Semaine 11 Flashcards

1
Q

Qu’est ce que la PCR?

A

méthode pour amplifier à partir d’une quantité infime d’acides nucléiques, un segment d’ADN particulier (séquence cible)

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2
Q

Qu’est ce que la dénaturation de l’ADN?

A

2 brins de l’hélice d’ADN sont séparés par chauffage

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3
Q

Qu’est ce que la renaturation de l’ADN?

A

Les 2 brins peuvent se réassocier quand la température redescend.

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4
Q

Qu’est ce que l’ADN polymérase?

A

enzyme qui catalyse la synthèse d’un brin complémentaire à partir d’un ADN gabarit

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5
Q

Pourquoi l’ADN polymérase est essentielle?

A

Car elle permet la réplication de l’ADN

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6
Q

Dans quelle direction se fait la synthèse d’ADN par ADN polymérase?

A

5’ vers 3’

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7
Q

Comment est initiée la réplication de l’ADN

A

L’ADN polymérase ajoute le nucléotide complémentaire à celui présent sur le brin gabarit

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8
Q

Qu’est ce qu’une amorce?

A

La courte séquence d’ADN qui sert de point de départ pour la synthèse d’ADN

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9
Q

Quelles sont les 5 étapes d’une réaction PCR

A
  1. Dénaturation
  2. Hybridation
  3. Élongation
  4. Répétition des étapes 1à3
  5. Polissage
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10
Q

Que permet l’étape d’hybridation lors d’une réaction PCR

A

permet l’appariement des amorces

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11
Q

Que contient une réaction PCR?

A

ADN polymérase thermostable
Tampon
dNTPs
amorces
ADN gabarit
Eau

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12
Q

Qu’est ce qui délimite la région qui sera amplifiée lors de la PCR

A

La position des amorces

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13
Q

L’ADN amplifié par PCR est appelé _

A

amplicon

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14
Q

Lors d’un PCR, les 2 amorces utilisées doivent avoir _

A

une longueur et une Temp de fusion similaire

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15
Q

Quelle est la longueur des amorces pour un PCR?

A

entre 15 et 35 nucléotides

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16
Q

Plus l’amorce est longue, plus l’hybridation est _

A

spécifique

17
Q

Qu’est ce que la température de fusion des amorces?

A

Temp à laquelle 50% des amorces sont associées à la matrice d’ADN

18
Q

Quelle est l’équation pour avoir le nombre total de copies lors de l’amplification?

A

Y = X * 2^n
Y: nombre total
X: nombre initial
n: nombre de cycles

19
Q

Quels sont les facteurs qui expliquent le plateau qu’atteint l’amplification? (ce qui explique pourquoi ça hit jamais 1 milliard de copies)

A
  1. Les désoxyribonucléotides s’épuisent
    2.l’enzyme est inactivée par des passages successifs à haute température
  2. les BRINS d’ADN qui ont été séparés en chauffant peuvent se RÉASSOCIER AVANT de se lier aux amorces.
20
Q

Qu’est ce qu’un polymorphisme génétique?

A

Les variations de séquence parmi les individus d’une population (qui représente
moins de 1% du génome)

21
Q
A