Gedächnisprotokoll 20.02.19 Flashcards
Richtig / Falsch:
- RNA Pol2 hat 2 große und 2 - 5 kleine Untereinheiten
- CTD hat immer 52 Repeats
- Ser2 und Ser5 müssen hyperphosphoryliert vorliegen, damit es zur Transkription kommen kann
- CDK7 phosphoryliert Ser2
- die RNA Pol2 ist so lange im Paused-Zustand bis pTEFb die Faktoren NELF und DSIF phosphoryliert
- falsch - 12 UE
- falsch - speziesspezifisch; Mensch: 52 Repeats; Hefe: 26 Repeats
- richtig
- falsch - Ser2 wird duch pTEFb phosphoryliert
- richtig - NELF löst sich ab, DSIF wird zum positiven Elongationsfaktor (aber pTEFb mus nicht dissozieren, da Positivfaktor sowie DSIF, der phophoriliert wird, nicht dissoziert?)
Richtig / Falsch:
- TFIID hat Untereinheiten TBP und Ubiquitinligase
- alleinige Aufgabe von TFIID ist die Bindung an TATA-Box in RNAP2 core Promotor
- Bindung von TBP induziert Beugung der DNA und bewirkt Dissoziation von Repressoren
- Die Histonmarks können sich ändern während RNAP2 aktiv ist
- richtig - enthält TBP und TAFs (eine Histonacetyltransferase und Ubiquitinligase-Funktion)
- falsch - TBP für Bindung an TATA-Box, TAF mit o.g. Funktionen
- richtig - TFIID (mit TBP) bindet -> Beugung DNA -> Entfernung TFIIB ermöglicht Transkription (aber dies geschieht doch nicht aufgrund der Bindung von TFIID?)
- ? Ja, weil die Helix nur dort entwunden wird, wo die RNA Pol trankskribiert und sie danach wieder geschlossen wird?
Richtig / Falsch:
- Ein Nukleosom setzt sich aus je 2 gamma-H2AX, H2B, H3 und H4 zusammen
- welche Bedeutung haben bestimmte marks?
- den Histon Code-dekodierende Proteine erkennen die Marks über LxxLL
- Euchromatin ist der für Transkription zugängliche Teil des Chromatins
- Heterochromatin wird gebildet durch die massive Bindung von HP1
- Acetylierung ist wichtig für Chromatin Assembly
- falsch - gamma-H2AX = phosphoryliertes H2AX; Nukleosom = 2x(H2A, H2B, H3, H4)
- wichtig für Acetylierung / Methylierung und dadurch Formation von Euchromatin / Heterochromatin
- richtig - TFs erkennen CoA durch LxxLL; CoR durch LXXXIXXXI/L (falsch: weil nur CoA LxxL erkennt?)
- richtig
- richtig - Heterochromatin-Protein 1
- falsch- acetylierte Lysylreste im aktiven Chromatin ->Disassembly
RNA Strukturelemente
- Wie sieht ein Hairpin aus?
- Wie sieht ein symmetric internal loop aus?
- eine 3 Nt bulge RNA?
Es waren Bilder zu sehen, die ich hier leider nicht einfügen kann und man sollte sie benennen. Guckt euch die eine Folie mit den Strukturelementen an ;)
- Beschreibe den Aufbau einer Riboswitch-kontrollierten mRNA ausgehend vom 5’-Ende bis zum 3’-Ende der mRNA.
- Benenne die wesentlichen Strukturelemente eines Riboswitch.
- Riboswitch-kontrollierte mRNA setzt sich aus drei Abschnitten zusammen:
- 5‘-untranslatierter Bereich (5‘ untranslated region, 5‘-UTR)
- Protein-kodierender Bereich beginnend mit dem Startkodon (AUG)
und endend mit dem Stoppkodon (hier UAA) - 3‘-UTR - Aptamer-Domäne, Switching Sequenz, Expression Platform
RNA-Thermometer - richtig / falsch
- RNA-Thermometer kodieren für Stressgene
- RNA-Thermometer für Virulenzgene sind Riboswitches
- cspA ist ein RNA-Chaperon und verhindert die Ausbildung von sekundär- und Tertiärstrukturen in mRNA
- cspA-Gen wird über Kissing hairpin stabilisiert
- cspA Funktion: Aufrechterhaltung Transkription und Translation
- Falsch - Kontrolle der Expression verschiedener Stress-Gene
- Falsch- aber das cspA cold shock Thermometer von E.coli ist ein Riboswitch
- Falsch- verhindert Ausbildung unerwünschter 2D und 3D-Strukturen
- falsch - Stabilisierung des Thermosensors durch Pseudoknoten
- richtig
sRNA - richtig / falsch
- Haben mehrere mRNA als Target
- Führen zur Transkriptionsaktivierung, Translationsinhibition und / oder mRNA Degradierung
- Die PNPase im Degradosom baut die sRNA in 3‘ -> 5‘ - Richtung ab
- RNase 3 generiert Produkte mit 5‘ Phosphat und 3‘ Ende mit 2 Nt Überhang
- richtig - binden verschiedene mRNA unspezifisch
- falsch - Translationsinhibition & mRNA Degradation ( oft gekoppelt) und Translationsaktivierung
- richtig - Exonuklease, Degradation von ssRNA zu Monoribonukleotiden
- richtig - Degradation von dsRNA (aber nicht in smallRNA)
as RNA - richtig / falsch
- regulieren unter anderem Plasmid-Stabilität
- Gene können auch für Proteine kodieren
- haben mehrere mRNA Targets
- nicht vollständig komplementär zur Zielsequenz
- Regulation auf Ebene der Transkription, der mRNA-Stabilität, der Translation
- trans-kodiert
- richtig
- falsch
- falsch - im Gegensatz zu sRNA nur ein Target, spezifische Bindung
- falsch
- richtig
- falsch - sRNA ist trans-kodiert, asRNA ist cis-kodiert (in gleicher DNA-Region lokalisiert, auf gegenüber-liegendem Strang)
siRNA - richtig / falsch
- wurde in Pro- & Eukaryoten beobachtet
- in Säugetieren kann eine unspezifische Immunantwort gegen lange dsRNA stattfinden
- Dicer erzeugt eine siRNA mit 3‘OH und 5‘Phosphat
- die siRNA, die an RISC bindet besteht aus guide- und passenger-strand, wobei der sense an die mRNA bindet
- die mRNA wird 10 Nt von ihrem 3‘Ende entfernt gespalten
- falsch - nur in Eukaryoten ( Außnahme: z.B. Saccharomyces cerevisae)
- richtig
- richtig
- falsch- dsRNA wird von RISC gebunden, passenger-Strang (sense) wird entfernt, komplementäre Bindung an Target-mRNA mit Guide-Strang (antisense)
- falsch - Zwischen dem 10 und 11 Nukleotid vom 5‘Ende
Gewebsspezifische Promotoren - Zuordnung von Gewebe und Promotor
Gewebe: Muskel, Leber, Tumor
Promotoren : Albumin, Myosin light chain 1, Afetoproteine, DF3/MUC1
- Leber - Albumin
- Muskel - Myosin light chain 1
- tumorspezifisch -Tyrosin Kinase (B16 Melanom)
- DF3/MUC1 (Brustkrebs)
- Afetoprotein (Hepatom)
HPV - richtig / falsch
- das Sterben junger Mädchen hat sich in Deutschland seit der Einführung der Impfung deutlich erhöht
- Alle Kondylome gehen von allein weg
- das Virus integriert ins Genom (keine Ahnung was die Frage hier eigentlich ist)
- Impfung beugt Krebsstufen vor
- die Infektion kann chronisch persistieren
- der Impfstoff ist ein lebend-Vakzin
- falsch - gesunken
- falsch - kann spontan verschwinden oder persistieren
- richtig - Integration des viralen Genoms an E2; Integration des Virusgenoms führt zu Transformation, keine Replikation
- ?? „In klinischen Studien 100% Schutz vor …Kondylomen. Dadurch erwartete Reduktion der behandlungsbedürftigen Krebsvorstufen um 60 %…Kein formaler Nachweis, dass Impfung vor Krebsentstehung schützt!…Schutz ist aber naheliegend.“ -> also richtig?!
- richtig - Infektion der Basalzellen
- falsch - Totimpfstoff; keine effziente Virusvermehrung in Zellkultur bei HPV (dies ist eine Voraussetzung für Lebendimpfstoffe)
Für welche 2 Krankheiten / Gendefekte sind in Europa Gentherapien zugelassen und welcher virale Vektor wird dabei verwendet?
- X-SCID = severe combined immundeficiency syndrome, „bubble boy disease“
- Interleukin-2 Rezeptorgen gamma-Kette defekt -> wenig / keine reifen T-Zellen
- Gentransfer über retroviralen Vektor
(Ich glaube, es ist noch nicht 100% erlaubt in EU)
- ADA SCID; ADA = lack of adenosine
- Adenosin Desaminase defekt
- Absterben von Immunzellen -> Immundefizienz
- intaktes Gen wird über retroviralen Vektor in hemapoetische Stammzellen eingebracht
- lentiviraler Vektor (Gattung innerhalb der Retroviren) - Glybera R gegen Lipasen-Insuffizienz bzw das fehlende Lipoprotein bei familiärer Hypercholesterinämie in Form eines rAAV
- Luxturna gegen vererbte Blindheit/frühkindliche Netzhautdystrophie - AAV (auf seinen Folien)
- Kymriah: Car-T-Zelltherapie gegen Akute lymphatische Leukämie (ALL) (auf seinen Folien) - Vektor?
mRNA Vakzine - richtig / falsch
- Sind anwendbar gegen Krebs
- Werden gegen Influenza A erprobt
- Sind stabiler als DNA
- Können ins Genom integrieren
- Sind leicht modifizierbar
- Richtig - systemische RNA in dendritischen Zellen -> antivirale Abwehr in Krebsimmuntherapie
- Richtig
- Falsch: nicht-stabilisierte RNA-Moleküle werden schnell durch Enzyme abgebaut, RNA kann z.B mit Protamin (Arg-reichtes DNA-bindendes Protein) stabilisiert werden
- Falsch - nur DNA-Vakzine können sich ins Wirtsgenom integrieren (https://www.trillium.de/zeitschriften/trillium-immunologie/archiv-trillium-immunologie/trillium-immunologie-ausgabe-2019/heft-32019/aus-der-grundlagenforschung/design-und-funktionsweise-von-mrna-basierten-impfstoffen-zum-schutz-vor-infektionskrankheiten.html)
- falsch: DNA Vakzine lassen sich beliebig modifizieren
B-Zell-Differenzierung richtig / falsch
- B-Zellen produzieren membranständige IgM da wenig CstF und viel hnRNP
- Plasmazellen produzieren membranständige IgM da wenig CstF und viel hnRNP
- B-Zellen produzieren sekretorische IgM da viel CstF und wenig hnRNP
- Plasmazellen produzieren sekretorische IgM da viel CstF und wenig hnRNP
- Richtig - B-Zellen haben Antikörper auf Membranoberfläche
- Falsch
- Falsch
- Richtig - Plasmazellen sekretieren Antikörper
Alternatives Spleißen ist wichtig und gibt diverse Produkte, die ganz unterschiedliche Proteine ergeben.
Nenne 2 Beispiele
- Alternat. Spleißen von Troponin
- > alpha-Troponin
- > beta-Troponin - SMN2 - spinale, muskuläre Atrophie
- > kann zu normalem SNM-Transkript gespleißt werden
- > kann zu SNM(delta)7-Transkript gespleißt werden