Croissance et divisions des cellules (partie 2 - exam 3)

Question 1

Comment fonctionne un chémostat ?

Answer 1

C’est un bioréacteur, dans lequel poussent, de façon contrôlée, les microorganismes. On y insère un volume fixe.

• État non clos (entrée et sortie)
• Ajout constant de milieux frais.
• Élimination du milieu épuisé
• Contrôle du : pH, T°, agitation, gaz, etc.

Question 2

Comment se calcul le taux de dilution pour une culture en continue ?

Answer 2

volume ajouté/volume total/heure

Question 3

Le contrôle du débit d’arrivée du milieu permet de calculer quoi ?

Answer 3

Le taux de dilution.

Question 4

Le contrôle du taux de croissance ce fait grâce à quoi?

Answer 4

Le taux de dilution.

Question 5

Que signifie un taux de dilution = au taux de croissance ?

Answer 5

Qu’on est en conditions optimales.

Question 6

Que signifie un taux de dilution < au taux de croissance ?

Answer 6

Qu’on est en conditions limitantes.

Question 7

Que signifie un taux de dilution > au taux de croissance ?

Answer 7

Élimination des bactéries (lavage).

Question 8

Que permet la chambre de Petroff-Hausser ?

Answer 8

Énumération cellulaire ( compte des cellules dans un volume prédéterminé).

Question 9

Quels sont les avantages de la chambre de Petroff-Hausser ?

Answer 9

Minimum d’équipement, rapide, population de 10^7-10^8/ml

Viabilité des cellules ?

Question 10

Quelles sont les différentes méthodes d’énumération cellulaire ?

Answer 10

• Chambre de Petroff-Hausser
• Énumération électronique
• Énumération des unités viables
• Méthodes turbidimétriques
• Méthodes moléculaires

Question 11

Comment fonctionne la méthode d’énumération électronique ?

Answer 11

Le débit est contrôlé par laser visible/UV.
il y a un trie des cellules.
donne le nombre de corps bactérien

Question 12

Quels sont les inconvénients de l’énumération électronique ?

Answer 12

Sensibilité : limite -> taille des bactéries. il y a témoin interne qui sont des billes de tailles et de concentrations connues.

Question 13

Quelle méthode d’énumération cellulaire permet la détection de spores dans l’air et la caractérisation des populations hétérogènes ?

Answer 13

Énumération électronique.

Question 14

Comment fonctionne l’énumération des unités viables ?

Answer 14

Dilutions séquentielles et étalement, en surface ou en profondeur

Question 15

Comment un échantillon est-il déterminé valable dans un énumération des unités viables ?

Answer 15

Il doit y avoir entre 30 et 300 colonies par pétri.

Question 16

Quelles sont les unités pour la méthode d’énumération des unités viables ?

Answer 16

UFC ou unités viables.

*unités formatrices de colonie n’égale pas cellule ou population totale. UFC = colonie

Question 17

Sur quel type d’organisme se fait l’énumération des unités viables ?

Answer 17

Organismes viables, population diluée (très diluée = filtration)

Question 18

Comment fonctionne la méthode turbidimétrique ?

Answer 18

Cette méthode mesure le trouble dans un milieu liquide. À un certain seuil, il y a assez de trouble et donc possibilité de disperser ou absorber la lumière.

Question 19

Quel appareil mesure la lumière absorbée et quel appareil mesure la lumière dispersée ?

Answer 19

Lumière absorbée : spectrophotomètre

Lumière dispersée : néphélomèter

Question 20

La méthode turbidimétrique se fait en quel condition ?

Answer 20

Conditions standardisées : même espèce, même milieu…
Permet de faire une courbe d’étalon (D.O. en fonction de UFC)
10^7 à 10^8 UFC/ml

Question 21

Comment fonctionne la méthode moléculaire ?

Answer 21

Se base sur la quantité d’ADN (extraction), amplification enzymatique d’une séquence spécifique d’ADN
extrêmement précise, demande beaucoup de mise au point.

Question 22

Quels sont les avantage de la méthode moléculaire ?

Answer 22

Pas besoin de cultiver des microorganismes, demande nutritionnelle pas à connaître, seulement besoin d’amplifier ADN.
Quantification d’organismes non cultivables
Quantification simultanée de plusieurs organismes.

Question 23

Quels sont les inconvénients de la méthode moléculaire ?

Answer 23

$$$, spécificité de ce qui est amplifié, spécificité des séquences : longue mise au point

Question 24

Comment se fait la détermination du poids sec (quantification de la masse cellulaire ) ?

Answer 24

Filtration + séchage 100-150°C

Question 25

La méthode de détermination du poids sec est utile pour quelles bactéries ?

Answer 25

Bactéries agrégées ou formant des hyphes.

Question 26

Quelles sont les méthode de mesure de croissance les plus fréquentes ?

Answer 26

Unités viables et turbidimétrique (moléculaire : en croissance)

Question 27

Que fait-on si la densité de population est trop levée pour une chambre de Petroff-Hausser ?

Answer 27

Il faut faire une dilution car ce sera difficile de faire l’énumération.

Question 28

Pourquoi est-il important de bien faire le séchage après la filtration ?

Answer 28

Il est important qu’il ne reste aucune eau résiduelle puisque 1 microL d’eau = 1mg et 1mg correspond à 10^9 cellules…. cela viendrait fausser énormément les résultats.