Seance 6

Question 1

Quels sont les deux modèles expérimentaux permettant l’isolement, la multiplication et éventuellement le titrage des virus animaux?

Answer 1

1) l’inoculation à l’animal
2) l’inoculation aux cultures cellulaires

Question 2

Que provoque l’inoculation du virus à un animal vivant?

Answer 2

Peut provoquer soit une lésion caractéristique, soit une maladie, qui sont alors transmissibles en série, ce qui veut dire qu’elles correspondent à une multiplication de l’agent infectieux.

Question 3

Quel virus donne des lésions pustuleuses sur la peau de la vache, de l’homme ou du lapin?

Answer 3

La vaccine

Question 4

Quel virus, lorsqu’inoculé par voie intracérébrale au lapin, détermine une encéphalite mortelle?

Answer 4

Le virus de la rage

Question 5

Quel virus, lorsqu’inoculé par voie intracérébrale chez certains singes, s’y multiplie en provoquant un syndrome paralytique souvent mortel?

Answer 5

Le virus de la polio

Question 6

Quel virus, déposé sur la cornée scarifiée du lapin, y déclenche une kératite aiguë?

Answer 6

Le virus de l’herpès

Question 7

Quel virus, introduit dans les fosses nasales du furet, se multiplie dans ses voies respiratoires supérieures et engendre une maladie fébrile qui, le plus souvent, n’entraînent pas la mort?

Answer 7

Le virus de la grippe

Question 8

Quel virus, inoculé aux souriceaux nouveau-nés, s’y développe en entraînant des paralysies rapidement mortelles, mais que chez l’adulte, au contraire, fait seulement une infection inapparente?

Answer 8

Le virus coxsackie

Question 9

Quelle est la méthode d’inoculation la plus ancienne?

Answer 9

L’inoculation à l’animal

Question 10

Qu’est-ce qui fait qu’un embryon de poulet est un bon modèle d’inoculation?

Answer 10

C’est un animal stérile, peu encombrant et bon marché.

(et il n’a pas de système immunitaire)

Question 11

Quels organes annexes de l’embryon de poulet apparaissant au cours de son développement ont des cellules qui sont sensibles à certains types de virus?

Answer 11

1) la membrane chorio-allantoïdienne
2) le sac amniotique

Question 12

Quelles sont les 3 voies d’inoculations de l’embryon de poulet?

Answer 12

1) Inoculation de la membrane chorio-allantoïdienne
2) Inoculation des cavités allantoïdes et amniotique
3) Inoculation du sac vitellin

Question 13

En quoi est-ce que l’inoculation aux cultures cellulaires simplifie de beaucoup l’isolement et la multiplication des virus animaux?

Answer 13

Même si ces cultures demandent des millieux nutritifs complexes et des conditions d’incubation adéquates, elles sont relativement simples à faire.

Question 14

Quels sont les différents phénomènes qui peuvent avoir lieu lorsque les virus sont mis en contact avec des cellules?

Answer 14

1) certaines cellules se montrent réfractaires
2) la réplication du virus a lieu sans effet apparent sur la cellule
3) il peut y avoir destruction plus ou moins complète de la culture cellulaire, altération plus ou moins profonde de la morphologie cellulaire, ou modification de certaines propriétés cellulaires.

Question 15

Exemples de virus dont on ne dispose toujours pas de systèmes de culture cellulaire adéquate? (2)

Answer 15

1) Rotavirus
2) Papillomavirus

Question 16

Quelle morphologie auront les cellules d’une culture infectée par la polio?

Answer 16

Cellules arrondies, réfringentes, à cytoplasmes granuleux et noyau pycnotique.

Les cellules se séparent de leurs voisines, prennent un aspect rétracté, et finalement se détachent de la paroi et sont lysées.

Question 17

Comment peut-on obtenir des plages de lyse analogues à celles observées avec les bactériophages mais avec une culture cellulaire animale et le virus de la polio?

Answer 17

En recouvrant les cellules infectées d’un millieu semi-solide (agarose), ce qui limite ainsi la dispersion du virus.

Question 18

Quels sont les deux méthodes de titrage possible des virus de mammifères?

Answer 18

1) Énumération de plages de lyse en recouvrant d’agarose une culture nouvellement infectée.
2) En faisant une série de dilution afin de trouver la dilution maximale permettant d’obtenir la lyse cellulaire.

Question 19

Le titre de la suspension virale est _1_ de la dilution maximale permettant d’obtenir la lyse cellulaire.

Answer 19

1) l’inverse

Question 20

Le titrage est la mesure de quoi?

Answer 20

le nombre de particules INFECTIEUSES et non le nombre total de particules.

Question 21

Le PCR est-il une méthode de titrage de virus? Pourquoi?

Answer 21

NON, il est possible de quantifier la quantité total de génome viral par PCR mais il est impossible d’en quantifier le titre infectieux.

Question 22

Qu’est-ce qu’une dilution limite?

Answer 22

La dilution limite est la dilution à laquelle 1 culture cellulaire sur 2 sera infecté par une seule particule virale infectieuse détruisant la culture entière et l’autre culture ne sera pas infecté du tout.

Question 23

Quel calcul est utilisé lors de la dilution limite et comment est-il calculé?

Answer 23

DICT50: Dose Infectieuse 50% en Culture de Tissus

A-50%
A-B

où A: % de puits totaux infectés dans une dilutions où
plus de 50% des puits sont infectés

B: % de puits totaux infectés dans une dilutions où
moins de 50% des puits sont infectés

décimale * log₁₀ du facteur de dilution
(dilution décimale = 10, log₁₀ 10 = 1)
(dilution binaire = 2, log₁₀ 2 = 0,3)

= décimale: y.

L’inverse de l’exposant de la dilution A + la décimale y:
A^-z⇒ A^z+y⇒ A^{<span>x</span>}

Si le volume inoculé est moins de 1mL, il faut ramener A^x / volume inoculé à A^x/1 mL:
A^x/0,25mL ⇒ A^x * 4 ⇒ A^x/1mL

Selon la distribution de poisson, il faut multiplier par 0,7 pour arriver à une estimation statistique plus valable.

(A^x/1mL * 0,7) = est la DICT50.

Question 24

Comment peut-on augmenter la précision du calcul DICT50?

Answer 24

1) En augmentant le nombre de puits
2) En faisant des dilutions binaires au lieu de décimales