Observations microscopiques

Question 1

Quelle différence principale et ressemblance y a-t-il entre les microscope photoniques et électroniques ?

Answer 1

Les photoniques fonctionnent avec des photons tandis que les électroniques fonctionnent avec des électrons. Ils ont des principes physiques semblables.

Question 2

Avec quel type de microscope le premier virus a-t-il pu être observé ?

Answer 2

Avec un microscope électronique.

Question 3

Quelles différences y a-t-il entre les photons et les électrons, au niveau du microscope ?

Answer 3

Les électrons ont des longueurs d’onde beaucoup plus petites que les photons. Les photons ont des longueurs d’ondes particulières.

Question 4

Quelle formule permet de calculer la limite de résolution ?

Answer 4

LR = longueur d’onde / 2nsin(teta)

Question 5

Quel est le domaine de longueurs d’onde visibles à l’oeil ?

Answer 5

Entre 400 et 700 nm.

Question 6

Quel type de rayon se retrouvent entre 180 et 400nm ?

Answer 6

Les UV.

Question 7

Pourquoi est-il nécessaire d’ajouter de l’huile à immersion ?

Answer 7

L’huile à immersion (n=1,56) permet d’avoir un indice de réfraction plus près de celui de verre (n=1,50), comparativement à l’air (n=1,0). Ainsi, on perd beaucoup moins de faisceaux lumineux.

Question 8

Quels sont les avantages d’observer des microorganismes à l’état frais ?

Answer 8

1. Permet d’observer la morphologie;
2. Permet d’observer la motilité;
3. Permet d’observer l’axe de division cellulaire des protozoaires ;
4. Corps d’inclusion cytoplasmique.

Question 9

Quel est le désavantage de la coloration et fixation ?

Answer 9

On doit observer des microorganismes morts.

Question 10

La morphologie s’observe mieux avec ou sans colorant ?

Answer 10

Avec colorant car il y a un plus grand contraste.

Question 11

Quel type de coloration, soit simple ou différentielle, permet de distinguer des structures en particulier ?

Answer 11

La coloration différentielle.

Question 12

En quoi consiste la coloration simple ?

Answer 12

Échantillon sur la lame, on trempe l’échantillon dans le colorant puis on rince.

Question 13

Qu’est ce qui permet d’observer des structures claires sur un fond noir ?

Answer 13

L’éclairage oblique.

Question 14

Quels sont les avantages du microscope à fond noir ?

Answer 14

1. Aucune coloration nécessaire, donc organismes vivants;
2. Aucune modification à l’échantillon;
3. Plus grand contraste.

Question 15

Quel est le principe du microscope à contraste de phase ?

Answer 15

Il est composé de 2 anneaux de phases, soit un dans l’objectif et un dans le condensateur. Les anneaux retardent l’onde lumineuse afin qu’on puisse traduire une différence de luminosité.

Question 16

Quel microscope permet la variation de l’angle de polarisation de la lumière et ainsi, permet d’avoir différentes réfractions ?

Answer 16

Le microscope à contraste d’interférence différentielle.

Question 17

Quels avantages offre le microscope à contraste d’interférence différentielle ?

Answer 17

1. Coloration vive donc cellules vivantes;
2. Relief 3D;
3. Absence de halo de diffraction.

Question 18

Quelle est la limite du microscope à contraste d’interférence différentielle ?

Answer 18

Les préparations sont transparentes.

Question 19

Qu’est ce que le fluorochrome ? Et comment fonctionne-t-il ?

Answer 19

Un colorant fluorescent. L’absorption par le colorant de la lumière UV excite le colorant et donc, il retourne à son état de base en éclairant.

Question 20

Qu’est ce qui empêche l’observateur de recevoir des rayons UV ?

Answer 20

Un filtre qui bloque les rayons.

Question 21

Pourquoi le fluorochrome permet d’observer des cellules vivantes ?

Answer 21

Puisque ce colorant se fixe aux cellules mortes, qui ont une membrane cytoplasmique perméable, tandis qu’il y a exclusion par cette même membrane pour les cellule vivante.

Question 22

Qu’est ce qui est utilisée comme diagnostique pour la détection des pathogènes ?

Answer 22

L’immunofluorescence.

Question 23

Qui a construit le premier microscope électronique fonctionnel ?

Answer 23

Ruska.

Question 24

Qu’est ce qui permet une si grande résolution chez les microscopes électroniques ?

Answer 24

Les électrons (5x10^-12 m).

Question 25

quelle différence y a-t-il entre l’oculaire d’un microscope électronique et photonique ?

Answer 25

L’oculaire d’un microscope électronique est constitué d’électroaimants (lentille magnétique).

Question 26

Vrai ou faux : un microscope électronique doit se situé dans un sous-sol ?

Answer 26

Vrai, préférablement au 2e ou 3e sous-sol sinon, les oscillations seront affectées.

Question 27

Vrai ou faux : l’oeil humain voit le faisceau des électrons ?

Answer 27

Faux, le faisceau doit être transformé afin d’être observable.

Question 28

Vrai ou faux : l’intérieur du microscope électronique est vide ?

Answer 28

Vrai, cela permet aux électrons de voyager aisément.

Question 29

Quelles sont les limites du microscope électronique ?

Answer 29

1. Les électrons voyagent dans le vide;
2. Les électrons sont non pénétrants;
3. Les échantillons sont du matériel non-vivants;
4. Le matériel vivant est non électro-dense.

Question 30

Pourquoi les échantillons d’un microscope électrique ne sont pas vivants ?

Answer 30

Puisqu’ils ne sont pas compatibles avec la pression si basse du vide.

Question 31

En quoi consiste la technique de «coloration» de l’ombrage ?

Answer 31

On vaporise des métaux sur l’échantillon qui est dans une cloche sous vide. Les métaux s’accumulent et quand la cellules présente des élévations, cela empêche l’exposition au métaux. Ainsi, cela créera des ombres au microscope.

Question 32

Quels sont les types de préparation/«colorations» pour les microscopes électriques ?

Answer 32

1. Technique de l’ombrage;
2. Coloration négative;
3. Cryodécapage;
4. Immuno-localisation cellulaire.

Question 33

Quel acide est utilisé lors de la coloration négative ?

Answer 33

L’acide phosphotungstique.

Question 34

Comment agit la coloraiton négative ?

Answer 34

L’acide absorbe davantage les électrons. Puisqu’il s’accumule dans les structures creuses, les creux sont plus assombris et les protubérances sont claires.

Question 35

Quel est le principe du cryodécapage ?

Answer 35

L’échantillon est amené à -100°C ce qui rend la structure rigide. En créant une pression latérale, l’échantillon se fissure dans lez zones de faiblesse. On applique la technique de l’ombrage par la suite.

Question 36

Quelle technique permet la localisation précise d’une protéine dans une cellule ?

Answer 36

L’immuno-localisation cellulaire.

Question 37

Comment fonctionne l’immuno-localisation cellulaire ?

Answer 37

Il faut faire un anticorps-billes avec un anticorps spécifique à une certaine protéine/structure en le liant avec Fe ou Au, des matériaux qui absorbent les métaux.

Question 38

Quels sont les deux types de microscopes électroniques ?

Answer 38

Microscope électronique à transmission et à balayage.

Question 39

Comment fonctionne le microscope électronique à transmission ?

Answer 39

Il y a un détecteur d’électrons sous l’échantillon. Lorsque les électrons traversent l’échantillon, on obtient des images par transparence. En ayant une limite de résolution très basse, on peut observer des structures très fines.

Question 40

Comment fonctionne le microscope électronique à balayage ?

Answer 40

Les électrons sont réfléchis par l’échantillon (ne le traversent pas). Ces derniers sont captés et balayés. Les électrons secondaires entrent dans le détecteur latérale, atteignent un scintillateur qui émet de la lumière, qui elle, est transformées en courant électrique. Les images formées ne sont pas par transparence.

Question 41

Quel microscope photonique fonctionne avec l’illumination par laser ?

Answer 41

Microscope confocal à balayage laser.

Question 42

Pourquoi le microscope à confocal à balayage laser est-il considéré comme photonique ?

Answer 42

Car le laser bombarde l’échantillon en effectuant un balayage.

Question 43

Qu’est ce qui rend le microscope à confocal à balayage laser beaucoup plus puissant ?

Answer 43

L’utilisation de florochrome. La détection de fluorescence se fait uniquement dans le plan du foyer.

Question 44

Vrai ou faux : le balayage laser se fait uniquement dans les plans horizontal et vertical ?

Answer 44

Faux, il se fait aussi dans le plan temporel, c’est-à-dire qu’on laisse la structure évoluer. Le balayage 3D permet de reconstituer la structure.

Question 45

Comment fonctionne le microscope à force atomique ?

Answer 45

Il y a une sonde qui se déplace sur une surface et il y a un laser dirigé vers la surface de la sonde. Cela permet de mesurer la longueur d’onde du laser.

Question 46

Comment fonctionne le microscope à effet tunnel et à balayage de sonde ?

Answer 46

Une sonde balaie la surface et mesure le déplacement vertical/horizontal ainsi que le courant entre les nuages électroniques.