La biologie moléculaire en hémato-oncologie Flashcards
Qu’est-ce que la biologie moléculaire ?
Une discipline scientifique qui combine la génétique, la biochimie et la physique. Elle étudie les mécanismes moléculaires de la cellule.
Expliquez le principe de l’immunohistochimie (IHC).
On injecte un premier anticorps qui cible l’antigène qu’on veut. Ensuite, un injecte un 2e anticorps qui peut se lier au complexe anticorps-antigène et qui permet de colorer et de voir l’antigène par IHC ou fluorescence.
Que veut-on dire quand on dit que le sang est purulent chez les patients atteints de LMC ?
Il y a une accumulation de cellules nucléées et granuleuses (neutrophiles) inefficaces.
Que veut dire le terme “Hépato-Splénomégalie” ?
Un volume du foie et de la rate plus grand que la normale.
Quelle anomalie génétique mène au chromosome de Philadelphie ?
Une translocation entre les chromosomes 9 et 22, qui mène à une protéine de fusion Bcr-Abl.
Vrai ou faux, l’anomalie 9:22 du chromosome de Philadelphie mène toujours à une leucémie myéloïde chronique ?
Vrai, cette anomalie mène à ce phénotype dans 100% des cas.
Quel est le rôle de la protéine de fusion Bcr-Abl dans le développement de la LCM ?
Cette protéine augmente de beaucoup la prolifération des neutrophiles, mais ces derniers sont inefficaces et nuisent aux neutrophiles normaux.
Quelle était le première forme de thérapie ciblée de la LCM ? Comment cette thérapie fonctionnait-elle ?
C’est l’imatinib (Glivec), au début des années 2000. Le Glivec fonctionnait en venant s’incruster dans la poche de liaison de l’ATP sur la protéine de fusion BCR-ABL. L’ATP ne peut donc pas se lier, et la protéine est inhibée.
Comment procède-t-on pour analyser la caryotype ?
- Mise en culture des cellules, puis blocage en métaphase avec de la colchicine, puis lyse les cellules
- Fixation et étalement sur lame
- Coloration de Giemsa, qui permet l’appariation de bandes sombres
- Observation des patrons, spécifiques à chaque chromosome.
Décrivez le concept général du FISH.
On utilise des sondes avec la séquence connue qu’on veut trouver. Ensuite, on dénature l’ADN, puis, par homologie, la sonde se lit et permet de voir par fluorescence si la séquence est présente.
Quels sont les avantages et les inconvénients de la technique FISH ?
Avantages :
- Technique simple
- Avec cellules en division ou non
- Permet l’identification de plusieurs mutations différentes en même temps
- Inconvénients :
- On doit connaitre la séquence de la mutation recherché
Vrai ou faux, l’analyse par PCR permet de déterminer la séquence exacte de nucléotides ? Comment ?
Vrai, on peut associer des colorants différents aux différents nucléotides.
Laquelle des techniques de détection de LMC a le seuil de sensibilité le plus bas ?
PCR
Nommez trois types de NMPs qui sont non Bcr-Abl. Nommez aussi quel type cellulaire est muté.
- Polyglobulie Vaquez, trop de globules rouges
- Thrombocyte essentielle, trop de plaquettes
- Myélofribrose primaire, la moelle osseuse est remplacée par de la fibrose
Généralement, comment la kinase “Janus Kinasse” 2 est-elle mutée dans les cancers ?
Normalement, Jak2 a besoin d’érythropoïétine pour fonctionner et activer d’autres voies de signalisation, comme STAT et PI3K. Dans certains cancers, Jak2 est mutée et n’a plus besoin d’EPO pour fonctionner.
Quelle est la différence entre une néoplasie chronique et une néoplasie aigue ?
Une néoplasie chronique implique des mutations dans les cellules matures seulement, comme les neutrophiles. Le pronostic est meilleur pour ces patients. Une néoplasie aigue implique des mutations dans les cellules immatures, parfois jusqu’aux cellules souches. Le pronostic est très mauvais chez ces patients.
Décrivez le concept de l’allogreffe médullaire chez les patients atteints de leucémie avancée.
On prend un donneur sain compatible avec le patient. On va ensuite rendre le patient immunosupprimé grâce à de la chimiothérapie intense qui tue les cellules de la moelle osseuse. Il faudra ensuite donner des transfusions sanguines et de la nouvelle moelle osseuse saine au patient. Il existe cependant l’effet GVL, qui cause la mort de 10 à 30% des patients qui subissent cette opération.
Quels sont les facteurs lors du choix entre la chimiothérapie et la greffe ?
Les risques clinique, comme :
- L’âge
- Des antécédents de maladies hématologiques, de chimio/radiothérapie
- Des leucocytose et thrombopénie
Les risques cytogénétiques, qui sont beaucoup plus importants
Quand on parle de risques cytogénétiques favorables chez un patient, va-t-on utiliser la chimiothérapie ou la greffe en premier ?
La chimiothérapie
Lorsqu’un patient présente des risques cytogénétiques intermédiaires, utilise-t-on la chimiothérapie ou la greffe ?
Ça dépend, on va regarder les gènes plus précisément pour voir quelle thérapie semble la plus efficace.
Quelle type de leucémie a le taux de survie le plus élevé ? Comment est-elle caractérisée ?
C’est la LMA pro-myélocytaire. Le taux de survie est maintenant de plus de 90%. Dans ce type de leucémie, il y a beaucoup de prolifération de cellules granuleuses, qui remplacent les cellules de la moelle osseuse. À la longue, un patient n’aura pas de plaquettes et de globules rouges et blancs.
Dans cette maladie, il y a une translocation entre les chromosomes 15 et 17 et une protéine de fusion PML-RARa.
Comment traite-t-on la LMA pro-myélocytaire ?
On traite ces patients par l’ajout d’acide transrétinoïque et de l’arsenic.
Quelle est la mutation la plus fréquente dans les cas de mélanomes ?
Une mutation BRAF V600E/K, qu’on trouve dans 40-60% des cas.
Quelle est la thérapie de première ligne dans le traitement du mélanome ?
C’est des inhibiteurs de BRAF.
