipo de microscopio de sonda de barrido
  • Imágenes superficies sólidas a nivel atómico
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13
Q

Microscopio de fuerza atómica

A
  • Tipo de microscopio de sonda de barrido
  • Interacciones electromagnéticas en la sonda se detectan
  • Muestras biológicas (virus, ADN, proteínas, membranas)
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14
Q

Homogenización

A
  • Separar células, romper estructura celular y liberar orgánulos
  • Técnicas:
    · Choque osmótico: Células en una disolución hipotónica, procova turgescencia y rotura de la membrana plasmática
    · Sonicación: Ultrasonidos
    · Lisozima: Desestabilización bicapa lipídica, originan orificios en la membrana plasmática y rompen la célula con agentes químicos
    · Homogenizador Potter: Aplasta células
    · Homogenizador de aspas: Triturar muestra
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15
Q

Centrifugación

A
  • Separación de los componentes de una mezcla homogeneizada en distintas fracciones, dependiendo de su forma y densidad
  • Tubo colocado en centrifugadora hacia fuera
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16
Q

Ultracentrifugación

A
  • Separación orgánulos y estructuras celulares
17
Q

Radioisótopos

A
  • Observar atividad biosintética celular
18
Q

Cultivo celular

A
  • Mantener vivas células aisladas en medio artificial
  • Medio de cultivo incluye todos los nutrientes esenciales (agar agar)
  • Tipos:
    · Masa: Elevado número de células se divide hasta llegar a formar una capa continua de células
    · Clonicos: Pequeño número de células que se dividen formando colonias