Définitions, techniques, et objectifs de l'anatomie pathologique

Question 1

Définition de l’anatomie pathologique ?

Answer 1

elle peut être définie comme l’étude des altérations morphologiques (macroscopique et microscopique) causées par la maladie à un tissus ou un organe.
Il s’agit donc d’une spécialité basée sur une analyse sémiologique d’altérations morphologiques.

Question 2

Quels sont les buts de l’anatomie pathologiques ?

Answer 2

1) Élaborer un diagnostique, ou des hypothèses diagnostiques pouvant être clairement comprise par le clinicien.
2) Préciser le pronostic d’une maladie en particulier en pathologie cancérologique.
3) mettre en évidence des marqueurs pouvant servir à la thérapeutique du patient
4) évaluer l’effet des thérapies administrées (chimio/radiothérapie ou anti-inflammatoire pour éviter les rejets de greffes).

Question 3

Quels sont les deux types de prélèvements possibles ? et leur formes ?

Answer 3

A) les prélèvements cytologiques, sont obtenus par FROTTIS ou raclage d’un organe. également par PONCTION, et CENTRIFUGATION d’un liquide cytologique recueillis.

B) les prélèvements tissulaires :
BIOPSIES, PIÈCES OPÉRATOIRES ou par AUTOPSIE.

Question 4

Quels sont les organes pouvant être ponctionnés ?

Answer 4

les ganglions lymphatiques, la thyroïdes le sein (par repérage échographiques)

Question 5

Dans quel contexte utilise-t-on la centrifugation ?

Answer 5

lorsque le liquide recueilli est trop volumineux pour pouvoir être étalé ainsi sur une lame. on procède alors à la centrifugation.

Question 6

Expliquez le processus de centrifugation.

Answer 6

Une partie du liquide récolté est placé dans des tubes (avec ou sans fixateur alcoolique) qui seront centrfugés.
Le produit du culot sera placé sur une lame (CULOT-SPOT) la lame sera ensuite colorée et analysée.

Question 7

Qu’est ce que la cytologie monocouche ?

Answer 7

également appelée cytologie en couche mince, ou cytologie en milieu liquide.

Très utilisées dans la détection de cancer du col utérin, elle est basée sur le principe d’aspiration et filtration.

après avoir frotté le col utérin avec une BROSSE, le matériel obtenu est placé dans un flacon de FIXATEUR ALCOOLIQUE numérotée avec les coordonnées de la patiente.
Un automate DISPERSE, FILTRE, ASPIRE et TRANSFERE le matériel sur une lame qui sera colorée et analysée.

Question 8

Quels sont les avantages de la cytologie en monocouches ?

Answer 8

le matériel résiduel se trouvant dans le fixateur alcoolique peut être employé pour faire des techniques complémentaires, comme la recherche de séquences virales d’HPV aidant à la classification des lésions cytologiques.

Question 9

quels sont les avantages de la cytologie et les limites ?

Answer 9

les avantages sont que la cytologie est rapide, peu coûteuse et donner des résultat fiable si elle est interprétée par un pathologiste averti.

Par contre, la cytologie ne fournit que des renseignements partiels/incertains.

Question 10

Comment expliquer que la cytologie soit si peu précise dans les renseignements qu’elle peut apporter ?

Answer 10

1) certaines anomalies cyto-nucléaires ne sont pas spécifiques et sont difficilement distinguables entre celles des CANCERS ou celle d’un PROCESSUS INFLAMMATOIRE.
2) La cytologie ne donne pas de notion architecturale tissulaire. et ne distingue donc pas les cancer in situ d’un cancer invasif.

Question 11

à quoi sert donc une cytologie au final ?

Answer 11

il s’agit plus d’un examen de dépistage et d’orientation.

le contrôle histologique est presque toujours nécessaire pour compléter les informations.

Question 12

quelles sont les conditions pouvant influencer la qualité d’un diagnostique pathologique sur bases d’études tissulaires ?

Answer 12

1) les pièces opératoires doivent parvenir rapidement au laboratoire dûment identifiées avec les renseignement cliniques adéquats.
2) la FIXATION des pièces opératoires doit être RAPIDE et concomitamment si possible, un prélèvement CONGELÉ de la lésion sera effectué pour le mettre dans une bio-banque.
3) l’examen MACRO doit être STANDARDISÉE et PRÉCIS.
4) les techniques permettant la réalisation des COUPES doit être standardisée efficacement.
5) un COMPTE RENDU doit être précis.

Question 13

Quelles sont les différentes étapes pour obtenir une coupe colorée à l’hématoxyline - éosine ?

Answer 13

1) l’encodage.
2) l’examen macroscopique et la fixation.
3) la déshydratation et la mise en paraffine.
4) la coupe et la coloration à l’hématoxyline-éosine (réhydratation).

Question 14

Que fait-on lors de l’encodage ?

Answer 14

Une feuille de demande accompagne les pièces opératoires ou les biopsies. dans celle-ci on retrouve : les données du patient, et les renseignement cliniques adéquats.
on y attribuera un code barre et un numéro individuel.

(faire le plus rapidement si la pièce n’est pas fixée pour éviter le phénomène d’auto-lyse).

Question 15

Que fait-on lors de l’examen macroscopique et la fixation ?

Answer 15

les pièces sont pesées, mesurées, orientées. les berges de résection sont marquées à l’encre de chine et enfin découpée.

Fixation le plus rapidement par la suite.
ensuite couper les pièces pour qu’ils fassent 20mm de long et 3 mm d’épaisseur pour les mettres dans les cassettes.

Question 16

Quel est le fixateur le plus utilisé ?

Answer 16

le FORMOL à 10% tamponné à pH neutre ou légèrement alcalin.

Question 17

quelles sont les règles pour une bonne fixation ?

Answer 17

• organes creux doivent être ouvert, les organes pleins doivent être tranchés en morceau de 3 à 10 mm d’épaisseur.
• le volume de fixateur minimum conseillé est 10x plus que le volume de la pièce.
• fixation suffisamment longue : 2 à 5h pour une biopsie, 24-48h pour une pièce opératoire.

Question 18

Quelle est la vitesse maximale de fixation du formol ?

Answer 18

1mm d’épaisseur par heure.

Question 19

que fait-on après avoir fixé les pièces opératoire ?

Answer 19

il s’agit de la phase de déshydratation et de mise en paraffine.

pour la déshydratation : on baigne les échantillons dans des bains d’alcools de gradients progressifs (70, 95, 100%) pour ensuite éliminer l’alcool par le xylène.

ensuite pour la mise en paraffine, ils sont mis dans un bain à 56°C (liquide).

Question 20

Combien de temps dure le processus de déshydratation complet ?

Answer 20

6 à 12h.

Question 21

Quelle est la remarque à retenir concernant le xylène ?

Answer 21

il dissout également les graisses. ainsi les adipocytes sont optiquement vide par défaut.

Question 22

Que fait-on après la mise en paraffine ?

Answer 22

le bloc paraffiné sera coupé au microtome dans des épaisseurs entre 3 et 5 microns, en ruban.
ils sont ensuite placés dans des lames numérotées, et colorées.

Question 23

que faut-il garder à l’esprit lorsque l’on colore une coupe paraffinée à l’hématoxyline-éosine ?

Answer 23

la majorité des colorants utilisés en routine sont aqueux ou alcooliques, ainsi ils ne peuvent se mélanger avec la paraffine présente dans la coupe.
Il faut dissoudre la paraffine en réutilisant du xylène et réhydrater les échantillons avec des bains d’alcools dégressifs (100, 95, 70%).

Question 24

Que colore l’hématoxyline et l’éosine ?

Answer 24

l’hématoxyline est le composé basique du colorant qui va fixer les éléments acides dans la cellules : ADN/ARN.
l’éosine : quant à lui, va fixer les éléments basiques dans la cellule dont le cytoplasme.

Question 25

à qui sert le safran ?

Answer 25

il est utilisé comme colorant du collagène

Question 26

combien de temps prends le processus de déparaffinage, réhydratation et coloration ensemble ?

Answer 26

1h.

Question 27

qu’est ce que l’examen extemporané ?

Answer 27

il s’agit d’un examen rapide, fait en moins d’une demi-heure à partir d’un échantillon NON fixé.
après l’encodage, et l’examen macroscopique, il place un échantillon dans un support qu’il congèlera à -20°C.

il va par la suite couper l’échantillon, colorer et examiner.

Question 28

Quelles sont les limites de l’examen extemporané ?

Answer 28

1) la congélation ALTERE la morphologie, ce qui le rends moin fiable qu’un examen classique.
2) ne donne qu’un reflet partiel de la lésion étant donné que l’examen se passe sur un maigre échantillon de la possible grande lésion.

Question 29

Quelles sont les indications d’une extemporanée ?

Answer 29

lorsque le diagnostic est susceptible d’apporter une modification au déroulement chirurgical.

1) s’il faut déterminer la nature bénigne d’une lésion : inflammatoire ou tumorale ? et qu’elle n’a pas pu être faite en préopératoire.
2) s’assurer que la lésion enlevée est bien représentative de la maladie.
3) s’assurer que les limites de résections sont saines.

il s’agit dans tout les cas d’un diagnostic de présomption qui doit être confirmé par les techniques classiques.

Question 30

Quelles sont les tissus qu’on ne peut techniquer et couper en extemporané ?

Answer 30

les tissus calcifiés.

Question 31

Quelle est la particularité de la coloration par Oil Red ?

Answer 31

elle doit se faire sur des échantillons non fixé non déshydraté (extemporanée) pour pouvoir garder les tissus graisseux intact.

Question 32

Qu’est ce qu’ un examen immunohistochimique ?

Answer 32

il consiste à mettre en évidence diverses protéines (considérées alors comme des antigènes) présentent dans les tissus à l’aide d’anticorps spécifiques contre elles.

Question 33

sur quel type de tissus peut on appliquer l’immunohistochimie ?

Answer 33

sur les préparation cytologique, les coupes paraffinées ou extemporanée (surtout pour certaines protéines ne pouvant être mise en évidence après fixation).

Question 34

quelles sont les indications d’une immunohistochimie ?

Answer 34

elles ont un intérêt :
-1) diagnostique, la mise en évidence de certaines protéines spécifiques à certaines tumeurs ou virus peuvent être faite.

• 2) un intérêt pronostic : la mise en évidence de Ki-67 est caractéristiques des cellules cyclantes. plus le degré de prolifération est élevé, moins bon est le pronostic.
• 3) il a un intérêt thérapeutique, certaines protéines sont considérées comme des cibles thérapeutiques.

Question 35

expliquez moi le principe d’une immunohistochimie :

Answer 35

Utilisation d’un anticorps de souris anti-antigène pour détecter un antigène par relation classique d’anticorps-antigènes.

par la suite on emploie un second anticorps : anticorps secondaire antisouris couplés habituellement à un polymère lié à une PEROXYDASE.

l’utilisation par la suite d’une réaction d’oxydo-réduction chromogène, consistant en la précipitation du polymère de la peroxydase.

Question 36

quels sont les 4 types de marquage immunohistochimiques ?

Answer 36

• nucléaires.
• cytoplasmique.
• membranaire.
• membrano-cytoplasmique.

Question 37

Immunohistochimie anti-CK, quelle utilité ?

Answer 37

mise en évidence des épithéliums normaux et pathologiques.

Question 38

immunohistochimie anti-CD45 : utilités ?

Answer 38

elle reconnait les lymphocytes T et B.

Question 39

quelle est la technique de biologie moléculaire vue en cours ? quelles sont les utilités des techniques de biologie moléculaire ?

Answer 39

elles permettent de mettre en évidence des mutations spécifiques qui peuvent être des cibles thérapeutiques, ou de rechercher les clonalités d’un lymphomes.

la technique vue en cours et l’hydridation in situ

Question 40

Qu’est ce que l’hybridation in situ ?

Answer 40

il s’agit de la mise en évidence sur coupes de séquences d’ARN ADN grâce à des sondes d’acides nucléiques complémentaire.
ces sondes sont couplées à des traceurs radioactif ou à une enzyme/fluorochrome.

Question 41

Qu’est ce que peux mettre en évidence, l’hybridation in situ ?

Answer 41

les séquences virales, les délétions ou les amplifications de certains gènes, des translocations des anomalies chromosomiques.

Question 42

expliquer les étapes de l’hybridation in situ :

Answer 42

1) dénaturer les deux brins d’ADN par la chaleur au niveau duquel on cherche la séquence cible.
2) on cherche à l’hybrider avec une séquence d’ADN complémentaire à celle recherchée, marquée au fluorochrome par exemple.
3) vue au microscope.

Question 43

Quels sont les critères aux quels doit répondre le compte rendu d’anatomopathologie ?

Answer 43

1) écrit et signé
2) conclusion SYNTHETIQUE
3) diagnostic lésionnel.
4) terminologie correcte.
5) pronostic surtout en pathologie tumorale.
6) prise en charge pluridisciplinaire.
7) critères d’assurance qualité.