Mikrobiologi - parasit

Question 1

Vad gör man vid instämpling av proverna?

Answer 1

• Kontrollera burk mot remiss

- Sätt på etiketter för remiss (om papper), prov, saf-burk och rör.

Question 2

Vad är saf-lösning?

Answer 2

Det är en lösning som innehåller lite formalin för att fixera proverna.

Question 3

Vad är viktigt att man angett på remissen (utöver personuppgifter m.m)?

Answer 3

Smittland.

Kan ha betydelse för att kunna ställa diagnos

Question 4

Hur långs sparas proverna?

Answer 4

5-10 dagar. Man kan behöva ta mer material om man vill komplettera med PCR.
Om provet är taget hemma sparas det i max tre dagar

Question 5

Beskriv preparering av proverna när de blivit instämplade

Answer 5

• Ta en prov-burk och tillhörande saf-burk
• För över lite material till saf-lösningen så det är ca 1 del prov på tre delar saf.
• Blanda med träpinne så det blir homogent
• Låt stå att fixeras minst 30 min (vanligen till dagen efter)

Question 6

Beskriv vad man gör med proverna efter att de fått fixeras

Answer 6

• Ta en kopp och lägg över en bit gasväv
• Filtrera allt innehåll från saf-burken genom väven
• Häll eventuellt över lite extra saf-lösning
• Släng gasväven med överblivet material
• Häll filtratet i provröret och lämna kvar några droppar att hälla tillbaka i saf-bruken
• Tillsätt några droppar saf + Triton X
• Tillsätt 3 ml etylacetat
• Sätt på kork och låt stå i skakmaskin 5 min
• Centrifugera i 3 min
• Häll av allt utom sedimentet med “snärt”
• Torka med svamp i röret

Question 7

Vad gör Triton X?

Answer 7

Det är som en två och tvättat preparatet

Question 8

Vad gör etylacetat?

Answer 8

Verkar fettlösande

Question 9

Vad får man för “uppdelning” i röret efter centrifugeringen?

Answer 9

• Överst ligger etylacetat
• Sen fett och annan smuts/skräp/faeces
• Saf och Triton
• Längst ner i spetsen ligger sedimentet med stärkelse och eventuellt ägg om det finns

Question 10

Hur förbereder man sedimentet för mikroskopering?

Answer 10

• Lös upp sedimentet med någon droppe koksaltlösning
• Placera en droppe av provlösningen på objektsglas
• Tillsätt en droppe jodlösning
• Lägg på täckglas
• Leta igenom hela täckglaset på 10X (kolla närmare på 40X)

Question 11

Vad göt jodlösningen?

Answer 11

Det färgar in preparatet så man får bättre kontraster. Färgar in stärkelse

Question 12

Varför sparar man några droppar filtrat?

Answer 12

Det finns vissa parasiter/ägg som är mer känsliga för centrifugering. Man sparar därför, och kollar på, ocentrifugerat material också

Question 13

Hur ställs doagnos?

Answer 13

Man hittar ägg. Krävs endast ett för att ställa diagnos. Men man måste ändå leta genom hela då det kan finnas flera olika parasiter

Question 14

Om man hittar två olika parasiter, varför svarar man inte ut båda?

Answer 14

Det kan avleda uppmärksamheten från det faktiska problemet. Ja, patienten har parasiter, men är den inte farlig så kan det vara bättre att inte svara ut då patientens hälsa kan bero på något annat som är det egentliga problemet.

Question 15

Varför kör man inte alla parasiter i PCR?

Answer 15

Tekniskt sett kan man det men det är enklare och snabbare att bara titta i mikroskop.

Question 16

Har man bara en droppe per objektsglas?

Answer 16

Nej.

Man har två droppar från det centrifugerade sedimentet och en droppe från det ocentrifugerade

Question 17

Beskriv protoszoer

Answer 17

• “De första djuren”
• Encelliga
• Kan delas in efter rörelseteknik
• Kan föröka sig asexuellt (delning) eller sexuellt
• Kan bilda cystor - ett överlevnads/vilostadium
• Främst cystor man kan hitta
• ## Genom cystor som det sprids från människa till människa

Question 18

Beskriv Giardia Intestinalis

Answer 18

• Protozo
• Flageller
• Fäster vid mucosa i tunntarm
• Ger vattentunn diarré
• Sprids via förorenat vatten och livsmedel
• Diagnos genom fynd av cystor eller PCR
• Anmälnings- och smittspårningspliktig
• Allmänfarlig

Question 19

Beskriv Entamoeba Histolytica

Answer 19

• Protozo
• Pseodupodia (pseudofot)
• Går endast att skilja från E. dispar genom PCR
• Anmälnings- och msittspårningspliktig

Question 20

Beskriv Cryptosporidium

Answer 20

• Protozo
• Måste ha vävnad att föröka sig i
• Anmälnings- och smittspårningspliktig

Question 21

Vilka tre grupper av maskar finns?

Answer 21

• Cestoder
• Nematoder
• Trematoder

Question 22

Vad är en Cestod? Ge exempel

Answer 22

• Bandmask
• Taenia
• Inte utvecklad till hane/hona
• Platta med segment
• Segmenten mer mogna längst bort från huvudet, snörps av och utvecklas till nya parasiter
• Kan vara mellan 1 mm och 40 m
• Inte anmälningspliktig

Question 23

Var är en Nematod? Ge exempel

Answer 23

• Rundmask
• Ascaris - spolmask, springmask
• Räknas till cylindrar
• Utvecklade - både hanar och honor
• kan bli från 1 till 30 cm
• Inte anmälningspliktig

Question 24

Vad är en Trematod?

Answer 24

• Flundra
• Platt och lövliknande
• Oftast en eller flera mellanvärdar
• Många kan befrukta sig själva
• Lite farligare, kan sitta i lungorna
• Ett ägg kan ge flera larver
• Några mm stora

Question 25

Vilka sorter av malaria finns?

Answer 25

• Plasmodium falciparum
• P. vivax
• P. ovale
• P. malariae
• P. knowlesi

Question 26

Vilken malaria är vanligast och vilken är farligast?

Answer 26

P. falciparum på båda

Kanske för att det blir så många infekterade erytrocyter

Question 27

Hur analyserar man malariaprov?

Answer 27

• Det kommer in som blodprov
• Man tittar på tjock droppe
• Om positiv går man vidare till utstryk

Question 28

Vad är skillnaden mellan tjock droppe och utstryk?

Answer 28

Tjock droppe:

• Man kan bara säga om det är positivt eller negativt
• Man färgar med Fields A och B

Utstryk:

• Man kan identifiera vilken malaria som har infekterat
• Färgas med Giemsa

Question 29

Varför gör man inte utstryk direkt? (malaria)

Answer 29

Även om man bara har en infekterad cell så är man positiv för malaria. I tjock droppe har man mer material och det är större chans att hitta eventuella infekterade celler.

Question 30

Varför kan man bara säga om det är positivt eller negativt vid tjock droppe?

Answer 30

Cellerna förstörs när glaset behandlas med vatten. Parasiterna kommer ligga fritt så man endast kan säga om det finns eller inte

Question 31

Om tjock droppe är positiv, hur går man vidare?

Answer 31

• Gör ett utstryk
• Kolla på 100X
• Räkna antalet infekterade celler per oinfekterade (sånt objekt som vid retikulocyträkning)
• Räkna ut procenten

Question 32

Varför är det viktigt att räkan antalet malariainfekterade celler?

Answer 32

• Har betydelse för behandlingen

- Man kan ta uppföljningsprover för att se om behandlingen hjälper

Question 33

Varför är det så viktigt att köra PCR på vissa parasiter?

Answer 33

Viktigt att man får korrekt svar. Falskt positivt kan leda till onödig behandling, falskt negativt kan leda till onödig spridning.