Diagnostyka niedoborów odporności Flashcards

1
Q

Podstawowe badania w ocenie odporności humoralnej:

A
  • Najczęściej pomiar stężenia IgG, A, M
  • stęż IgE zwykle przy podejrzeniu atopowych alergii
  • IgD

-Pomiar stężenia poszczególnych podklas IgG w surowicy (IgG1-4) (zwykle niedobory idą w parach 1 i 3, 2 i 4)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Badania odporności humoralnej - limf B

A

CD19, CD20, CD22 i wyróżnienie:

  • dojrzałych limf. B (IgD+/CD27-)
  • limf. B strefy marginalnej (IgD+/CD27+)
  • limf. B pamięci (np. IgD-/CD27+)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Co zbadamy do oceny odpowiedzi poszczepiennej?

A

p/c przeciw … (np. WZW-B) (swoiste p/c)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Ocena obecności izohemaglutynin ma ograniczone znaczenie przed …. r.ż.

A

2r.ż.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Co możemy ocenić w przypadku agammaglobulinemii sprzęż. z chromosomem X?

A

=choroba Brutona

cytofluorometryczna ocena obecności białka btk w monocytach

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Podstawowe badanie w ocenie odporności komórkowej

A

Ocena liczebności subpopulacji limf. T (CD4+, CD8+, NK) i ich subpopulacji (np.Treg)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Jaki marker jest charakterystyczny dla wszystkich limf. T?

A

CD3

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Czy limf T zetknęły się z patogenem możemy sprawdzić patrząc na poziom:

A

aktywacji limf. T, np. liczebności limf. T-HLA DR+

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Ocena funkcji układu komórek żernych:

A

Liczba i ocena morfologiczna neutrofili

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Testy funkcjonalne dla limf T:

A

Test transformacji blastycznej limfocytów(T i B) w odp na stymulację mitogenami (PHA, PWM) i p/c anty-CD3 lub antygenami (np. PPD-oczyszczona tuberkulina)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Testy funkcjonalne dla komórek żernych:

A

Testy mierzące zdolność granulocytów do wytwarzania reaktywnych form tlenu (ROI) lub zdolność do zabijania wewnątrzkomórkowego mikroorganizmów

Skriningowo - pomiar chemiluminescencji po fagocytozie lateksu wzmacnianej luminolem (licznik scyntylacyjny)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Jakie badanie gdy podejrzewamy przewlekłą chorobę ziarniniakową? (i z czym ona jest związana)

A

-ona jest związana z produkcją wolnych rodników tlenowych w granulocytach obojętnochłonnych /makrofagach

Badanie “wybuchu tlenowego” cytofluorometrem przepływowym (zestaw Phagoburst-test) - można tym nawet określić nosicielstwo u matki

Można też cytofluorometryczną ocenę poziomu ekspresji gp91phox (to jest podjednostka NADPH-oksydazy)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Niedobór leukocytarnych cząstek adhezyjnych - LAD I - jakie badanie?

A

Badanie poziomu ekspresji molekuł adhezyjnych (CD11a, CD18)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Badania w ocenie układu dopełniacza

A

Określenie stężenia poszczególnych składowych układu dopełniacza w surowicy (najczęściej C3c i C4)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Jakie badanie w podejrzeniu wrodzonego obrzęku naczyniowego?

A

Ocena układu dopełniacza:

Pomiar stężenia w surowicy oraz badanie aktywności inhibitora C1 esterazy

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Mendlowska nadwrażliwość na zakażenia mykobakteriami - jakie badanie?

A

Poziom produkcji cytokin: IL-12, IFN-gamma

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Diagnostyka zakażeń prątkami atypowymi - jakie badanie?

A

Poziom ekspresji receptorów IFN-gammaR1, IFN-gammaR2, IL-12Rbeta1

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

Jakie badanie przy podejrzeniu defektów sygnałowania przez TLR?

A

Stężenie IL-6, TNF

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

Jakie badania pomocnicze w ALPS? (+rozwiń skrót)

A

=autoimmunologiczny z. limfoproliferacyjny

poziom wit. B12, IL-10, FasL

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

Co oceniamy w odpowiedzi poszczepiennej? (3)

A

Stężenie swoistych p/c
Obecność swoistych p/c
Aktywacja swoistych limf. T

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
21
Q

Stężenie swoistych p/c po szczepieniu - jakie testy?(2)

A

ELISA

ECLIA (elektrochemiluminescencja)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
22
Q

Obecność swoistych p/c po szczepieniu - jakie testy?(1)

A

Western blot

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
23
Q

Aktywacja swoistych limf. T po szczepieniu - jakie testy?(1)

A

cytometria przepływowa

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
24
Q

Diagnostyka niedoborów immunologicznych - co oceniamy?

A

Stężenie Ig (klasy, podklasy)

Fenotyp i stan aktywacji komórek ukł. immunologicznego

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
25
Q

Stężenie Ig (klasy, podklasy) - jakie testy?(3)

A

Test precypitacyjny z odczytem turbidymetrycznym lub nefelometrycznym
ELISA
Immunodyfuzja radialna

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
26
Q

Fenotyp i stan aktywacji komórek ukł. immunologicznego - jakie testy?(1)

A

Cytometria przepływowa

27
Q

Diagnostyka schorzeń alergicznych - anafilaktycznych - co oceniamy?(3)

A

Stężenie IgE
Test aktywacji bazofilów (BAT)
Stężenie składowych dopełniacza

28
Q

Stężenie IgE - jakie testy?(4)

A

Całkowite stężenie:

  • test RIST
  • immunochemiluminescencja

Alergenowo-swoiste IgE:

  • test RAST (stężenie)
  • western blot (obecność)
29
Q

Test aktywacji bazofilów (BAT) - jakie testy?(1)

A

cytometria przepływowa

30
Q

Stężenie składowych dopełniacza - jakie testy?(2)

A

Test precypitacyjny z odczytem turbimetrycznym lub nefelometrycznym
Immunodyfuzja radialna

31
Q

Diagnostyka schorzeń alergicznych - cytopenii autoimmunizacyjnych - co badamy?(1)

A

Obecność kompleksów immunologicznych na powierzchni komórek krwi obwodowej(erytrocytów)

32
Q

Obecność kompleksów immunologicznych na powierzchni komórek krwi obwodowej(erytrocytów) - jaki test?

A

Bezpośredni test antyglobulinowy

33
Q

Monitorowanie konfliktu serologicznego i diagnostyka choroby hemolitycznej noworodka - co badamy?(2)

A

Obecność swoistych p/c w surowicy krwi matki - pośredni test antyglobulinowy Coombsa

Związanie p/c matczynych z erytrocytami krwi pępowinowej noworodka - bezpośredni test antyglobulinowy Coombsa

34
Q

Oznaczanie grup krwi i transfuzjologia - co badamy?(2)

A

Ocena obecności:
antygenów grupowych na erytrocytach - hemaglutynacja bezpośrednia

alloprzeciwciał odpornościowych przed przetoczeniem krwi - pośredni test antyglobulinowy Coombsa

35
Q

Diagnostyka chorób autoimmunizacyjnych - co badamy?(5)

A

Obecność autop/c
Stężenie autop/c
Obecność kompleksów immunologicznych (w materiale biopsyjnym lub w surowicy)
Obecność czynnika reumatoidalnego (RF)
Stężenie/obecność inhibitora składnika C1 dopełniacza

36
Q

Obecność autop/c - jaki test?(4)

A

Immunofluorescencja pośrednia
Western blot
Immunoelektroforeza przeciwbieżna
Immunodyfuzja prosta (modyfikacja Ouchterlony’ego)

37
Q

Stężenie autop/c - jaki test?(2)

A

ELISA (powinowactwo autop/c)

Testy radioimmunologiczne

38
Q

Obecność kompleksów immunologicznych (w materiale biopsyjnym lub w surowicy) - jaki test?(4)

A

Immunofluorescencja bezpośrednia
Immunoelektroforeza
Immunohistochemia
ELISA/cytometria przepływowa (test z użyciem komórek Raji)

39
Q

Obecność czynnika reumatoidalnego (RF) - jaki test?(3)

A

RF klasy IgM:

  • aglutynacja bierna (test lateksowy, odczyn Waalera-Rose’a)
  • test precypitacyjny z odczytem turbidometrycznym lub nefelometrycznym

RF klasy IgA, G, E:
-ELISA

40
Q

Stężenie/obecność inhibitora składnika C1 dopełniacza - jaki test?(3)

A

Test precypitacyjny z odczytem turbidometrycznym lub nefelometrycznym
Immunodyfuzja
ELISA

41
Q

Diagnostyka nowotworów (w tym układu krwiotwórczego i chłonnego) - co badamy?(3)

A

Immunofenotyp i stan aktywacji komórek nowotworowych
Potencjał proliferacji
Oporność na chemioterapię

-wszystko cytometrią przepływową

42
Q

Diagnostyka gammapatii - co badamy?(3)

A

Skład białek surowicy - immunoelektroforeza (immunofiksacja)

Stężenie Ig i łańcuchów lekkich - test precypitacyjny z odczytem turbidometrycznym lub nefelometrycznym

Obecność białka Bence’a-Jones’a w moczu - Immunoelektroforeza

43
Q

Diagnostyka mikrobiologiczna - co badamy?(3)

A

Obecność antygenów drobnoustrojów

Obecność swoistych p/c - ELISA lub aglutynacja bierna

Wydzielanie IFNgamma przez swoiste limf. T aktywowane antygenami prątków gruźlicy

44
Q

Obecność antygenów drobnoustrojów - jakie testy?(2)

A

Aglutynacja bierna

Immunoelektroforeza przeciwbieżna

45
Q

Wydzielanie IFNgamma przez swoiste limf. T aktywowane antygenami prątków gruźlicy - jakie testy?(2)

A

ELISA (stężęnie IFNgamma)

ELISPOT (liczba limfocytów T wydzielających IFNgamma)

46
Q

Diagnostyka biochemiczna i toksykologiczna - co badamy? (3)

A

Oznaczanie stężenia wybranych białek markerowych (np. CRP, mioglobina, troponina I, kwaśna fosfataza sterczowa)

Oznaczenie stężenia białek surowicy krwi (np. albumina, haptoglobina, ceruloplazmina, transferryna)

Monitorowanie stężenia leków (np. digoksyna, cyklosporyna A, sirolimus, fenobarbital)

47
Q

Oznaczanie stężenia wybranych białek markerowych (np. CRP, mioglobina, troponina I, kwaśna fosfataza sterczowa) - jakie testy?(2)

A

Metody immunoenzymatyczne

Zautomatyzowane techniki enzymoimmunofluorescencyjne

48
Q

Oznaczenie stężenia białek surowicy krwi (np. albumina, haptoglobina, ceruloplazmina, transferryna) - jakie testy?(1)

A

Immunoprecypitacja z odczytem nefelometrycznym (immunonefelometria)

49
Q

Monitorowanie stężenia leków (np. digoksyna, cyklosporyna A, sirolimus, fenobarbital) - jakie testy(2)?

A

Metody:

  • immunofluorescencyjne
  • immunoenzymatyczne
50
Q

Diagnostyka endokrynologiczna - co badamy?(1)

A

Oznaczanie stężeń wybranych hormonów (np. insulina, hormony tarczycy, kortyzol, hormony płciowe, prolaktyna, gonadotropina kosmówkowa)

Test: elektrochemiluminescencja (ECLIA)

51
Q

Cytofluorymetria przepływowa - oceniamy komórkę w jakim otoczeniu?

A

W zawiesinie

52
Q

Cytofluorymetria przepływowa - co określamy?

A

Parametry (głównie morfologiczne)
Immunofenotyp
Aktywację czynnościową
Charakterystyka wybranych parametrów organelli komórkowych

53
Q

Cytometria przepływowa - co ocenimy?

A

Podstawowe parametry morfologiczne (wielkość i ziarnistość komórki)
->ocena morfologiczna komórek krwi obwodowej, aspiratu szpiku kostnego, bioptatu węzłów chłonnych, PMR

54
Q

Cytofluorymetria przepływowa - jak przygotowujemy komórki do analizy?

A

Immunofluorescencja bezpośrednia (częściej niż pośrednia, która pozwala na większą czułość analizy)
Komórki przed dializą inkubuje się z p/c monoklonalnymi znakowanymi fluorochromami lub z wybranymi barwnikami fluorescencyjnymi (np. jodek propidyny)

55
Q

Cytofluorymetria przepływowa - jaki laser?

A

Niebieskofioletowy - pozwala na analizę trzech podstawowych barw fluorescencji

56
Q

Cytofluorymetria przepływowa - przebieg

A

komórki jedna za drugą przepływają przez promień światła lasera

57
Q

Cytofluorymetria przepływowa - dwa parametry w ocenie morfologicznej

A

Parametr FSC(forward scatter) - Stopień ugięcia promienia światła na komórce w kierunku jego przebiegu jest proporcjonalny do wielkości komórki (detektor na wprost)

Parametr SSC(side scatter) - ugięcie promienia światła pod kątem jest proporcjonalne do ziarnistości komórki (detekcja detektorem umieszczonym pod kątem 90stopni względem promienia lasera)

58
Q

Cytofluorymetria przepływowa - po co inkubować komórki z p/c znakowanymi?

A

To pozwala na:

  • analizę immunofenotypu komórki (ekspresji analizowanych markerów powierzchniowych i wewnątrzkomórkowych)
  • metabolizmu komórki
  • stopnia aktywacji czynnościowej
  • fazy cyklu komórkowego
59
Q

Cytofluorymetria przepływowa - intensywność wzbudzenia barwnika zależy od:

A

Ilości barwnika związanego z komórką, co jest proporcjonalne do ekspresji ocenianego markera na/w komórce

60
Q

Cytofluorymetria przepływowa - prezentacja danych

A

Jednoparametrowo (histogram, np. wykres zależności SSC od liczby komórek)
Dwuparametrowo (dot plot - wykres kropkowy: każda analizowana komórka to kropka na wykresie)

61
Q

Cytofluorymetria przepływowa - kontrole negatywne (2)

A

Izotypowa - pozwala na wyeliminowanie wpływu nieswoistego wiązania znakowanych p/c z powierzchnią komórek

Izokloniczna - stos. w przypadku badania antygenów wewnątrzkomórkowych

62
Q

Cytofluorymetria przepływowa - co musimy zrobić z komórką by móc ocenić jej antygeny wewnątrzkomórkowe?

A

Utrwalić ją w paraformaldehydzie i permeabilizować(?) - to pozwala na wniknięcie p/c do komórki

63
Q

Analiza cytofluometryczna komórek krwi obwodowej jest prowadzona po…

A

hemolizie erytrocytów (chyba że je też oceniamy)

64
Q

Sortowanie cytofluorometryczne komórek - jak?

A

Gdy w komórce jest spełnione kryterium sortowania, to kropli buforu, w której znajduje się komórka, nadawany jest odpowiedni ładunek elektryczny
Krople przepływają między elektrodami, do których są przyciągane jeśli został im nadany ładunek