Final - Manuel de TP Flashcards
Définit moi un milieu sélectif.
Permet la croissance de certaines espèces bactériennes et inhibe la croissance d’autres.
Définit moi un milieu différentiel.
Permet le distingué certains traits ou caractéristiques d’espèces bactériennes.
Que signifie la caractérisation par “aliment+ ou -“ Ex: lactose+, mannitol-, etc.
+ : capable de digérer
- : incapable de digérer
donc lactose +: capable de digérer et métaboliser le lactose.
Quel gélose permettrait d’isoler les bactéries gram - dans un mélange bacétrien?
Comment?
- Le milieu MacConkey (McC)
- Le violet cristal et les sels biliaires inhibe la croissance de bactéries gram +
Les Enterobacteriaceae sont généralement:
a: anaéorbiques facultatives
b: anaéorbiques
c: aérobiques
d: hypoxiques
a: anaéorbiques facultatives
Donne moi une définition et un autre mot pour une bactérie “hypoxique”.
Une bactérie microaéorphile.
Elles aiment un faible taux d’oxygène dans leur environnement.
Quelle est la formule pour calculer le nombre d’unités viables par mL? (NUV/mL)
Oui il peut y avoir des calculs à l’exam… 🥲
nombre de colonies
_____________________
Volume * Dilution
S’il y a 118 colonies sur une gélose et que t’as étendu 0,2mL du mélange dilué par un facteur de 10-5, combien il y a-t-il d’unités viables par millilitres?
5,9*107 UV/mL
Quel est l’utilité d’un tube Durham?
S’il y a dégagement de gaz par la bactérie une bulle de gaz est formé dans le tube Durham.
Si un bouillon lactosé est ensemencé et que le bouillon vire jaune et une bulle est formé dans le tube Durham, que peut on conclure?
(question exam final 2023)
Que le bactérie est capable de fermenter le lactose ce qui cause un dégagement de gaz.
Quelles sont les réactions que l’on peut observer dans un bouillon lactosé?
permet de mettre en évidence l’utilisation d’un sucre, le lactose, comme source de carbone et d’énergie par la bactérie. Si la bactérie peut dégrader ce sucre, il y a production d’acide qui est mis en évidence par un indicateur de pH présent dans le milieu. Il y a alors changement de couleur du milieu
Quelles sont les réactions que l’on peut observer dans une gélose sulfure, indole, motilité (SIM)?
Quel réactif doit être ajouté pour détecter la présence d’indole?
(question exam final 2023)
- Culot noir: Production de H2S (H2S+)
- Absence de culot noir: (H2S-)
- Croissance uniquement sur la ligne d’ensemencement: motilité-
- Croissance partout dans la gélose: motilité+
- Suite à l’ajout du réactif de Kovacs, formation d’un composé rouge vif: Inodole +
- Le réactif de Kovacs est jaune: Inodole -
Dans une gélose SIM à partir de quoi les bactéries peuvent faire de l’indole
Le tryptophane
Quelles sont les réactions que l’on peut observer dans une gélose citrate?
- Reste vert: pH acide, Citrate -
- Devient bleu, Citrate +
Quelles sont les réactions que l’on peut observer dans une gélose à l’urée de Christensen?
- Incolore: Urée - (pas d’uréase)
- rose saturé: Urée + (uréase)
Quelles sont les réactions que l’on peut observer dans une gélose phénylalanine désaminase (PAD)?
Que faut-il ajouter à cette dernière pour observer une réaction?
- Une coloration verte du réactif: (PAD+)
- Une coloration jaune du réactif: (PAD-)
- Du FeCl3
Comment fonctionne le caractère différentielle de la gélose mannitol-sel (MSA)?
La dégradation du mannitol (Mannitol+) crée un changement de pH dans le milieu faisant réagir l’indicateur de pH de la gélose pour devenir jaune.
Mannitol- : gélose reste rouge
Comment fonctionne le caractère différentielle de la gélose MacCokney (McC)?
La gélose contient du lactose. Elle possède un indicateur de pH.
Lactose+ : colonies rouges
Lactose- : colonies jaunes
Quel est agent sélectif des géloses MSA?
(question exam final 2023)
MSA: mannitol-sel agar
la haute teneur en NaCl (7,5%)
Tu fait une coloration d’un frotti sur une lame provenant d’une souche d’une gélose MacConkey. Quand tu l’observe au microscope tu vois des bacilles violettes. Qu’est-ce qui a pu arrivé lors de la coloration qui à causé ce résultat.
Explique.
(question exam final 2023)
Il y a eu un problème lors de la décoloration à l’alcool puisque seulement les bactéries gram + devrait être coloré violette. Cependant, la McC inhibe la croissance des gram +, donc la seul manière qu’il pourrait y avoir des bactéries violettes est si la décoloration du violet cristal à l’alcool n’a pas été faite.
À quoi sert une contrôle négatif?
(question exam final 2023)
confirmer une application adéquate des techniques sur les échantillons et l’absence de contaminants dans les réactifs.
Quel milieu est idéal pour effectuer l’examen de la morphologie coloniale d’une souche bactérienne?
Une gélose neutre/normale (GN)
On veut compter le nombres d’unités viables et que nous possédons une série de dilution de 10-1 à 10-4. Après avoir étaler 0,1mL de la dilution 10-4 on n’observe aucune colonies. Quel est la prochaine étape logique?
Étaler 0,1mL de la dilution de 10-3.
Quel caractéristique macroscopique permet d’évaluer la concentration en bactérie dans un bouillon?
La turbidité
Quelles sont les types d’hémolyses que l’on peut observer sur gélose?
(nom et définition)
𝛾: absence d’hémolyse (rouge)
⍺: hémolyse partielle (verdâtre)
β: hémolyse totale (incolore)
Si sur une gélose sang autour de la première strie tu observe un couleur verdâtre, mais qu’autour de la seul colonie isolée il n’y a pas de changement de couleur, comment peut-on caractériser l’hémolyse?
Pourquoi?
Hémolyse 𝛾 (absence)
toutes caractéristiques morphologiques ou métaboliques prisent de colonies de bactéries doivent être faites de colonies isolées
Vrai ou Faux: Une bactérie qui est gram+ est nécessairement un coccus.
Faux
Avec quoi réagit le FeCl3 pour tester positif dans la gélose PAD?
Avec l’acide phényl-pyruvique, le sous-produit de la dégradation de la phénylalanine.
Qu’est-ce qu’un milieu de culture ?
Un milieu de culture est un mélange de substances nutritives qui fournit une source d’énergie, de carbone, d’azote, de phosphore, de soufre et de minéraux essentiels à la croissance et à la multiplication des microorganismes.
Quelle testes permettent de déterminer la motilité bactérienne? (2)
- Gélose SIM
- Observation à l’état frais
Quelle est la différence entre un milieu de culture liquide et un milieu solide ?
Un milieu liquide est un bouillon qui permet aux cellules microbiennes de se disperser dans l’eau, tandis qu’un milieu solide contient de l’agar qui permet aux cellules de se multiplier à la surface et de former des colonies visibles.
Comment s’appelle le site antigénique reconnu par les anticorps?
Épitope
Pourquoi l’agar est-il utilisé dans les milieux solides ?
L’agar est utilisé car il n’est pas métabolisé par la plupart des bactéries et il fournit un support mécanique pour la croissance bactérienne après avoir été liquéfié et refroidi à environ 42°C.
Comment détermine-t-on la concentration relative des puits périphériques dans la technique d’Ouchterlony?
Plus la ligne du précipité est près du puit central (anti-gènes), plus le puit périphérique est concentré.
Si tu ne te souviens pas c’est quoi : https://www.google.com/url?sa=i&url=https%3A%2F%2Ftice.agrocampus-ouest.fr%2Fpluginfile.php%2F41798%2Fmod_glossary%2Fattachment%2F519%2FTest%2520dOuchterlony.pdf&psig=AOvVaw0dqW1AWaj47Z5lNw_D9C6W&ust=1713809412563000&source=images&cd=vfe&opi=89978449&ved=0CBIQjRxqFwoTCLC90Nzz04UDFQAAAAAdAAAAABA6
Quelle est l’importance de la stérilité dans les milieux de culture ?
Les milieux de culture doivent être stériles pour éviter la contamination par des microorganismes étrangers qui pourraient interférer avec l’expérience ou l’analyse des microorganismes d’intérêt.
Explique le phénomène où l’on ne voit pas de ligne de précipité dans un puit à forte dilution.
La réaction est en postzone. Il y a trop d’antigène. Tous les épitopes sont liés à un antigène de cellule qui n’est lié à aucun autre AC, ce qui empêche la formation de réseau.
Qu’est-ce qu’un milieu de culture ?
Un milieu de culture est un mélange de substances nutritives qui fournit une source d’énergie, de carbone, d’azote, de phosphore, de soufre et de minéraux essentiels à la croissance et à la multiplication des microorganismes.
Comment stérilise-t-on un milieu de culture ?
La stérilisation se fait généralement par autoclavage, qui utilise de la vapeur d’eau à 121°C pour éliminer tous les microorganismes.
Quelle est la différence entre un milieu de culture liquide et un milieu solide ?
Un milieu liquide est un bouillon qui permet aux cellules microbiennes de se disperser dans l’eau, tandis qu’un milieu solide contient de l’agar qui permet aux cellules de se multiplier à la surface et de former des colonies visibles.
Qu’est-ce qu’une culture en suspension ?
Une culture en suspension est le résultat de la multiplication des cellules microbiennes dans un milieu liquide jusqu’à former une suspension qui donne une apparence trouble au milieu.
Pourquoi l’agar est-il utilisé dans les milieux solides ?
L’agar est utilisé car il n’est pas métabolisé par la plupart des bactéries et il fournit un support mécanique pour la croissance bactérienne après avoir été liquéfié et refroidi à environ 42°C.
Comment se forment les colonies microbiennes sur un milieu solide ?
Sur un milieu solide, les cellules se déposent et se multiplient à la surface, poussant les cellules filles vers la périphérie et formant des colonies visibles provenant d’un seul microorganisme.
Quelle est l’importance de la stérilité dans les milieux de culture ?
Quelle influence la forme des cellules et le milieu de culture ont-ils sur la morphologie des colonies ?
La forme des cellules, leur mode de division et la nature du milieu influencent la morphologie des colonies. Différentes espèces peuvent présenter des caractéristiques morphologiques distinctes.
Qu’est-ce qu’une culture confluente ?
Une culture confluente est le résultat d’un dépôt excessif de microorganismes à la surface d’un milieu solide, où les colonies ne sont pas isolées mais forment plutôt un tapis à la surface du milieu.
Quel type de microscope est généralement utilisé dans les laboratoires de travaux pratiques pour observer les microorganismes ?
Le microscope optique à fond clair, également connu sous le nom de microscope ordinaire, est couramment utilisé.
Quels aspects de la morphologie et de l’arrangement cellulaire des microorganismes peut-on observer au microscope optique ?
On peut observer la forme des microorganismes (coccus, bâtonnet, vibrio, spirille, etc.) ainsi que leur arrangement cellulaire (isolé, paire, tétrade, grappe, chaînette, etc.).
Pourquoi est-il important d’avoir une concentration suffisante de bactéries lors de la préparation microscopique ?
Une concentration suffisante permet d’assurer une fréquence moyenne d’une bactérie par champ microscopique, ce qui facilite l’observation et l’identification.
Concentration idéale : 1,2 X 10^6 bactéries par millilitre
Quel est l’avantage principal de la coloration des microorganismes pour l’examen microscopique ?
La coloration augmente le contraste optique entre le microorganisme et le milieu ambiant, ce qui facilite l’observation.
Qu’est-ce qu’un frottis bactérien et comment est-il préparé ?
Un frottis bactérien est préparé en étalant une petite quantité de culture bactérienne sur une lame et en la laissant sécher à l’air. Il est ensuite fixé à la lame par la chaleur.
Quelle est la différence entre la coloration simple et la coloration de Gram ?
La coloration simple utilise un colorant basique comme le bleu de méthylène pour colorer tous les microorganismes de manière uniforme.
La coloration de Gram est une méthode différentielle qui permet de distinguer les bactéries en fonction de leur affinité pour le colorant.
Pourquoi la coloration peut-elle modifier la morphologie des microorganismes ?
Bien que la coloration facilite l’observation, elle peut également exercer un stress sur les microorganismes et parfois modifier légèrement leur morphologie.
Quels sont les 4 changements morphologiques observé chez des cellules infectées? (4)
- grande inclusion intracytoplasmique causant le noyau à être repoussé aux parois de la cellule.
- Inclusion virale nucléaire (noyau prends une forme d’étoile)
- Inclusion virale nucléaire (chromatine repoussé aux parois de du noyau en halo clair. Centre noir est l’inclusion virale)
- Formation de syncytium par fusion de plusieurs cellules pour donner une cellule géante multinucléée.
Images se retrouvent à la séance 9 exercice C
Qu’est-ce que la croissance confluente et comment l’évite-t-on ?
La croissance confluente se produit lorsque les bactéries sont trop proches les unes des autres et forment un tapis continu. Pour obtenir des colonies isolées, on étale l’inoculum en dilution en stries sur la gélose, en commençant par un secteur pour diminuer progressivement la concentration des bactéries.
Comment procède-t-on à l’étalage en stries ?
On commence par étaler un tiers de la gélose, puis on flambe le fil pour éliminer les bactéries et on laisse refroidir. Ensuite, on étale des bactéries des dernières stries effectuées, en réduisant la concentration des bactéries, et on continue sur un deuxième puis un troisième tiers de la gélose, en flambant à nouveau le fil entre chaque série de stries.
Quel est l’objectif de la coloration de Gram ?
La coloration de Gram est une technique différentielle qui permet de distinguer les bactéries Gram positives des Gram négatives en fonction de la structure de leur paroi cellulaire, ce qui a également des implications pour leur sensibilité aux antibiotiques.
Quelles sont les étapes de base de la coloration de Gram (4) ?
- Coloration avec le violet de gentiane,
- Fixation du colorant avec du lugol,
- Décoloration à l’alcool à 95%,
- Contre-coloration avec la safranine.
Comment les bactéries Gram positives se distinguent-elles après la coloration de Gram ?
Les bactéries Gram positives restent violettes après la coloration car leur paroi cellulaire épaisse retient le complexe violet de gentiane-lugol même après la décoloration à l’alcool.
Qu’arrive-t-il aux bactéries Gram négatives pendant la coloration de Gram ?
Les bactéries Gram négatives perdent le complexe violet de gentiane-lugol pendant la décoloration à l’alcool et apparaissent incolores, puis elles sont contre-colorées en rose par la safranine.
Quelles sont les caractéristiques de la paroi cellulaire des bactéries Gram positives ?
La paroi des bactéries Gram positives est constituée d’une épaisse couche de peptidoglycane et d’acides teichoïques, qui retiennent le colorant violet lors de la coloration de Gram.
Quelle est la composition de la paroi cellulaire des bactéries Gram négatives et comment cela affecte-t-il leur coloration ?
La paroi des bactéries Gram négatives est plus complexe, avec une mince couche de peptidoglycane recouverte d’une membrane externe contenant des lipopolysaccharides (LPS). Cette structure ne retient pas le violet de gentiane après la décoloration, permettant la contre-coloration en rose.
Quelle est la fonction des lipopolysaccharides (LPS) dans la paroi des bactéries Gram négatives ?
Les LPS ont de nombreuses fonctions, notamment en tant que barrière de protection et dans la réponse immunitaire. Ils sont importants dans la virulence de certaines bactéries et peuvent être impliqués dans la pathogénicité.
Quels sont les milieux sélectifs McC et MSA et quelle est leur utilité ?
MacConkey (McC) et mannitol-sel agar (MSA)
Ces milieux favorisent la croissance de certaines espèces au détriment d’autres en inhibant ou en n’offrant pas les conditions nécessaires pour la croissance de certains microorganismes indésirables.
Comment le milieu MacConkey sélectionne-t-il certaines bactéries ?
Le milieu MacConkey contient du violet cristal et des sels biliaires qui inhibent la croissance des bactéries Gram positives et permettent la différenciation des bactéries lactose positives qui fermentent le lactose et produisent des colonies mauves, des lactose négatives qui restent incolores.
Quelle est la particularité du milieu MSA ?
Le milieu MSA contient 7,5% de NaCl, qui est un taux de sel élevé limitant la croissance à certains genres, comme Staphylococcus. Il contient également du mannitol et un indicateur de pH qui permettent de détecter les bactéries qui fermentent le mannitol en les colorant en jaune.
Quelle est la différence entre un milieu sélectif et un milieu différentiel ?
Un milieu sélectif inhibe la croissance de certains microorganismes tandis qu’un milieu différentiel contient des substances qui révèlent la présence ou l’absence d’un trait spécifique comme la capacité de fermenter un sucre spécifique.
Qu’est-ce que le microbiote et le microbiome ?
Le microbiote désigne l’ensemble des microorganismes (bactéries, virus, champignons, etc.) présents dans un environnement spécifique comme le corps humain. Le microbiome se réfère à l’ensemble des gènes de ces microorganismes.
Où peut-on trouver des microorganismes dans notre environnement ?
Les microorganismes sont omniprésents et peuvent être trouvés dans l’air, l’eau, le sol, chez les plantes et les animaux, ainsi que dans et sur le corps humain.