Semaine 4: Spectrophotémétrie

Question 1

Qu’est ce que la spectrophotométrie?

Answer 1

Méthode analytique qui consiste à mesurer l’absorbance d’une substance pour déterminer sa concentration

Question 2

Lors de la spectro, un flux _ de lumière traverse la _. Le spectro mesure le flux _ de lumière

Answer 2

incident, solution, émergent

Question 3

Quels sont les deux types d’analyse que permet la spectro?

Answer 3

Quantitative et qualitative

Question 4

Quelles sont les analyses quantitatives possibles avec la spectro?

Answer 4

Dosage d’une substance
Suivi des réactions chimiques

Question 5

Quelles sont les analyses qualitatives possibles avec la spectro?

Answer 5

Identification des composés
Indicateur de pureté des solutions

Question 6

Les UV comprennent des rayonnements dont la longueur d’onde varie entre _

Answer 6

100 nm et 388 nm

Question 7

Qu’est ce que la longueur d’onde?

Answer 7

distance entre deux pics
d’onde

Question 8

Qu’est ce que l’absorption?

Answer 8

lorsqu’un atome ou une molécule, après avoir été exposé à un rayonnement, absorbe une partie de l’énergie de celui-ci.

Question 9

Qu’est ce que le spectre d’absorption?

Answer 9

Représentation graphique de l’absorbance d’un composé donné en fonction de la longueur d’onde λ.

Question 10

Le spectre d’absorption permet donc l’analyse _ du composé

Answer 10

qualitative

Question 11

Qu’est ce que le pic d’absorption?

Answer 11

longueur(s) d’onde λ pour laquelle/lesquelles on
observe un maximum d’absorption

Question 12

Qu’est ce qu’un chromophore?

Answer 12

groupe d’atomes qui absorbe des radiations du visible

Question 13

L’absorption sélective dépend de quoi?

Answer 13

la structure chimique de chaque molécule

Question 14

Les molécules qui absorbent le visible et l’UV contiennent des __

Answer 14

Liaisons insaturées

Question 15

Quelles sont les molécules qui contiennent des liaisons insaturées?

Answer 15

Liaison carbone-carbone double ou triple
Groupements chimiques spécifiques qui contiennent des doubles liaisons entre cardone/oxygène/azote
Purine et pyrimidine

Question 16

Qu’est ce que la transmittance?

Answer 16

Mesure de la proportion de lumière qui traverse un corps absorbant

Question 17

Quels sont les deux principes de la loi Beer-Lambert?

Answer 17

1. Quand un faisceau traverse un milieu absorbant, son intensité décroit exponentiellement en fonction de l’augmentation de la concentration du milieu absorbant.
   Plus une solution est concentrée, plus l’intensité de la lumière transmise diminue, plus cette diminution est marquée
2. Lorsqu’un faisceau traverse un milieu absorbant, son intensité décroit exponentiellement en fonction de la longueur du trajet parcouru.
   Plus le trajet de la lumière est long, plus l’intensité de la lumière transmise diminue

Question 18

Quelle est l’équation de beer-lambert et à quoi correspondent les variables?

Answer 18

A = e l c

A = Absorbance
e = coefficient d’absorption
l = longueur du trajet d’optique
c = concentration de la substance en solution

Question 19

Quelle est l’équation pour obtenir la transmittance?

Answer 19

T = I/I0
I: émergent
I0: incident

Question 20

Quelle est l’équation de l’A en fonction de la transmittance

Answer 20

A = -logT = -log(I/I0)

Question 21

Le coefficient d’absorption est spécifique pour une _ et une _ données.

Answer 21

molécule et longueur d’onde

Question 22

Coefficient d’absorption: e

Answer 22

Molaire.
Lorsque c = 1M et l = 1cm

Question 23

Coefficient d’absorption E0,1%

Answer 23

Lorsque c =0,1% et l=1cm
c = 0,1g/100ml ou 1 mg/ml

Question 24

Coefficient d’absorption E1%

Answer 24

Lorsque c 1%
c = 1g/100ml ou 10 mg/ml

Question 25

Quelles sont les conditions de la loi Beer-Lambert

Answer 25

La lumière est monochromatique
La solution est homogène
Le soluté ne doit pas émettre de fluorescence
La conc de la solution ne doit pas être trop élevée

Question 26

Quel serait le maximum de concentration de solution à respecter

Answer 26

ordre de 10^-4

Question 27

Pourquoi on ne peut pas utiliser des grandes concentrations?

Answer 27

Extrapolation, la relation n’est plus linéaire donc ne suit plus la même équation

Question 29

Vrai ou faux? Toutes les protéines ont le même coeff d’absorption

Answer 29

Faux

Question 30

Pourquoi on utiliser l’A à 280 nm

Answer 30

En analysant le spectre d’absorption tu tryptophane et de la tyrosine (soit 2/3 des AA aromatiques) on voit un pic d’absorption à cette longueur d’onde

Question 31

une protéine qui contient _ de résidus d’acides aminés aromatiques absorbera une _ portion du rayonnement.

Answer 31

plus, plus grande

Question 32

Les acides nucléiques ont un pic à quelle longueur d’onde?

Answer 32

260 nm

Question 33

Quel est le ratio 260/280 de l’ADN pur?

Answer 33

2 (divise l’A à 260 par celle à 280)

Question 34

Si le ratio 260/280 est plus grand ou égal à _, il est biochimiquement utilisable

Answer 34

1,8

Question 35

Quel est le principe du dosage de bradford?

Answer 35

le réactif se lie aux AA basiques et AA hydrophobes

Question 36

Quel est le principe du dosage Biuret

Answer 36

le réactif réagit avec les liaisons peptidiques des protéines.

Question 37

Entre le biuret et bradford, lequel a une sensibilité plus grande

Answer 37

biuret

Question 38

Entre Bradfort et biuret, lequel est influencé par d’autres molécules

Answer 38

Biuret

Question 39

Entre Bradford et Biuret, quel a une formation de complexe équivalent pour toutes les protéines

Answer 39

Biuret car réagit avec liens peptidiques