Hemato Flashcards
L’hématologie est communément divisée en trois sous catégories, en fonction du groupe de cellules étudiées :
• Les leucocytes
• Les plaquettes
• Les globules rouges
L’hématopoïèse :
Mécanisme par lequel l’organisme produit et remplace les éléments figurés du sang (les globules rouges (GR), les globules blancs (GB) et les plaquettes).
Lieux de l’hématopoïèse :
• Fœtale :
sac vitellin (tissu conjonctif mésoblastique) jusqu’au 2ième mois, puis le foie et la rate jusqu’au 6ième mois, pendant qu’à partir du 4ième mois s’installe l’hématopoïèse osseuse.
• Adulte :
Moelle osseuse limitée aux os courts, os plats, têtes des os longs :
1) Crâne; 20%
2) Thorax (sternum, côtes, vertèbres, clavicules,omoplates); 30%
3) Rachis lombaire et ceinture pelvienne (sacrum, os iliaques); 40%
4) Fémur; 10%
Reticulocyte
Précurseur des erythrocytes
—> contient encore ARNm résiduel
• absence de noyau, mitochondrie, ribosome, mais ont une présence résiduelle d’ARN
Les leucocytes
La famille des globules blancs
—> Possèdent noyaux, mitochondries, ribosomes et lysosomes.
• Peuvent synthétiser: protéines et lipides —> bouffeurs de sucre
• Leur besoin énergétique élevé est fourni surtout par le cycle de Krebs
• Les polynucléaires neutrophiles : 1iers à réagir en cas d’infection bactérienne.
• Les polynucléaires éosinophiles : ⬆️ dans la plupart des infections parasitaires et en cas d’allergie.
• Les polynucléaires basophiles : jouent un rôle majeur dans l’inflammation en relarguant leurs vacuoles au contact d’allergènes auxquels ils sont sensibles. ⬆️ après une vaccination, varicelle, colite ulcéreuse, certaines leucémies, etc.)
• Les lymphocytes : ‘‘mémoire’’ du système de défense de l’organisme. Ils sécrètent les anticorps qui le protègent contre les maladies. Ils se rappellent les anciennes infections et les germes (virus ou bactéries) déjà rencontrés.
• Les monocytes : prennent le relais des polynucléaires et coopèrent avec les lymphocytes en cas d’infection
Les érythrocytes
—> globules rouges (GR)
pas de noyau, mitochondrie ou ribosome
—> incapables de biosynthèse, ils dépendent de la glycolyse anaérobique (pas de cycle de Krebs) pour assurer leur survie (~120 jours)
• Contiennent l’hémoglobine (Hb) transporte l’oxygène (O2)
des poumons—> tissus périphériques
• la régulation du pH sanguin et le transport du CO2 grâce à l’anhydrase carbonique (enzyme présente à la surface des GR) qui transforme les bicarbonates en CO2 ou l’inverse (Effet de Bohr), selon les besoins du corps.
Ainsi, les GR transforment le CO2 fabriqué par les ¢ en bicarbonates, puis ils vont jusqu’aux poumons, où ils retransforment le bicarbonate en CO2
Les plaquettes :
interviennent dans la coagulation, en cas de blessure et d’hémorragie.
En s’agglutinant sur les bords de la plaie, elles forment un ‘‘bouchon’’ qui est ensuite consolidé par la fibrine.
Qu’est-ce que l’hémogramme ?
le résultat de l’étude quantitative et qualitative des éléments figurés du sang (GR, GB et plaquettes)
** 1er examen biologique utilisé pour dépister, explorer et suivre la plupart des hémopathies**
—> aussi nommé Numération Formule (leucocytaire) Sanguine (NFS)
—> désigne également la courbe qui représente les variations de diamètre des hématies au cours d’une affection
Qu’est-ce que l’hémogramme ?
le résultat de l’étude quantitative et qualitative des éléments figurés du sang (GR, GB et plaquettes)
1er examen biologique utilisé pour dépister, explorer et suivre la plupart des hémopathies
—> aussi nommé Numération Formule (leucocytaire) Sanguine (NFS)
—> désigne également la courbe qui représente les variations de diamètre des hématies au cours d’une affection
FSC
Formule sanguine complète
L’hemogramme principalement utilisé dans des conditions où le patient démontre :
• Des signes évoquant une ⬇️ d’une ou plusieurs lignées sanguines (syndrome anémique (pâleur et/ou signes d’anoxie), syndrome hémorragique, syndrome infectieux (ex.: malaria))
• Certaines situations systématiques ou bilans (grossesse, médecine du travail, médecine de dépistage, bilans pré- ou pos-opératoires, suivis thérapeutiques)
3 types d’hemogramme
Hémogramme
FSS (Hémogramme II)
FSC (Hémogramme IV)
1) Les érythrocytes totaux:
• Permet : l’évaluation de l’hématocrite, du VGM et du TGMH
• Intérêts :
Dx de certaines anémies (ex : anémie ferriprive vs anémie microcytaire de patients thalassémique)
Peut être mesuré de façon automatique par différentes méthodes :
• Impédance électrique
• Cytométrie en flux
Impédance électrique
une ¢ passera à travers la fente du tube et provoquera un déplacement d’électrolytes qui modifiera le courant mesuré
—> permet de calculer le # d’erthrocytes
anémie ferriprive vs anémie
microcytaire de patients thalassémique
• Anémie ferriprive : ⬇️ du nb de GR proportionnel à la [Hb]
• Anémie microcytaire-Thalassémie : nb de GR (N ou ⬆️) relativement au degré
d’anémie (représenté par la [Hb])
L’hémoglobine (Hb):
Variation des [Hb] selon :
• le sexe (+ ⬆️ chez hommes que chez les femmes
• l’âge (⬆️ avec l’âge et ⬇️ légèrement chez les >65 ans)
• la période de la journée (⬇️ allant jusqu’à 11% de 18h à 7h)
• conditions environnementales
• différentes conditions physiologiques et physiopathologies
Permet:
De déterminer un état anémique, un taux d’Hb :
< à la normale définit l’anémie
> à la normale est nommée polycythémie
Polycythemie
Hb > a la normale
Hb >200 g/L induit une hémoconcentration et un blocage des capillaires
Les GR contiennent un mélange d’Hb
OxyHb, CarboxyHb, métHb et certaines autres formes mineures
—> L’Hb renferme ~65 - 70 % du fer de l’organisme, soit 2,5 à 3 g
Étapes principales de la quantification de la [Hb] sur un automate :
- Lyse des GR pour libérer l’Hb
- Lecture par absorption à 540 nm (Loi de Beer Lambert)
- Attention : Un échantillon lactescent interfère avec ce dosage! On utiliseras donc le dosage de l’Ht à la place!
VGM (Indice des GR) :
• La taille des GR est caractérisée par le Volume Globulaire Moyen (VGM) et est l’indice des GR le plus utile de sa catégorie
Particulièrement utile pour permettre la classification des anémies :
• Anémie normocytaire (VGM normal)
• Anémie microcytaire (VGM ⬇️)
• Anémie macrocytaire (VGM ⬆️)
Le VGM est la valeur moyenne du volume de chaque GR établie à partir d’une courbe de distribution de ceux-ci
paramètre très stable —> Permet de guider le biochimiste clinique lors de sa validation de rapports dans différents secteurs dont celui de la biochimie générale.
—> Excellent indicateur que le prélèvement a été fait dans une ligne de soluté (⬆️ VGM - glucose rentre de façon passive dans le GR - osmose=eau suit et gonfle)
TGMH (Indice des GR) :
Teneur Globulaire Moyenne en Hémoglobine (TGMH) couleur
—> correspond à la quantité moyenne d’Hb contenue dans un seul GR
Causes principales d’une ⬇️ du TGMH; suite à une carence en :
• Fer
• Cuivre
• Pyridoxine (vitamine B6)
• Vitamine C
Intérêts :
• Sert à la classification de l’anémie (selon l’OMS)
• État hypochromique vs état normochromique (l’état hyperchromique n’existe pas! Si hyperchrome = problème analytique)
• Indice ayant un peu moins d’utilité clinique, car il suit typiquement les
variations du VGM
CGMH (Indice des GR) :
Concentration Globulaire Moyenne en Hémoglobine (CGMH)
• correspond à la [Hb] moyenne retrouvée dans 1000 mL de GR
• Intérêts : Permet d’identifier une hypochromie d’une normochromie.
On a une hypochromie, si la valeur est < 325 g/L (ceci est toutefois très rare)
Hypochromie :
Couleur pâle des GR observée au microscope optique.
Cette ⬇️ de coloration (pâleur des GR) est due au fait qu’ils contiennent moins d’Hb qu’un GR normal
L’hypochromie s’observe surtout dans :
• L’anémie ferriprive (commun) (carence en fer)
• La thalassémie (⬆️⬆️ commun) (⬇️ de synth. de l’Hb), on aura ici une ⬆️ des GR
• Possibilité de problèmes techniques (évaluer s’il y a une ⬇️ du CGMH chez plusieurs patients)
Hématocrite (Ht) :
% relatif du volume des GR circulant dans le sang par rapport au volume total du sang.
—> utilisé dans l’évaluation d’anémie et de transfusion
calculé à partir du nb total GR et du VGM :
Ht = vol. GR (c/L) x VGM (L/c)
Principalement remplacée par le dosage de l’Hb! (Moins d’erreur possible)
l’évaluation de l’anémie est moins exacte par le calcul de l’Ht que par la détermination directe de [Hb].
—> préférable d’utiliser la [Hb] plutôt que l’Ht lorsque l’on veut determiner l’anémie
Réticulocytes :
Représentent 0,5 à 2 % du nb de GR.
Le taux de réticulocytes permet de caractériser l’intensité de production de GR par la moelle osseuse (production érythroblastique)
Anémie régénérative vs Anémie non régénérative
FSC permet : (5)
- D’évaluer la quantité de GR dans le sang :
Érythrocytes et Ht - D’évaluer la grosseur du GR :
VGM - D’évaluer la quantité, la teneur et la concentration d’Hb dans les GR via :
• l’Hb
• le CGMH
• le TGMH - D’évaluer l’intensité de production des GR :
Réticulocytes - D’évaluer les autres types cellulaires sanguines:
GB et plaquette
Le frottis sanguin :
talement de sang sur une lame de microscope
Utilité :
• Observer et identifier les ¢ sanguines (tailles, formes et composition) ou autres anormalités sanguines
(ex: Immunoglobuline (Ig) d’un myélome)
• Dénombrer les ¢ sanguines
• Le frottis doit subir une coloration pour révéler certains types ¢
• Permets de repérer d’éventuels parasites (ex: l’agent du paludisme : Plasmodium falciparum)
Interprétation générale des lames :
1) Taille, forme et apparence des cellules
2) Coloration des GR (permet d’estimer la teneur en Hb)
3) Différents types de GB et leur pourcentage relatif
Interprétation GR :
Les GR sont considérés normaux/matures quand ils sont :
• Uniformes
• Ronds
• Aplatis et biconcaves (couleur rosée au centre)
• Diamètre de 7-8 μm
Anomalies des GR
Tailles (anisocytose)
• microcytes
• macrocytes
Formes (poïkilocytose)
Caractérisées par des GR :
• en forme d’oursin (échinocytes)
• de forme ovale (elliptocytes ou ovalocytes)
• en forme de larme (dacrocytes)
• en forme de faucille (drépanocytes)
• en forme fragmentée (schisocytes)
Séjour des reticulocytes
séjournent ~ 1-2 jours dans la moelle et sont libérés dans la circulation,
puis après un autre 1-2 jours, ils perdent ce qu’ils leurs restent d’ARN → GR matures
Qu’est-ce qui régule la synthèse des GR?
En fonction de la pO2, les reins régulent la synthèse de GR via la production d’érythropoïétine
ATP et GR
produisent de l’ATP (processus anaérobique) via le cycle d’Embden-Meyerhof,
—> ne consomme pas l’O2 transportée
GR transport O2
Un GR transporte ~2 x10^9 de molécules d’O2
Un GR contient ~ 250 x 10^6 molécules d’Hb
(4 molécules d’O2 / Hb)
La synthèse de l’Hb :
se réalise dans la mitochondrie du GR en formation
l’étape limitante est :
la conversion de la glycine et de l’acide succinique en ALA (delta-aminolevulinic acid ou acide delta-aminolevulinique) par la ALA synthétase en présence de vitamine B6 (synonyme: Pyridoxal!!!))
réaction est :
• Inhibée par l’Hb elle-même !!! (Retroinhibition)
• Stimulée par une hormone particulière, l’érythropoïétine !!!
Chaque GR d’adulte ‘‘normal’’ contient :
—> protéine tétramérique (unité principale et active du GR)
• ~97% d’HbA : composé de 2 chaînes alpha et 2 chaînes bêta (alpha2beta2)
• ~1,5 – 3,6% d’HbA2 : composé de 2 chaînes alpha et 2 chaînes delta (alpha 2delta2)
• <1% d’HbF : composé de 2 chaînes alpha et 2 chaînes gamma (alpha2gamma2)
(F-foetal) —> +++++ affinité pour l’O2
La fonction de l’Hb :
Dans l’HbA (alpha2beta2), l’hème :
• Est liée à chacune des 4 globines
• A un anneau porphyrine lié à un atome de Fer qui lie de façon réversible une molécule d’O2
• La forme biconcave des GR favorise l’échange d’O2 et de CO2 a/n des poumons ou des tissus avec l’Hb
L’Hb se sature en O2 a/n des capillaires pulmonaires, car :
• La pression partielle en O2 est ⬆️
• L’affinité de l’Hb pour l’O2 est ⬆️
L’Hb libère l’O2 a/n des tissus, car :
• La pression partielle en O2 est ⬇️
• L’affinité de l’Hb pour l’O2 est ⬇️
Qu’est ce que l’anémie? :
⬇️ d’un ou de plusieurs éléments composant le sang. Le plus souvent ce terme s’applique quand on constate une ⬇️ du nb des GR
—> se caractérise plus exactement par la ⬇️ de la quantité d’Hb contenue dans une unité de volume de sang
De façon fonctionnelle, l’anémie est considérée comme une insuffisance des GR de transporter l’O2 aux tissus périphériques
D’un point de vue analytique, cinq paramètres (ou composantes) peuvent être utilisées pour souligner la présence d’anémie :
• La [Hb] est le principal paramètre
• La[Ht]
• La [GR], mais moins utilisée dans la définition d’anémie
• Le bilan martial (fer, transferrine (ou TIBC), ferritine)
• La microscopie
Anémie microcytaire :
caractérisée par la présence de GR de taille inférieure à la moyenne et une fabrication d’Hb insuffisante.
Anémie normocytaire :
anomalie du nombre des GR présents dans le sang, mais la taille de ces GR est normale
Anémie macrocytaire :
présence de GR de taille supérieure à la moyenne et une fabrication d’Hb insuffisante. Le volume, le diamètre et même l’épaisseur des GR sont ↑
Anémie microcytaire causes
•Anémie ferriprive
• Anémie associée à des maladies chronique (inflammatoire)
• Certaines formes de thalassémies
• Certains variants de l’Hb
• Anémie sidéroblastique (déficience de synthèse de l’hème)
Anémies normocytaire causes
• Hémolyse aiguë
(déficience en enzyme intra- érythrocytaire)
• Anémie hémorragique
• Insuffisance rénale
• menstruations
Anémies macrocytaire causes
• Anémie pernicieuse/Biermer
• Prolifération bactérienne ⬆️ a/n intestinale
• Interférence médicamenteuse a/n intestinale
• Diète déficiente (folate, B12)
• Toxicité alcoolique
• grossesse
Classification et pathogénèse de l’anémie microcytaire : (3)
Désordre du métabolisme du fer
Désordre de la synthèse des globines
Anémie sidéroblastiques
Désordre du métabolisme du fer
Désordre de la synthèse des globines
Anémie sidéroblastiques
Hommes plus à risque
( femmes= 1 chance sur 2 (2 chromosomes X))
Désordre du métabolisme du fer c’est quoi?
on parle généralement d’une carence en fer (anémie ferriprive)
On sait que le fer est primordial afin de produire une Hb fonctionnelle, donc :
Pas de fer = Pas d’Hb = Pas de transport d’O2 = Anémie
Causes du Désordre du métabolisme du fer
carence en fer se produit lorsque l’organisme a besoin de plus de fer qu’il n’en reçoit.
Causes (liste non exhaustive) :
• Perte de sang (spoliation, hémorragie)
• Carence nutritionnelle ou malnutrition
• Grossesse (une partie du fer est transféré au bébé!)
• Trouble de l’absorption au niveau du système digestif
• Prise de certains médicaments (ex.: Aspirine à long terme)
signes et symptômes de l’anémie ferriprive :
se manifestent progressivement et peuvent passer inaperçus
Les symptômes principaux sont :
• Fatigue et perte d’énergie
• Faiblesse
• Essoufflement !!!
• Pâleur de la peau, des gencives, des lits des ongles et de l’intérieur des paupières.
• À la longue, si l’anémie est suffisamment grave, les battements du cœur peuvent s’accélérer et devenir perceptibles
le bilan martial
Composantes et paramètres du bilan martial
• Fer
• Transferrine (transporteur de Fer)
• Ferritine (réserve du Fer)
Les paramètres :
• Capacité totale de fixation du Fer (TIBC) :
quantité totale de Fer qui peut se lier à la Transferrine sérique (Fer lié + UIBC)
• Capacité de liaison au Fer insaturé (UIBC) :
quantité de Fer qui peu se lier aux sites disponibles de la Transferrine sérique
Absorption du fer favorise et inhibée
Favorise par vit C:
• Les agrumes
• Les baies
• Les choux
• La patate douce
• Les kiwis
• Les melons
• Les épinard
• Les tomates
Inhibée par:
• Le café
• Lethé
• Le jus de raisin
• Le vin
• Le lait
Résultats attendus lors d’une anémie ferriprive
Les hémoglobinopathies sont?
des maladies héréditaires de la formation de l’Hb, survenant suite à des déficits génétiques variables de la synthèse des chaînes alpha ou β.
• Ces anomalies de l’Hb se répartissent en deux groupes :
1. Les variants d’Hb
2. Les thalassémies
Hémoglobinopathies —> Variants de l’Hb
Hémoglobinopathies qualitative ou structurelles (ex: anémie falciforme)
Modifications héréditaires structurelles de chaînes isolées d’Hb (liées à des mutations des gènes).
—> Il existe plus de 900 variants de l’Hb.
L’hémoglobinopathie (HbS) la + fréquente est la drépanocytose ou anémie falciforme
Dans ce cas, il y a formation d’agrégats qui déforment la membrane des GR (forme caractéristique en faucille)
Hémoglobinopathies —> Thalassémies
Hémoglobinopathies quantitatives
Groupe de maladies héréditaires caractérisées par la ⬇️ ou l’absence de production des chaînes de globines :
• β-Thalassémie: ⬇️ synthèse de chaîne bêta
• alpha-Thalassémie: ⬇️ synthèse de chaîne alpha
• delta-Thalassémie: ⬇️ synthèse de chaîne delta
Thalassémies signes et symptômes
• En fonction du type : asymptomatique vs symptomatique
• Retard de croissance (dans les cas sévères)
• ↑ du volume du foie et de la rate
• Pâleur de la peau et ictère
plus de flexibilité avec les alpha car il y a 3 genes
+ ou - d’impact entre fct de la chaîne affectée
Variants de l’Hb signes et symptômes
• En fonction du type : asymptomatique vs symptomatique
• La gravité de la situation dépend de la mutation génétique et varie d’une personne
à l’autre
• Dans les cas graves : Anémie falciforme (GR en faucille) !!!
Analyses demandées pour Désordre de la synthèse des globines
Évaluation de l’Hb (des analyses de laboratoire)
Électrophorèse : principe de séparation des Hb
1) Isolement et lavage des GR à partir d’un prélèvement sur sang total. Pas un sérum ou un plasma!!!!
2) À partir d’une solution hémolysante, on effectue la libération de l’Hb.
3) En électrophorèse capillaire, il y aura aspiration de l’hémolysat par le système
4) Les protéines (ici l’Hb) seront soumis à un courant électrique afin de favoriser la séparation des différents types d’Hb. La séparation de celles-ci se fera en fonction des charges de chacune des Hb.
Troubles sidéroblastiques c’est quoi?
anémies dues à une insuffisance de synthèse de l’Hb pour une raison autre que la carence en fer
• Maladie rare, récessive liée au sexe (chromosome X !!!) qui résulte d’un trouble de synthèse de l’hème par déficit ou ⬇️ de l’activité de l’acide delta aminolévulinique (ALA) synthétase !!!
• Forte accumulation de fer sérique et dans les mitochondries des érythroblastes (qui peut être observée avec une coloration au microscope).
On les appelle les sidéroblastes! D’où le nom d’anémie sidéroblastique.
Résultats attendus lors d’une anémie sidéroblastique
Les porphyries congénitales
dues à une carence d’origine génétique en enzymes permettant la synthèse des hèmes
—> pathologies liées à l’accumulation dans le sang et les tissus de porphyrines
—> provoque des troubles systémiques et des intoxications dont les symptômes sont variables
—> légendes de Vampires et loups-garous
Les signes et symptômes de porphyries
• Une épidermolyse (destruction de l’épiderme) à la suite d’expositions à la lumière solaire.
• Une anémie et ses symptômes (causée par une carence en hème, autrefois traitée en buvant du sang)
• Une allergie à l’allicine (un des principes actifs de l’ail)
• Une nécrose de tissus conjonctifs, dont les gencives, faisant ressortir les dents.
• Une croissance anormalement rapide des cheveux
• Une coloration des dents et ongles virant vers le rouge (les porphyrines exposées à la lumière sont des pigments violets-rouges)
• Troubles psychiatriques (ex.: La lycanthropie clinique est une maladie dans laquelle le patient se croit transformé en loup).
Déficience en enzyme intra-érythrocytaire c’est quoi
désordres associés à des déficiences génétiques qui ont comme résultat une ⬇️, voir un dérèglement du métabolisme intra-érythrocytaire (particulièrement la voie de la glycolyse !!!
• Les GR sont dépendants de la glycolyse anaérobie pour leurs principales fonctions.
• Plusieurs enzymes permettent de maintenir l’intégrité métabolique intra-érythrocytaire a/n de la :
• Fourniture énergétique : Pyruvate kinase, Hexokinase
• Protection contre les oxydations : G-6-PD, Glutathion réductase/synthase
métabolisme énergétique des GR qu’en est-il?
• Un seul substrat : le glucose !!!
• Une voie de synthèse de l’ATP : glycolyse anaérobique et donc, n’utilise pas l’O2 transporté
• Entrée du glucose dans les GR par diffusion passive
• pas organite intracellulaire (noyau, mitochondries, R.E.)
• Les ATP produits servent principalement à :
• La phosphorylation du glucose
• Maintenir l’intégrité osmotique (pompe Na+/K+)
Différentes anomalies du métabolisme des GR ont été décrites a/n (3)
- Des voies glycolytiques
- Des enzymes du catabolisme des purines et pyrimidines
- Membranaire :
• La pompe H+ ATP-dépendante
• Des enzymes modulant les phospholipides membranaires
• La méthémoglobine réductase (permet de réduire le fer oxydé en fer réduit afin de pouvoir transporter l’O2)
Voie d’Embden –Meyerhoff : rôle?
(glycolyse anaérobie): Plusieurs enzymes interviennent en cascade dans cette voie glycolytique qui transforme une molécule de glucose en pyruvate.
L’objectif ici est de générer l’ATP et le NADH
Voie des hexoses monophosphates rôle?
(shunt des pentoses) :
Cette voie sert principalement à la production de (NADPH) utilisée pour la réduction du glutathion
Le NADPH est un cofacteur essentiel de la glutathion réductase, l’enzyme qui réduit le glutathion oxydé (GSSG) en glutathion réduit (GSH). Ce dernier est essentiel au maintien de l’état redox de la ¢.
—> protection des GR
Voie de Rappoport-Luebering rôle?
Voie contournée de la glycolyse.
Cette dernière permet la production de 2,3-DPG qui permet de moduler l’affinité de l’Hb pour l’O2
Le déficit en G-6-PD bloque quoi?
bloque la 1ère réaction d’oxydation de la voie des pentoses phosphates.
Ainsi, la sous-production de NADPH qui en résulte, réduit fortement les capacités ¢ à lutter contre le stress oxydant.
