Doenças Sexualmente Transmissíveis - Diagnóstico Laboratorial Flashcards
quais sao as caracteristicas da gonorreia ?
Neisseria gonorrhoeae
Cocos Gram-negativos
Imóveis
Ordem Neissereaceae
Família Neisseriaceae
Género Neisséria
Patogénico humano
Vagina, mucosa uretral e rectal, garganta
Mecanismos especiais de adesão
Produtores de protease de IgA, contra Ac do hospedeiro
Invadem as células epiteliais não ciliadas
Internalizam a bactéria
Multiplicam-se no interior dos vacúolos protegidos contra os Ac e fagocitose
Vacúolos fundem-se com a membrana basal até aos tecidos conjuntivos
As bactérias podem invadir a corrente circulatória
Disseminar-se até outras partes do corpo
quais sao as amostras de secrecoes na gonorreia ?
Canal endocervical
Uretra masculina e feminina
Orofaringe
Canal anal
Conjuntiva
Articulações, lesões e sangue
qual é o diagnostico da gonorreia ?
Microscopia
Gram negativos
Diplococos
“riniformes”
“grãos de café”
Cultura de amostras adequadas – Meios de Cultura:
Thayer Martin modificado
Martin Lewis
NC (New York City)
Oxidase
Provas bioquímicas
quais sao as caracteristicas da sifilis ?
Treponema pallidum
Ordem Spirochaetales
Família Treponemataceae
Género Treponema
Não cultiva “in vitro”
Microscopia
Serologia
como sao as amostras da sifilis ?
Limpar a superfície da lesão com gazes humedecidas em solução salina.
Remover a crosta evitando sangrar.
Pressionar a base da lesão até surgir um fluido claro e colher com uma pipeta Pasteur
ou capilar.
Colocar uma gota numa lâmina, cobrir com lamela e examinar imediatamente em
microscópio de fundo escuro.
como é a microscopia da sifilis ?
Microscopia
Exsudado do cancro primário deve ser examinado por:
Microscópio de campo escuro imediatamente após a colheita
O material tem de ter espiroquetas móveis;
As espiroquetas não sobrevivem ao transporte; detritos tecidulares podem ser confundidos com espiroquetas;
Lesões orais e rectais não devem ser examinadas por este método, porque espiroquetas não-patogénicas podem contaminar a amostra.
Microscópio UV
Anticorpos anti-treponema marcados com fluoresceína são utilizados para corar as
bactérias
Este teste é específico para treponemas patogénicos
Pode ser usado para lesões rectais e orais
As espiroquetas imóveis também coram, logo os espécimenes não têm de ser
observados imediatamente após a colheita
Para biopsias: impregnação com prata
como é a serologia da sifilis ?
(é diagnosticada não propriamente num laboratório de microbiologia e sim de imunoserologia)
São divididos em testes não específicos e específicos:
Testes não específicos:
Venereal Disease Research Laboratory (VDRL)
Teste Rapid Plasma Reagin (RPR)
Testes específicos
Fluorescent Treponemal Antibody Absortion (FTA-ABS)
Treponema Pallidum Hemaglutination Assay (TPHA)
o que sao os testes nao especificos (sifilis) ?
Os antigénios não têm origem no treponema, mas são extratos de tecidos normais de mamíferos.
* A cardiolipina é o antigénio usado e é derivado do coração de bovino. Permite a deteção de Ac IgM e IgG anti-lípidos formados no doente, em reposta a material lipídico presente na superfície do T. pallidum e proveniente das lesões celulares, causadas pela infeção.
* Positivos 4-6 semanas após a infeção.
* Positivos 1-2 semanas após aparecimento do cancro primário.
* A positividade declina após o tratamento eficaz da doença primária ou secundária e na
sífilis terciária.
* Resultados positivos devem ser confirmados por testes específicos.
* Úteis para triagem.
Falsos Positivos no VDRL e RPR:
* Infeção viral
* Doença vascular-colagenosa
* Doença febril aguda
* Pós-imunização
* Gravidez
* Hanseníase
* Malária
o que sao os testes especificos (sifilis) ?
Positivos na fase inicial da infeção.
Positividade por muitos anos.
Podem ser o único teste positivo em pacientes com sífilis tardia.
Permanecem positivos após o tratamento.
Podem dar falsos positivos.
Testes Específicos FTA-ABS
T. pallidum é usado como antigénio.
Teste de absorção de Ac fluorescente.
O soro primeiro é absorvido com treponemas não patogénico, para remover os Ac de reação cruzada, antes da reação com antigénios de T. pallidum.
Testes Específicos TPHA
É um teste de hemaglutinação para T. pallidum.
Partículas sensibilizadas para antigénios do T. pallidum são misturadas com diluições do
soro do doente. Se os anticorpos estiverem presentes, as partículas aglutinam.
Falsos Positivos no FTA-ABS e TPHA
Doenças associadas com globinas aumentadas ou anormais.
Lúpus eritematoso sistémico.
Doenças da pele.
Ac antinucleares.
Dependência de drogas
Gravidez
qual é o diagnostico da sifilis congenita ?
Resultados positivos em crianças nascidas de mães infetadas podem representar
transferência passiva de Ac maternos ou resposta da própria criança à infeção.
Pesquisa de IgM aos 6 meses de idade.
Os títulos de Ac permanecem elevados em crianças com sífilis congénita.
quais sao as caracteristicas da chlamydia ?
Chlamydia trachomatis
Ordem Chlamydiales
Família Chlamideaceae
Género Chlamydia
Espécie trachomatis
como é o ciclo de multiplicacao da chlamydia ?
Dois tipos de formação:
CE: corpos elementares, forma de resistência e de propagação
CR: corpos reticulares, forma de multiplicação intracelular
Penetram através de lesões minúsculas. CE ligam-se a recetores específicos na célula
hospedeira. Uma vez no interior da célula a fusão da vesícula, contendo a Clamydia com os lissossomas é inibida por um mecanismo desconhecido e o CE inicia o ciclo de desenvolvimento.
Após 9-10 horas à invasão do CE: CE diferenciam-se em CR metabolicamente ativos.
Dividem-se por fissão binária. Produzem novos CE. Libertados e disseminados para as células adjacentes em 20 horas.
Desta forma, a Chlamydia trachomatis é um parasita intracelular obrigatório,
reconhecida como verdadeira bactéria. Tem atividade metabólica bastante restrita e não é capaz de produzir sua própria energia, utilizando o ATP produzido pela célula hospedeira, sendo,por isso, considerada um parasita energético.
qual é a cultura celular da chlamydia ?
Pesquisa de antígenos
Imunofluorescência direta (DFA)
Enzimaimunoensaio (EIA)
Pesquisa de ácidos nucleicos
Sonda de DNA
Amplificação (PCR, TMA)
Pesquisa de anticorpos
Imunofluorescência indireta (IFI)
Microimunofluorescência indireta (MIF)
Enzimaimunoensaio indireto (EIA)
Os dois antígenos mais bem relacionados ao diagnóstico e patogénese da infeção são o
antígeno lipopolissacarídico (LPS), mais encontrado no RB, constituído principalmente por ácido cetodeoxietanóico e o antígeno major outer membrane protein (MOMP). Os antígenos da MOMP, por serem espécies e subespécies-específicos, são utilizados para serotipagem.
qual é o exame cultural da chlamydia ?
É considerado o teste padrão no diagnóstico. Geralmente utiliza-se zaragatoa
endocervical ou uretral para sua colheita. O meio de crescimento mais utilizado para o cultivo é o de McCoy. A presença de inclusões citoplasmáticas de corpos elementares e reticulares, após o tecido ter sido corado com anticorpo monoclonal fluorescente, indica positividade do teste.
Possui sensibilidade de 70-85% e especificidade de 100%. O custo elevado, a demora no
resultado (48-72 horas após a inoculação) e os cuidados para manter os microrganismos viáveis
são os aspetos desfavoráveis do método.
o que é a imunofluorescencia direta (chlamydia) ?
Consiste na identificação dos corpúsculos elementares com o uso de anticorpos
monoclonais fluorescentes.
* Possui sensibilidade em torno de 85% e especificidade de 98%, quando comparado ao teste cultural.
A colheita de material é feita por zaragatoa endocervical.
As estruturas antigénicas são visualizadas através do uso de anticorpos monoclonais
contra o LPS ou o MOMP; este último oferece menos resultados falsos positivos, por ser mais específico; o primeiro favorece reações cruzadas com outras bactérias ou subtipo
de Chlamydias.
A técnica e interpretação dos resultados exigem treino técnico adequado, uma vez que, as ligações inespecíficas dos anticorpos levam a resultados falso positivos.
