Construcción de genotecas Flashcards
¿en dónde se guarda la información de plásmidos?
bacterias
formas/estrategias para almacenar información de plásmidos
librerías:
- genomic DNA: cortas con enzimas de restricción, clonas, transformas en bacterias
- mRNAs: lo transformas a cDNAs con la transcriptasa reversa
cromosomas artificiales bacterianos (BAC):
- los cromosomas se comportan como un plásmido pero muy grande
virus
cromosomas artificales de levadura (YACS):
- cada que se divide el genoma ttambién se divide el cromosoma
función de las integrasas
ayudan a que fragmentos de DNA se integren en regiones específicas del genoma
integrar y expresar transgenes en genomas que no son de bacterias
para integrar transgenes a un genoma de mamífero necesitas:
un sitio parecido al sitio attP (en bacterias)
en mamíferos es un sitio pseudo attP
tecnología Gateway
se basa en recombinación
¿para qué sirven southern y northern blot?
northern: RNA
southern: DNA
¿qué se hace en una búsqueda por tamizaje?
placa con las bacterias, cada colonia tiene un plásmido distinto
lo pasas a una membrana
desnaturalizas el ADN para que se abra
donde obtengas señal te va a indicar que esa es la colonia que tiene la secuencia que te interesa
