Pathologie Flashcards
Immunohistochimie = ? acronyme
IHC
Pathologie pré-analytique (5)
Réception
Fixation
Description
Circulation
Coupe
Coloration et montage
Pathologie analytique & post-analytique (5)
Analyse des lames
Dictée
Rapports
Types de prélèvements (3)
État dans lequel les prélèvements arrive (2)
Biopsies
Pièces chirurgicales (issu d’une chirurgie ex un cancer)
Liquides (cytologie)
État frais
Dans un fixateur: formol, alcool
Fixation au formol
x __/______ vitesse de pénétration dans tissu (formol)
Volume de fixateur: ?
Qui fait la description des biopsies? Temps réponse?
Des chirugies? Temps réponse?
Prélèvements séparés selon…
1 mm/heure vitesse de pénétration dans tissu (formol)
Volume de fixateur: 10 fois le volume du prélèvement
Équipe technique (biopsie), 24-48h
Pathologistes (Chx), 48h-3jour
Prélèvements séparés selon type de tissu.
Procédés de routine: Circulation
S_________ le tissu afin de pouvoir le couper en tranches minces (- microns)
Remplacer l’___des tissus par de la ___________.
Cycle de __h, durant __ ____
Solidifier le tissu afin de pouvoir le couper en tranches minces (3-4 microns)
Remplacer l’eau des tissus par de la paraffine.
Cycle de 12h, durant la nuit
Procédés de routine: Coloration de base et montage
Avant de coloré il faut ____________.
Avant de coloré il faut déparafiner.
Dans un cas ou le patient est en intervention chirugicale (-30+coupe au cryostat)
Le but principale est de…
Dx doit être émis en…
Diagnostic histopathologique rapide doit informer (2)
Opinion macroscopique rapide doit informer (2)
Le but principale est de modifier le gest chx en cours.
˂20 minutes
- Bénin (referme) vs malin (enleve)
- Type tumoral
- Taille de la tumeur
- État de marges de résections chirurgicales
Examen extemporané (congélation)
- Prélèvement _____ _______
- C__________ rapide à ___°C
- C____ au c______
- É________ sur la l___
- C_________ express au ____de t_______
- L______ au m_________
- Co________ du r_______
Attention: ce qui est congelé est altéré!
- Prélèvement pièce fraîche
- Congélation rapide à -30°C
- Coupe au cryostat
- Étalement sur la lame
- Coloration express au bleu de toluidine
- Lecture au microscope
- Communication du résultat
Attention: ce qui est congelé est altéré!
Cytologie
Avantages (4)
Inconvénients (2)
Avantages:
Moins invasif
Facile à obtenir
Rapide
Recherche d’ADN agents infectieux
Inconvénients:
Dx difficile et limité
Fixation à l’alcool difficile
Cytologie
Avantages (4)
Inconvénients (2)
Avantages:
Moins invasif
Facile à obtenir
Rapide
Recherche d’ADN agents infectieux
Inconvénients:
Dx difficile et limité
Fixation à l’alcool difficile
Cytologie
Préparation à partir de spécimen ________
Préparation à partir d’e_______
A________ à l’_______ fine : masse t___________
Indications: d_______ vs d_________
Préparation à partir de spécimen liquides
Préparation à partir d’exfoliatif
Aspiration à l’aiguille fine : masse thyroïdienne
Indications: dépistage vs diagnostic
Les 4 technique complémentaires en pathologie
Colorations spéciales
Études immunohistochimiques
Étude en immunofluorescence
Hybridation in situ
Colorations spéciales se fait sur quoi?
Agent infectieux
Amyloïdose
Envahissement vasculaire
Pigments
Mucine
Techniques complémentaires: Étude immunohistochimique et immunofluorescence
3 étapes
- Réaction antigène-Ac1
2a. Réaction Ac1-Ac2-Chromogène
2b. Réaction Ac1-Ac2-Fluorochrome
3a. Chromo coupe en paraffine
3b. Fluo sur tissu congelé
Anticorps primaires deux types
P_______;
M______;
P_______; Plusieurs épitopes, moin cher
M______; Un seul épitope
Immunohistochimie: Intérêt (3)
Dx
Marqueur pronostique
Réponse thérapeuthique
Immunohistochimie: Intérêt
Dx (4)
Marqueur pronostique /réponse thérapeuthique
Dx
Diagnostic de malignité/bénignité
Tumeur indifférenciée
Tumeur d’origine inconnue
Tumeur avec différenciation particulière
Infection
Ki-67
Récepteurs hormonaux
HER2
EGFR, ALK
Immunohistochimie:
Tumeur d’origine inconnue et/ou indifférenciée % ?
Celle-ci représente en % (3)
5-15% des tumeurs
Adenocarcinomas (80–90%)
Squamous cell carcinoma (5–10%)
Undifferentiated neoplasms (5–10%)
Immunohistochimie:
Tumeur d’origine inconnue et/ou indifférenciée
Qu’est-ce qu’on regarde? (3)
- Morphologie
- Études complémentaire (IHC)+Biologie moléculaire
- Informations: clinique, radiologique et d’expert
Technique complémentaire:Hybridation in situ
- Applique sur ____ des _______ d’___ ou d’___ marquées, c___________ de s_________ d’___ ou d’___ que l’on recherche sur la coupe.
- ?
- Révélé par his__________ (_________) ou par un F___ (____________).
Ex: Détection d’ADN viral
- Applique sur lame de sondes d’ADN ou d’ARN marquées, complémentaires de séquences d’ADN ou d’ARN que l’on recherche sur la coupe.
- Coupe en paraffine
- Révélé par histoenzymologie (chromogène) ou par un FISH (fluorochrome).
Ex: Détection d’ADN viral
Applications pratiques des techniques complémentaires en pathologie
(4)
C_________ m________ et HER2/Neu
C________ g_______ et HER2/Neu
A_____________ p_______ et mutation EGFR, ALK, PDL-1, ROS-1
M_______ et BRAF
Carcinome mammaire et HER2/Neu
Carcinome gastrique et HER2/Neu
Adénocarcinome pulmonaire et mutation EGFR, ALK, PDL-1, ROS-1
Mélanome et BRAF
HER2/Neu
Type de protéine?
Famille du ?
Présent dans quel cancer ?
Récepteur transmembranaire
Famille du EGFR
Amplification dans 15% carcinome mammaires
Différents degrés de positif
On utilise un système de scoring selon l’intensité du marquage/détection
0 = ? % staining of cells
1+ = ? % staining of cells
2+ = ? % staining of cells
3+ = ? % staining of cells
0 = ˂ 10 % staining of cells
1+ = ˃ 10 % staining of cells (Faint partial)
2+ = ˃ 10 % staining of cells (Weak complete)
3+ = ˃ 30 % staining of cells
HER/Neu Faux négatifs
F_______ ________
E_______ _________
HER/Neu Faux positifs
Interprétation _______ __ ____au lieu de ________ __________
Interprétation _______ c___________ comme p_____
E___ _______
T______ t___ s________
HER/Neu Faux négatifs
Faible sensibilité
Erreurs techniques
HER/Neu Faux positifs
Interprétation carcinome in situ au lieu de carcinome infiltrant
Interprétation réaction cytoplasmique comme positif
Edge artifact
Technique trop sensible (tissu normal normalement négatif)
HER/Neu Les cas douteux peuvent aller en?
Pour visualiser le gène ? et déterminer le ?
HER/Neu Les cas douteux peuvent aller en FISH
Pour visualiser le gène HER2 et déterminer le nbre de copies
Carcinome mammaire et HER2/Neu
Carcinome gastrique et HER2/Neu
Prédit une réponse thérapeutique au?
trastuzumab (Herceptin)
Syndrome de Lynch
Héritabilité? Hétérozygote ou homo?
Cause/mutation de quel système?
Ceci engendre quoi?
Autosomal dominant, Hétéro suivie d’une inactivation de la copie normale dans la tumeur
Mutations impliquant les gènes de la réparation des mésappariements de l’ADN (MMR; mismatch repair genes)
Perte de fonction de la protéine: MLH1, MSH2, MSH6, and PMS2
Accumulations d’une varitété de mutations à travers le génome, incluant une altération dans la longeur des séquences répétitives microsatellites (MSI). (s’allonge)
Syndrome de Lynch=
Comment se fait inactivé la 2e copie normale dans la tumeur? (3)
Loss of heterozigocity (perte de la région)
Mutation délétère (protéine tronquée)
Méthylation du promoteur MLH1 (1er cause)
Syndrome de Lynch
Âge d’apparition?
Associé à quel types de cancer? (3+autres)
Observation histologique associée? (2)
Jeune
Cancers synchrones / métachrones
Cancer colorectal
Cancer endomètre
Autres cancer (estomac, opvaire, cerveau, petit intestin…)
Mucine abondante
Infiltration lymphocytaire
Syndrome de Lynch
Quoi testé dans quel ordre?
- Recherche des expensions/reductions des régions microsatellites, par amplification PCR, en comparant avec le tissu N.
- Par IHC tester si perte d’expression des protéines MLH1, MSH2, MSH6, and PMS2.
Adénocarcinomes :
les 3 principaux biomarqueurs moléculaires
ALK fusion 5%
EGFR 15%
KRAS 35%
mutuellement exclusive dans la plupart des cas
Détection de réarrangement ALK par immunohistochimie (IHC)
C’est quoi?
Cause quel gène à être ?
Confirmés par ?
Cause quoi?
Inversion bras court du Chromosome 2.
La présence d’un réarrangement du gène ALK cause une surexpression de la protéine ALK, visible en IHC.
Les cas équivoques ou positifs sont confirmés par FISH.
Cause Adénocarcinome pulmonaire
Détection de réarrangement ALK par immunohistochimie (IHC)
Les cas équivoques ou positifs sont confirmés par FISH.
Pourquoi?
Signal négatif
Sondes rouge et verte rapprochées ou fusionnées (jaune).
Signal positif
Sondes rouge et verte séparées
ou
Sonde rouge seule
Détection de réarrangement ALK par FISH
Spécimens:
Tissus en ________ ou _____ _________.
Un minimum de __ cellules néoplasiques sur la lame.
Interprétation:
Un spécimen est considéré comme :
Négatif si _ __ % cellules sont positives.
Positif si _ __ % cellules sont positives.
Spécimens:
Tissus en paraffine ou blocs cellulaires.
Un minimum de 50 cellules néoplasiques sur la lame.
Interprétation:
Un spécimen est considéré comme :
Négatif si < 15 % cellules sont positives.
Positif si > 15 % cellules sont positives.
Nbr de lames?
Nbre de jours?
Surexpression de PD-L1 dans ?
Les x:
é___________et a____________
Les carcinomes pulmonaires à grandes cellules:
épidermoïdes et adénocarcinomes
Que fait PD-L1?
Ligand du récepteur PD-1 qui régule à la baisse l’activité des lymphocytes T. Protège les cellules tumorale en inhibant l’activation des lymphocytes T cytotoxiques.
Méthode de fixation?
Microscopie optique:
Immunofluorescence:
Microscopie électronique:
Microscopie optique: Fixation au formol
Immunofluorescence: Cryo fixation
Microscopie électronique: Fixation au glutaraldéhyde
Glomérulonéphrite à croissants
3 possibilités de maladies
La dernière divisé en deux
- Maladies des anticorps anti-membranes basale glomérulaire
→ Cause un marquage linéaire autour de la membrane basal des glomérules. - Vaculite à ANCA → Absence de fixation
Anti-neutrophil cytoplasmic autoantibody (ANCA)-associated vasculitis(AAV) is a group of autoimmune diseases characterized by inflammation and damage to small blood vessels. This inflammation is typically caused by ANCAs, self-reactive antibodies that bind to certain cells of the immune system — called neutrophils — and overly activate them.
- Maladie à dépôts de complexes immuns
→ marquage glomérulaire granuleux
Lupus → Full-house
Glomérulonéphrite à dépôts mésangiaux d’IgA → IgA marqué (pas IgG)
Microscopie électronique
Grossissement jusqu’à ____x-__ ___x
Permet de visualiser les ______ ______ et de les localiser
Grossissement jusqu’à 2500x-80 000x
Permet de visualiser les dépôts immuns et de les localiser
Diagnostic en pathologie rénale on a besoin de 3 tests, lesquels?
et une source de ?
Microscopie optique
Immunofluorescence
Microscopie électronique
Informations cliniques
Tx Maladie des anticorps anti-membrane basales glomérulaires
T__________ i__________________ a_________
Pl_____________
Traitement immunosuppresseur agressif
Plasmaphérèses
Les voies de l’avenir en pathologie
M__________ p_________ /r________ t_____________
B_______ ____________
Pa__________ n___________ et Té______________
Marqueur pronostique /réponse thérapeuthique
Biologie moléculaire
Pathologie numérique et Télépathologie
Qu’est-ce que la pathologie numérique?
Acquisition, partage et interprétation des données pathologiques dans un environnement digital.
Lames de verre sont scannées pour produire des images digitales de haute résolution.
Lames digitalisées sont visualisées sur un écran.
Pathologie conventionnelle vs numérique
→ Amélioration de la qualité des soins
Comment? (6)
- Diminution du délai de production des rapports de pathologie.
- Amélioration de la qualité des données inclues au rapport de pathologie.
- Couverture en continue des sous-spécialités en pathologie (Pathologiste en vacance, enceinte, malade → vue que numérisé accès à d’autre pathologiste pour prendre le slack)
- Maintient/aide à la mission d’enseignement
- Partage d’image lors de réunions multidisciplinaires
- Contexte de recherche → AI assisted research
Pathologie conventionnelle vs numérique
→ Amélioration de la qualité des soins
- Contexte de recherche → AI assisted research → Outil?
NEPTUNE
Nephrotic Syndrome Study Network
Télépathologie: Routine ex NEPTUNE
Freins? (2)
Technologie $$$:
Équipements
Stockage des données
Télépathologie: Routine ex NEPTUNE
Avantages (4)
Distribution des cas facilitée
Partage d’images avec collègues pour avis Dx
Outils d’analyse d’image
Deep learning: reconnaissance de patrons histologiques
