Cours 9 Récepteurs à activité enzymatique et récepteurs nucléaires Flashcards
Quelles sont les trois sortes de récepteurs à activité enzymatique?
Les kinases et phosphatases de la tyrosine
Les kinases de la sérine/thréonine
Les guanylyl cyclases
Quelle est la différence entre un premier et second messager?
Le premier messager est le ligand alors que le second messager est la molécule qui transmet le signal intracellulaire (potentiellement vers des récepteurs nucléaires)
Les récepteurs tyrosine kinase ont combien de passages transmembranaires?
Un seul
Ecq un récepteur tyrosine kinase (RTK) agit seul ou en dimère?
En dimère
Quelles sont les trois parties des RTK et quelles sont leurs fonctions?
La partie extracellulaire lie le ligand de manière spécifique
La partie transmembranaire joue un rôle dans le changement de conformation et la dimérisation
La partie intracellulaire interagit avec les molécules adaptatrices/signalisation
Quels extrémité du récepteur est à l’extérieur de la cellule? (C ou N terminal)?
N-terminale
Caractéristiques de l’extrémité N-terminale extracellulaire?
Peuvent être
Riche en cysteines, glycine ou leucine
Peuvent avoir
Domaines semblables à:
l’immunoglobuline
EGF
Facteur 9, 10 ou 11
Grande variabilité permet de répondre à variété de ligands
Caractéristiques partie transmembranaire
Séquence d’Aa hydrophobes/insoluble (ancrage dans la membrane)
Valine, isoleucine, leucine, methionine, tryptophane, cysteine, phenylalanine…
Caractéristiques partie intracellulaire C-terminal
Activité enzymatique
Domaine kinase (transfert une molécule de phosphate pour activer une autre molécule) qui peut être continu ou séparé par des séquences d’acides aminés
À quoi sert la séparation des domaines kinases par des séquences d’Aa des RTK?
Spécificité du type de signalisation engendré
Qu’est-ce que l’EGF et combien de récepteurs sont dans cette famille? Combien de ligands se lient aux récepteurs de cette famille?
Epidermal growth factor
4 récepteurs: EGFR, ErbB2, ErbB3, ErbB4
11 ligands
Pourquoi y a-t-il beaucoup de recherche sur EGF?
Car c’est un facteur très important dans le développement de cancers
Vrai ou faux
Chaque récepteur de la famille EGF ne peut dimeriser qu’avec un récepteur identique, pas avec les autres récepteurs de cette famille. L’hétérodimérisation est impossible.
Faux l’homo et l’hétérodimérisation sont possibles, à l’exception de l’hétérodimérisation entre ErbB2 et ErbB3
Ecq l’EGF peut agir sous forme de monomère?
NON
Vrai ou faux
Chez les RTK, le ligand induit la dimérisation.
Faux
Le ligand lie le récepteur monomérique, ex chez l’EGFR, sur les domaines 1 et 3 ce qui permet de dévoiler le domaine 2/le bras de dimérisation.
Quelle est une autre fonction de la partie transmembranaire (chez l’EGF), à part ancrer le recepteur dans la membrane?
Possède un motif qui joue un rôle important dans l’autophosphorylation
Comment se produit l’autophosphorylation?
Lors de la dimérisation, la kinase intracellulaire d’un des récepteurs va phosphoryler l’autre partie (début de la cascade de signalisation)
Comment interagissent les deux parties intracellulaire des EFGR/RTK?
La partie amino-terminale d’un récepteur interagit avec la partie carboxyl terminale de l’autre. Les deux parties vont être phosphorylées.
Par quoi peuvent être phosphorylées les tyrosines intracellulaires des RTK?
Transphosphorylation (auto phosphorylation) ou d’autres tyrosines kinases solubles
Qu’est-ce qui est engendré par la phosphorylation des RTK?
L’activation / le recrutement de protéines (ex ERK, AKT…) qui vont induire la signalisation
Comment bloquer les RTK (EGFR) pour freiner le développement de cancers?
En utilisant des anticorps qui empêche la dimérisation en bloquant la liaison du ligand.
D’autres récepteurs apparaissent pour compenser le manque de signalisation en stimulant des voies semblables
Comment combat-on l’apparition de récepteurs autres que l’EGFR pour traiter le cancer?
En donnant des molécules qui empêchent la signalisation par voie intracellulaire
Quel est un exemple d’anticorps qui bloque un EGFR?
L’Herceptin qui bloque le récepteur HER2 (Human Epidermal Growth Factor Receptor 2)
Quelle autre façon est utilisée aujourd’hui pour inhiber l’activité des EGFR?
Inhibiteur qui bloquent l’activité enzymatique du récepteur ex en bloquant le site de liaison à l’ATP avec des RTKinhibitors
Quel est le médicament qui est donné pour traité de cancer du poumon en bloquant l’activation des cellules cancéreuses?
Gefitinib
Quelles sont les différences entre les RTK et les RCPG (récepteurs couples aux protéines G).
RTK
-Un seul passage intermembranaire
-Activité enzymatique intrinsèque dépendante de la dimérisation et l’autophsphorylation
-changement de conformation indirectement causé par le ligand
Quelles sont les trois étapes du mécanisme de signalisation des RTK?
1) Recrutement de protéines
adaptatrices (sur les sites phosphorylés)
2) Assemblage de complexes de signalisation (sur les protéines adaptatrices)
3) Activation des effecteurs (molécules qui vont vers noyau pour activer transcription de gènes)
Quels sont les deux sortes de sites des protéines adaptatrices?
Des sites de liaison au récepteur et des sites de liaison protéines-protéines
Rôles protéines adaptatrices
Reconnaître les sites phosphorylés sur la partie intracellulaire des récepteurs et se lier à d’autre protéines avec leurs domaines SH2 et SH3
=Assemblage du complexe de signalisation
Vrai ou faux
Les protéines adaptatrices sont toujours faites de SH2, SH3, et sites de liaisons aux récepteurs seulement.
Faux, elles peuvent aussi avoir un domaine kinase pour activer d’autres molécules
Quels sont les domaines que peuvent avoir les protéines adaptatrices et à quoi se lient-ils?
Lié à la membrane (ancrage): PH et FYVE
Lié aux tyrosines du récepteur: SH2 et PTB
Lie à des protéines cibles: SH3, WW et PDZ
IMPORTANT
À quoi se lie SH2 spécifiquement?
Propriétés de SH2?
Tyrosines phosphorylées
-100 Aa (petit)
-Une protéine peut avoir plr domaines SH2(collés ou pas) pour lier des protéines de signalisation aussi
- (1 feuillet B et deux hélices a)
À quoi se lie PTB? Propriétés
Tyrosines phosphorylées ou non
-100 à 150 Aa (petit)
-lie le motif: Asn-Pro-(X)-Tyr
-(2 feuillet B une hélice a)
À quoi se lie spécifiquement le domaine PH? Propriétés
Les différents phosphoinositides membranaires (phospholipides)
-120 Aa (petit)
-(séquence Aa différente mais 2 feuillets B et une hélice a)
-ancrage et messagers lipidiques
À quoi se lie SH3?
Des séquences protéiques riches en proline
À quoi se lie WW
Des séquences protéiques riches en proline
À quoi se lie PDZ? Propriétés
Résidus hydrophobes des cibles protéiques
-80 a 90 Aa
-4 classes selon cible reconnue:
C-terminal
Motif interne
Dimérisation PDZ-PDZ
Lipides
À quoi se lie FYVE?
PdtIns(3)P
Phosphatidyl-inositol-3-Phospate
Quelles sont les voies de signalisation activées par l’EGFR (et les autres RKT)? (4)
- MAPK
- PI3K
- PLCgamma
- STAT (réponse immunitaire)
En général quelles sont les trois étapes de l’activation de la MAPK?
1) Recrutement des protéines adaptatrices: Shc/Grb2
2) Activation de Ras (surexprimé dans cellules cancéreuses ->prolifération cellulaire)
3) Activation des MAPKs
Fonction Grb2
Une fois activé (phosphorylé) par le récepteur, Grb2 active SOS qui active Ras
Knock out (inactivation) du gène = mort de l’organisme
Le Ras a combien de gènes?
3 : H-Ras, N-Ras et K-Ras
Fonction Ras (Rat sarcoma)
Oncogene commun
Transfert d’une molécule de phosphate d’un GTP à une autre (MAPK) pour activer une voie de signalisation (GTPase)
Quelle autre molécule est nécessaire pour que Ras transfert un P du GTP à une autre molécule?
GEF (guanylate? exchange factor)
Le Ras inactif est lié au GDP, GEF permet d’échanger le GDP par un GTP pour activer le Ras qui peut ensuite donné son phosphate et redevenir inactif
La MAPK active quelles protéines?
ERK, p38 et JNK1
À quoi sert la voie de signalisation de PI3K?
Activation du métabolisme
Aussi: prolifération, différenciation, motilité, trafic intracellulaire
Combien de classes de PI3K y a-t-il?
3:
Classe 1: unité catalytique et régulatrice
Classe 2: unité catalytique seulement
Classe 3: unité catalytique et régulatrice
Quelle est l’enzyme la plus importante activée par PI3K?
Akt (active beaucoup de molécules donc cible chimiothérapeutique pour inhiber prolifération de cellules cancéreuses)