Semaine 4: Spectrophotémétrie Flashcards

1
Q

Qu’est ce que la spectrophotométrie?

A

Méthode analytique qui consiste à mesurer l’absorbance d’une substance pour déterminer sa concentration

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Lors de la spectro, un flux _ de lumière traverse la _. Le spectro mesure le flux _ de lumière

A

incident, solution, émergent

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Quels sont les deux types d’analyse que permet la spectro?

A

Quantitative et qualitative

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Quelles sont les analyses quantitatives possibles avec la spectro?

A

Dosage d’une substance
Suivi des réactions chimiques

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Quelles sont les analyses qualitatives possibles avec la spectro?

A

Identification des composés
Indicateur de pureté des solutions

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Les UV comprennent des rayonnements dont la longueur d’onde varie entre _

A

100 nm et 388 nm

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Qu’est ce que la longueur d’onde?

A

distance entre deux pics
d’onde

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Qu’est ce que l’absorption?

A

lorsqu’un atome ou une molécule, après avoir été exposé à un rayonnement, absorbe une partie de l’énergie de celui-ci.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Qu’est ce que le spectre d’absorption?

A

Représentation graphique de l’absorbance d’un composé donné en fonction de la longueur d’onde λ.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Le spectre d’absorption permet donc l’analyse _ du composé

A

qualitative

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Qu’est ce que le pic d’absorption?

A

longueur(s) d’onde λ pour laquelle/lesquelles on
observe un maximum d’absorption

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Qu’est ce qu’un chromophore?

A

groupe d’atomes qui absorbe des radiations du visible

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

L’absorption sélective dépend de quoi?

A

la structure chimique de chaque molécule

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Les molécules qui absorbent le visible et l’UV contiennent des __

A

Liaisons insaturées

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Quelles sont les molécules qui contiennent des liaisons insaturées?

A

Liaison carbone-carbone double ou triple
Groupements chimiques spécifiques qui contiennent des doubles liaisons entre cardone/oxygène/azote
Purine et pyrimidine

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Qu’est ce que la transmittance?

A

Mesure de la proportion de lumière qui traverse un corps absorbant

17
Q

Quels sont les deux principes de la loi Beer-Lambert?

A
  1. Quand un faisceau traverse un milieu absorbant, son intensité décroit exponentiellement en fonction de l’augmentation de la concentration du milieu absorbant.
    Plus une solution est concentrée, plus l’intensité de la lumière transmise diminue, plus cette diminution est marquée
  2. Lorsqu’un faisceau traverse un milieu absorbant, son intensité décroit exponentiellement en fonction de la longueur du trajet parcouru.
    Plus le trajet de la lumière est long, plus l’intensité de la lumière transmise diminue
18
Q

Quelle est l’équation de beer-lambert et à quoi correspondent les variables?

A

A = e l c

A = Absorbance
e = coefficient d’absorption
l = longueur du trajet d’optique
c = concentration de la substance en solution

19
Q

Quelle est l’équation pour obtenir la transmittance?

A

T = I/I0
I: émergent
I0: incident

20
Q

Quelle est l’équation de l’A en fonction de la transmittance

A

A = -logT = -log(I/I0)

21
Q

Le coefficient d’absorption est spécifique pour une _ et une _ données.

A

molécule et longueur d’onde

22
Q

Coefficient d’absorption: e

A

Molaire.
Lorsque c = 1M et l = 1cm

23
Q

Coefficient d’absorption E0,1%

A

Lorsque c =0,1% et l=1cm
c = 0,1g/100ml ou 1 mg/ml

24
Q

Coefficient d’absorption E1%

A

Lorsque c 1%
c = 1g/100ml ou 10 mg/ml

25
Quelles sont les conditions de la loi Beer-Lambert
La lumière est monochromatique La solution est homogène Le soluté ne doit pas émettre de fluorescence La conc de la solution ne doit pas être trop élevée
26
Quel serait le maximum de concentration de solution à respecter
ordre de 10^-4
27
Pourquoi on ne peut pas utiliser des grandes concentrations?
Extrapolation, la relation n'est plus linéaire donc ne suit plus la même équation
28
29
Vrai ou faux? Toutes les protéines ont le même coeff d'absorption
Faux
30
Pourquoi on utiliser l'A à 280 nm
En analysant le spectre d'absorption tu tryptophane et de la tyrosine (soit 2/3 des AA aromatiques) on voit un pic d'absorption à cette longueur d'onde
31
une protéine qui contient _ de résidus d’acides aminés aromatiques absorbera une _ portion du rayonnement.
plus, plus grande
32
Les acides nucléiques ont un pic à quelle longueur d'onde?
260 nm
33
Quel est le ratio 260/280 de l'ADN pur?
2 (divise l'A à 260 par celle à 280)
34
Si le ratio 260/280 est plus grand ou égal à _, il est biochimiquement utilisable
1,8
35
Quel est le principe du dosage de bradford?
le réactif se lie aux AA basiques et AA hydrophobes
36
Quel est le principe du dosage Biuret
le réactif réagit avec les liaisons peptidiques des protéines.
37
Entre le biuret et bradford, lequel a une sensibilité plus grande
biuret
38
Entre Bradfort et biuret, lequel est influencé par d'autres molécules
Biuret
39
Entre Bradford et Biuret, quel a une formation de complexe équivalent pour toutes les protéines
Biuret car réagit avec liens peptidiques