Introdução Flashcards
Cultura de células
Metodologia de crescimento e manutenção de células ex vivo em condições controladas: é o processo pelo qual células são mantidas vivas e em crescimento fora do seu tecido original. Isso permite cultivar e manter células isoladas fora do organismo com as mesmas características fenotípicas e genotípicas de onde foram retiradas
Razões para utilização de cultura de células
- Estudo de funções celulares
- Estudo farmacológicos, toxicológicos, biomédicos, biotecnológicos,…
- Produção de proteínas/anticorpos/vírus/vacinas
- Diminuição da utilização de modelos animais
» custo mais baixo que experimentação animal
» questões éticas
Como se faz a cultura de células
1. Obtenção do tecido original — o primeiro passo é o tecido original contendo as células que se deseja cultivar. Isso pode ser feito por meio de uma força mecânica (como trituração) ou um processo 1. enzimático (usando enzimas para dissociar as células)
2. Desagregação do tecido — o tecido original é desagregado para libertar as células individuais. Isso pode ser feito por trituração, peneiramento ou processos enzimáticos
3. Cultivo das células — as células são cultivadas num ambiente artificial (in vitro) que simula as condições naturais. Isso inclui fornecer nutrientes essenciais (aminoácidos, vitaminas. minerais, carboidratos), hormonas, fatores de crescimento, carbono e oxigénio. As células podem cultivadas numa camada aderente (mono camada) ou no formato de organoides (cultura 3D) ou em suspensão
Condições de cultura
As condições de cultura variam para cada tipo de célula, mas geralmente incluem:
- substratos ou nutrientes essenciais
- fatores de crescimento
- hormonas
- gases (O2, CO2)
- ambiente físico-químico (pH, pressão osmótica, temperatura)
- tipo de frasco de cultivo (dependendo se é cultura aderente ou em suspensão)
Culturas de células no século XXI
- Culturas de organóides
- Culturas de organóides de zonas específicas de cada órgão
- Organóides de fusão
Tipos de culturas de células
Origem:
- culturas primárias
- linhas celulares
Necessidade de substrato:
- aderentes
- em suspensão
Organização 2D/3D
- mono camada
- várias camadas